吴 东
(浙江省绍兴市柯桥区鉴湖中学 绍兴 312030)
在植物光合色素的提取中,为了保护叶绿素不被破坏需要加入碳酸钙(CaCO3),不少学生会问碳酸钙到底是如何保护叶绿素的?能否替换成碳酸钠呢?要解决这个问题,我们得先来认识一下叶绿素。
叶绿素是植物或藻类细胞合成的一种具有吸收、传递、转化光能作用的复杂有机分子,除了在光合作用过程中具有极为重要的生理学意义,在植物系统学上也具有极为重要的分类学意义。在叶绿素的卟啉环中央,是一个呈螯合态的Mg2+,四周是四个吡咯环,这四个吡咯环相互连接,形成了叶绿素基本的复杂共轭体系结构,它还有一条长长的尾巴(即叶绿醇)(图1)。叶绿素通常存在于植物细胞叶绿体内的类囊体膜或藻类的光合膜上,一般吸收蓝紫光和红光。
图1 叶绿素的结构
叶绿素由德国化学家韦尔斯泰特在20世纪初,采用了当时最先进的色层分离法提取并分离了叶绿素;1915年,韦尔斯泰特荣获了诺贝尔化学奖。叶绿素分为叶绿素a~f和细菌叶绿素,其中高等植物中常见的为叶绿素a和叶绿素b,其区别在吡咯环Ⅱ上的附加基团上有差异: 前者是甲基(—CH3),后者是醛基(—CHO)。
叶绿素不很稳定,光照、过酸、过碱、氧气、氧化剂等都会使其分解。在酸性条件下,叶绿素分子卟啉环中的镁离子可被氢离子取代,生成黄褐色的脱镁叶绿素,所以在酸性条件下,叶绿素很容易被破坏。
要把光合色素提取出来,一个必要的操作就是粉碎植物细胞。在提取时,常通过添加一定量的石英砂或二氧化硅(SiO2)进行研磨,石英砂的颗粒比较粗大,二氧化硅则为粉末状固体。在破碎植物细胞的时候,植物细胞液泡中的大量酸性物质,如各种有机酸(如柠檬酸、苹果酸等)、氨基酸等酸性物质都被释放出来,并且与叶绿体中释放出来的叶绿素发生接触,极易导致叶绿素被破坏。要保护叶绿素,就必须“破坏”这些酸性物质,如何破坏酸性物质?用碱性物质来中和是最好的选择了,碳酸钙在这方面可以起到很好的作用:
既然碳酸钙具有碱性的特征,是否可以用碳酸钠来代替碳酸钙(CaCO3)呢?碳酸钠易溶于水,虽然也可以有效地中和细胞溶胶和细胞液中的酸性物质,但是碳酸钠在水中的溶解度过大,造成光合色素提取液碱性过大,很容易造成叶绿素的破坏,而碳酸钙则不会造成过碱的现象,碳酸钙由于其具有难溶于水的特性,可以非常方便地利用过滤法除去提取液中混有的碳酸钙微粒,而碳酸钠因为易溶于水,很难用普通的方法除去。
通过分析证明,叶绿素提取中是不可以用易溶于水的碱性盐类来代替碳酸钙的,其中包括碳酸氢钠(NaHCO3)或碳酸钾(K2CO3),虽然有的学生提出来是否可以控制碳酸钠的量来控制碱性,但是因不同植物叶片研磨液的酸度均不同,很难通过控制碱性物质的量来控制研磨后提取液的酸碱度,实际上的可行性很小。因此,在光合色素提取的实验中,最好采用碳酸钙作为叶绿素的保护剂。