段萃娟,王玉飞,凌爱琴,郭晓今,刘元明,王 莉,杨晓莉
HLA-B27抗原属于I型MHC,主要表达在机体所有的有核细胞上,尤其是淋巴细胞表面含量丰富。1973年国外有研究就表明HLA-B27与强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis, AS)密切相关[1,2];近年来国内许多研究均证实,AS患者HLA-B27阳性率高于正常人群,HLA-B27携带者患AS的相对危险率高达70%[3]。国内外文献主要是对地方人群的报道,而部队士兵这一群体受到的关注相对较少。为了确保新兵质量,2012年起已有总队把HLA-B27检测列入新兵复查项目。2017年9月,我中心集中检测了武警某部430例入伍新兵的HLA-B27抗原,了解部队新兵HLA-B27阳性率情况,探讨入伍新兵HLA-B27检测的意义,并为下一步追踪随访HLA-B27阳性士兵做准备。
1.1 对象 430例武警某部新兵,均为男性,年龄17~24岁,平均(18.9±1.6)岁 。
1.2 方法
1.2.1 仪器和试剂 Mindray BriCyte E6流式细胞仪,采用深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司提供HLA-B27双色检测试剂。
1.2.2 检测方法 取2支试管,1号管为同型对照管,加入20 μl IgG 2a-FITC/ IgG1-PE双色试剂,2号管为样本检测管,加入20 μl HLA-B27-FITC/HLA-B7-PE双色试剂,分别加入100 μl EDTA抗凝血,震荡混匀,室温避光孵育15 min;每管各加入2 ml稀释后1×溶血剂,300×g离心5 min;弃去上清,加入500 μl PBS震荡混匀;上机检测样本。
1.2.3 结果判定 平均荧光强度差值(MFI差值)≥平均荧光强度临界值为HLA-B27阳性标本,否则为阴性标本。
1.3 统计学处理 采用SPSS19.0软件进行统计学分析,各组间定性数据比较采用χ2检验, 以P<0.05为差异有统计学意义。
2.1 检测结果 430例武警新兵中HLA-B27阳性23例,阳性率5.35%。HLA-B27流式检测散点图(图1)。
图1 430名武警新兵HLA-B27检测结果
2.2 武警新兵HLA-B27检测结果与地方人群比较 武警新兵阳性率与安徽淮南市[4]、河北邯郸市[5]、四川达州市[6]、广州市[7],以及福建泉州市[8]五个地区的健康人群HLA-B27的阳性率相比,差异均无统计学意义(χ2=4.508,P=0.479);结果见表1。
表1 430名武警新兵与各地方人群HLA-B27阳性率比较 (%)
AS是一种主要累及脊柱、骶髂关节的慢性疾病,呈高度遗传性,目前依然无法证实该病发生的确切病因,但该病与HLA-B27有极强的相关性。近年来,HLA-B27的检测技术得到了极大的发展,流式细胞技术检测HLA-B27与PCR-SSP方法具有较高的一致性,是目前国际公认的检测方法之一[9]。本研究所用的流式 HLA-B27/B7双抗体检测法具有较高的灵敏度和特异度,是一种更为简便、快捷、高效、适合临床开展的检测方法[10]。
本研究不仅检测了武警新兵的HLA-B27的阳性率,还统计了文献中安徽淮南市、河北邯郸市、四川达州市、广州市,以及福建泉州市五个地区健康人群HLA-B27的阳性率,经比较这五个地区HLA-B27的阳性率不存在地区差异(χ2=3.992,P=0.407),武警新兵HLA-B27的阳性率与地方人群差异也无统计学意义。AS好发于青壮年男性,平均发病年龄为(23.6±8.7)岁,90%(P5~P95)发病年龄在12~40岁[11],在部队官兵中,主要以男性居多,且大部分处于易发病年龄,本次检测的新兵均为男性,平均(18.9±1.6)岁,属于AS的好发人群,且部队士兵每天从事不同强度的军事训练,尤其是较长时间保持同一个姿势的站立、高强度高难度的体能训练等,这些军事活动是否更容易诱发HLA-B27阳性士兵的AS,值得我们进一步探讨。
AS病程缓慢,早期较为隐匿,容易造成误诊或漏诊,错失最佳治疗时机,其早期诊断尤为重要,可以降低致残率,提高预后质量。下一步我们将跟踪随访HLA-B27阳性士兵,通过观察分析生活、训练情况,研究AS的诱发因素。对于部队已经确诊HLA-B27阳性士兵,建议多给予关注,定期进行ESR、CRP、CT或MRI等相关检查[12,13],早期发现疾病、早期治疗;通过本研究还发现,部队士兵的平均年龄偏小,容易在检测出HLA-B27阳性及诊断后出现各种心理问题,因此,应加强对战士开展心理健康指导。
总之,检测入伍新兵HLA-B27、观察长期的军事训练是否更容易诱发HLA-B27阳性者的引起AS,有助于减少部队非战斗损伤,提高部队战斗力。