浆细胞性乳腺炎分期与相关炎性因子及其信号通路的机制研究

曹中伟*，王 潇，尤广宁，周 敏，马新宇

（1．内蒙古自治区人民医院甲乳外科，内蒙古 呼和浩特 010010；2．内蒙古自治区人民医院临床医学研究中心，内蒙古 呼和浩特 010010）

浆细胞性乳腺炎是一种特殊类型的乳腺炎，主要发生于非妊娠和非哺乳期的女性[1-3］。大量浆细胞、B淋巴细胞和T淋巴细胞的浸润是浆细胞性乳腺炎的标志[4］。近年来，浆细胞性乳腺炎的发病率逐渐上升[5］，然而其病因和发病机制尚不完全清楚。

浆细胞来源于B淋巴细胞，在体液免疫应答中起重要作用。白细胞介素-6（IL-6）是由淋巴细胞、成纤维细胞和髓系细胞产生的炎症敏感性细胞因子，可以激活JAK/STAT信号通路，进而介导多种细胞功能[6］。肿瘤坏死因子α（TNF-α）通过将p65（Rela）DNA结合因子转运到细胞核来激活NF-κB因子，在炎症、免疫等过程中起着重要的调控作用。这些炎性因子不仅对浆细胞的分化至关重要，而且对浆细胞的存活也有重要意义[7］。因此本文针对浆细胞性乳腺炎分期与相关炎性因子及其信号通路的机制进行探究。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2016年09月～2017年12月来我院就诊的50例女性浆细胞性乳腺炎患者为研究对象，排除具有自身免疫性疾病、结核病史、乳腺其他疾病及感染者，近半年内未使用免疫抑制剂。

1.2 观察指标

①免疫组化检测手术切除浆细胞性乳腺炎组织中炎性因子TNF-α、NF-κB、IL-6、P-JAK和P-STAT3的表达水平。按照常规方法进行评分；②实时定量PCR检测上述炎性因子的mRNA水平；③通过Western bloting技术检测上述炎性因子的蛋白表达。

1.3 统计学方法

采用SPSS 19.0软件，计量资料数据以Mean±s表示，组间比较采用t检验，Spearman秩相关检验评价相关值，P＜0.05差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 一般资料

50例浆细胞性乳腺炎患者年龄22～60岁，平均35.1±7.4岁，病程4天～5年，平均171.8±7.4天，单侧发病46例，双侧发病4例。首发部位为乳头乳晕区34例，外上象限3例，外下象限4例，内上象限4例，内下象限5例。

2.2 浆细胞性乳腺炎组织中炎性因子的表达水平

为探究相关炎性因子在组织层面的表达水平，采用免疫组化法检测患者浆细胞性乳腺炎组织中TNF-α、NF-κB、IL-6、P-JAK和P-STAT3的表达水平。结果显示，与慢性期的患者相比，急性期与亚急性期患者中TNF-α、NF-κB、IL-6、P-JAK和P-STAT3的表达水平显著增加；差异有统计学意义（P＜0.05）。见图1。

图1 免疫组化法检测炎性因子的表达水平

实时定量PCR检测TNF-α、NF-κB、IL-6、P-JAK和P-STAT3的mRNA水平。结果显示与免疫组化检测结果基本一致，与慢性期的患者相比，急性期的患者中的TNF-α、NF-κB、IL-6、P-JAK和P-STAT3的表达水平显著增加，差异有统计学意义（P＜0.05），而急性期的患者中的TNF-α、NF-κB、IL-6、P-JAK的表达水平显著增加，差异有统计学意义（P＜0.05）。

图2 实时定量PCR法检测炎性因子的表达水平

通过Western bloting技术检测上述因子的表达情况。结果显示与慢性期的患者相比，急性期的患者中的TNF-α、NF-κB、IL-6、P-JAK和P-STAT3的表达水平显著增加，差异有统计学意义（P＜0.05），而急性期与亚急性期的患者中的TNF-α、NF-κB、IL-6、P-JAK的表达水平有所增加。

图3 Western bolt检测炎性因子的表达水平

2.3 浆细胞性乳腺炎炎性因子相关信号通路的机制

通过检测相关炎性因子的表达水平探讨浆细胞性乳腺炎相关通路。结果显示IL-6与p-STAT3染色呈显著正相关（r=0.411，P=0.020）；TNF-α与NF-κB染色呈显著正相关（r=0.408，P=0.025）。见表1、表2。

表1 浆细胞乳腺炎中TNF-α与NF-κB的相关性分析

表2 浆细胞乳腺炎中IL-6与p-STAT3的相关性分析

3 讨 论

浆细胞性乳腺炎是一种乳腺实质炎症性疾病。目前少有研究涉及浆细胞性乳腺炎分期与炎性因子相关性的探究。本研究发现TNF-α与NF-κB染色以及IL-6与p-STAT3染色呈显著正相关，说明TNF-α/NF-κB以及IL6/JAK/STAT3信号通路在浆细胞性乳腺炎的发生发展中发挥关键作用。然而，本研究具有一定局限性。（1）样本数量，病理类型还不够全面。（2）本研究为描述性研究。免疫组化分析提示相关炎性因子与临床分期密切相关，但信号通路在浆细胞乳腺炎发病中的确切作用尚需进一步研究。