母牛人工授精冻配技术研究

马振清

随着我国市场经济的飞速发展，国民生活质量和经济水平得到了显著的提高，因此人们对食品质量和产量的需求变得更高，这也对农业和畜牧业有了更高的要求。提高畜牧业的养殖技术，有利于提高肉制品、奶制品的产量，因此政府应该加大对畜牧业生产技术的更新和推广工作，进而促进我国的畜牧业发展。牛类是人类重要的肉食来源之一，我国也大力的开展牛类的养殖工作，在养牛行业中，牛的繁殖至关重要，养殖人员通过人工授精技术来提高母牛的受精成功率，进而提高牛的繁殖数量。近年来，有一种人工授精冻配技术被应用，通过液氮冷冻能更好的保存种牛的精液，提高的种牛的配种效能，为养牛企业带来了更大的经济效益。下面就来具体阐述下人工授精冻配技术的应用现状，及其中的技术要点。

一、 使用冷冻精液进行人工授精与受精成功率的关系

（一） 冷冻精液解冻时间对受精成功率的影响

在使用人工授精冻配技术进行母牛的人工授精工作中总结得出，冷冻精液解冻时间的不同会影响母牛受精的成功率。根据不同解冻时间将待受精的母牛分为3组，每组100头母牛，第一组选用刚解冻后的冷冻精液进行人工授精，100头母牛中成功受精的有81头，成功率为81%;第二组选用解冻后放置0.5-1小时的冷冻精液，100头母牛中成功受精的有75头，成功率为75%;第三组选用解冻后放置2-3小时的冷冻精液，100头母牛中成功受精的有20头，成功率为20%。因此得出，想要提高母牛的受精成功率，应该在解冻后立刻进行人工授精工作，解冻工作不能与人工授精工作有较长的间隔，精液解冻后放置时间不能超过1.5小时。

（二） 冷冻精液精子活力对受精成功率的影响

另外使用冷冻精液进行人工授精时，精子的活力也会对受精成功率产生影响。在同样的分组测试中发现，使用精子活力为0.4的第一组母牛中，100头母牛成功受精数量为74头，成功率为74%;第二组使用精子活力为0.5进行人工受精，100头母牛的受精成功率为82%。由此可见，冷冻精液中精子活力越高，受精成功率越高。

（三） 母牛发情期对受精成功率的影响

另外牛类在发情期刚刚结束时的受精成功率较高，在调查中发现，发情期结束时立即进行人工授精，受精成功率高达82%，而当发情期结束后时间越长受精成功率越低，因此最佳人工授精时间应该掌握在母牛发情期结束后1-8小时这个时间段，超过8小时成功率将明显降低。

二、 人工授精冻配技术的关键要点

（一） 优选冷冻精液保证精子活力

通常采集的种牛精液需要进行精子活力检测，选取时应该保证精子的活力在0.4以上，这样才能确保受精成功率。筛选出的优质精液密封在试管中，再将盛装精液的试管放置在液氮罐内真空冷藏。液氮罐内需要保证有足量的液氮，因此液氮罐内的液氮量需要进行定期检测，液氮出现消耗时应该及时填充，每次填充标准为罐内3-5cm水平高度的填充量。液氮罐的放置场所应该保证干净卫生，并且应该保证放置场所的干燥通风，放置场所内除了液氮罐不得放置其他杂物。对于每头种牛的精液应该分别放置，通过液氮罐加以区分，每一个液氮罐，只储存一头种牛的精液，并且在液氮罐上应该对种牛信息、精液存量及成活率等信息进行标注。在提取冷冻精液时，应该迅速取出需要的量，及时密封液氮罐，保证液氮罐内精液不会暴露在常温超过6秒，进而保证精液的质量不会出现变化。

（二） 合理的掌握冷冻精液的解冻时间

在进行人工授精操作时，首先需要进行冷冻精液的解冻工作，在解冻时冷冻精液要提取迅速、做好解冻液的预热工作，在解冻时需要通过不停的摇晃让精液充分解冻，在完全解冻后应该迅速提取其中精液进行精子活力检测，检测精子活力达到标准指标后，立即使用该精液进行人工授精工作。具体的冷冻精液解冻步骤如下：将1.5-2ml的解冻液装入试管，将解冻液试管放入解冻容器中，解冻容器内部盛装38℃左右的温水，对解冻液试管进行预热，预热时间为6-10分钟;预热工作完成后从液氮罐中迅速取出冷冻精液，将精液快速放入解冻液中，放入精液后应该一直在解冻容器中摇晃试管，加快精液的解冻速度，当精液解冻程度到四分之三左右时，从解冻容器中将试管取出，继续摇晃，直到精液完全解冻，从中迅速取出一滴精液制备成压片标本，通过显微镜进行精子活力检测，达到0.4以上的标准后，将剩余精液提取出来开始对母牛进行人工授精。冷冻精液的解冻工作一定要保证速度，减少冷冻精液解冻后的放置时间，可以有效地提高人工授精的受精成功率。

（三） 保证在母牛发情期进行授精工作

進行人工授精工作，应该掌握好母牛的发情期，通常根据品种的不同，母牛的发情时间也有所不同，例如，摩拉水牛的发情时间为48小时左右;南阳牛的发情时间为24小时左右。为了保证受精的成功率，应该及时查看母牛的状况，确定发情期结束后，应在1-8小时的黄金时间进行人工授精工作。

（四） 规范人工授精操作流程

进行人工授精工作时，应该通过制定规范的操作流程，保证人工授精的质量，做好对母牛生殖器的消毒工作，避免影响母牛健康。在进行人工授精操作时，首先应该将操作地点进行消毒，通过消毒液的泼洒减少操作场地的细菌数量。然后将待受精的母牛固定在输精架中;通过清洗液对母牛的外阴进行清洗，在通过酒精棉球对外阴进行擦拭，保证母牛外阴区域的洁净;最后使用高温消毒后的输精设备对母牛进行输精工作。

综上所述，提高对冷冻精液的管理，科学合理的把握人工受精的流程，掌握冷冻精液的解冻时间、精子活力和母牛的发情期，能够有效的提高人工授精冻配技术的受精成功率，进而提高养牛行业的生产水平，促进养牛行业发展，满足市场需求。

（作者单位：125300  辽宁省建昌县汤神庙动物卫生监督所）