高致病性猪蓝耳病活疫苗免疫效果观察及临床应用探讨

李想

高致病性猪蓝耳病是最近几年严重危害生猪养殖产业安全的主要病毒性传染性疫病，它是由猪繁殖与呼吸道综合症变异毒株引起的一种高度接触性传染性疾病。在曾经发生过高致病性蓝耳病的养殖区域，通过集中免疫蓝耳病活疫苗能够显著提高防疫效果，控制疾病流行，降低死亡率。本次研究在进行大量流行病学调查，临床症状病理学，解剖观察以及实验室诊断的基础上，选择使用蓝耳病经典毒株型（CH-1R）和变异毒株（JXA1-R株）活疫苗开展免疫试验，试验结果显示（JXA1-R株）活疫苗免疫接种之后，虽然会不出现不良反应，但会出现一定的临床症状，一般在五天之内即可恢复正常。通过两种疫苗的免疫抗体监测试验，可以发现，两种疫苗的免疫抗体均能够达到考核标准，其中（CH-1R）型活疫苗的抗体合格率最高，现将具体研究内容介绍如下：

1、实验材料和方法

1.1高致病性猪蓝耳病活疫苗安全试验

选择2014年6月凌源市乌兰白的一个规模化养猪场的4周龄以内未免疫接种蓝耳病疫苗的猪30头进行安全试验。在实验之前，采集实验猪的新鲜血液，进行血清检查，猪繁殖与呼吸道综合征病毒检测呈阴性。疫苗选择使用经典毒株型（CH-1R）和变异毒株（JXA1-R株）活疫苗。实验过程中，将30头猪随机分为两个组别，每组猪15头，一个未经典毒株组、一个为变异毒株组。然后将两个组别划分为3个小组，每个小组养殖在一个猪舍内。第一组和第二组的三个小组分别肌肉注射经典毒株型（CH-1R）活疫苗和变异毒株（JXA1-R株）活疫苗射1头份、5头份、10头份，免疫接种之后观察两组猪的不良反应。

1.2免疫效果试验

免疫效果实验选择使用经典毒株型（CH-1R）活疫苗和变异毒株（JXA1-R株）活疫苗。整个实验分为两个阶段，第一个阶段于2014年8月，在该乡镇的两个曾经发生过猪高致病性蓝耳病的养殖场内进行，第二阶段于2015年8月继续在上述乡镇曾经发生过蓝耳病的两个养猪场内进行免疫接种之后，并对这两个养殖场进行持续三年的跟踪观察。整个免疫过程中，每个养殖场划分为两个组别，第一个组别免疫接种经典毒株（CH-1R）活疫苗，第二个组别免疫接种变异毒株（JXA1-R株）活疫苗。仔猪在四周龄以内免疫接种1头份，后备母猪在配种前一个月免疫接种1头份，繁殖母猪在产仔后的十天内先免疫接种猪瘟疫苗，接种七天之后免疫接种，猪蓝耳病疫苗1头份。免疫抗体检测选择使用北京天之塔生物科技有限公司生产的猪高致病性蓝耳病ELISA试剂盒，操作方法严格按照试剂盒的使用说明书进行。免疫接种4～5周之后，采集不同组别猪新鲜血液，进行血清抗体监测，观察各个养殖场猪免疫接种六个月之后，养殖场猪蓝耳病的发病情况和死亡情况。

2、结果

2.1疫苗安全试验

两组猪分别接种经典毒株型（CH-1R）活疫苗和变异毒株（JXA1-R株）活疫苗，两个组别的三个小组的猪接种两种不同剂量的疫苗，均没有出现过敏反应症状。猪免疫接种之后出现的反应主要表现为体温升高，采食欲望下降，精神萎靡不振，上述症状在疫苗免疫接种1～2天后逐渐增多，接种3天之后发病症状达到高峰期，疫苗接种第五天之后临床症状逐渐消失，恢复正常，没有出现其他不良反应，由此可以看出经典毒株型（CH-1R）活疫苗和变异毒株（JXA1-R株）活疫苗的安全性菌比较好，推广变异毒株（JXA1-R株）活疫苗具有一定的安全性。

2.2抗体监测

通过对两种毒株的活疫苗进行抗体监测，监测结果显示经典毒株（CH-1R）活疫苗抗体监测合格率最高，合格率达到95%以上，变异毒株（JXA1-R株）活疫苗抗体监测合格率在83%左右，和经典毒株活疫苗相比，稍为逊色，但仍然达到了70%以上的考核标准。

2.3第一阶段免疫观察

2014年8月，对经发生过高致病性蓝耳病的两个规模化养殖场分别免疫接种了经典毒株型（CH-1R）和变异毒株（JXA1-R株）活疫苗，经过六个月的持续跟踪观察，经典毒株型（CH-1R）活疫苗，免疫六个月之后，猪发病率高达10%以上，死亡率在7.2%。免疫接种了变异毒株（JXA1-R株）活疫苗发病率在7.0%，死亡率在2.1%，是发病率和死亡率最低的一种。由此可以证明，养殖场发病和死亡，与疫苗毒株的類别有着很大关系。

2.4第二阶段免疫效果观察

2015年8月选择两种活疫苗，继续在上述乡镇曾经发生过蓝耳病的两个养猪场内进行免疫接种效果观察，观察结果和上述观察结果基本一致变异毒株（JXA1-R株）活疫苗免疫之后，发病率和死亡率均低于经典毒株型（CH-1R）活疫苗。由此可以进一步证明，养殖场疫病防控效果和疫苗毒株有很大关系。通过上述曾经发生过蓝耳病两个养殖场进行连续三年的跟踪调查，发现这两个养殖场在应用变异毒株（JXA1-R株）活疫苗免疫之后，繁殖母猪发病率、流产率、死亡率均比免疫灭活疫苗前大幅度下降，而且呈现每年大幅度下降的趋势。

3、体会

高致病性猪蓝耳病在免疫接种过程中，常规灭活疫苗，免疫抗原性较差，进入机体之后产生免疫应答时间较为缓慢，免疫空白期长达四周以上，在这四周之内，如果猪感染了高致病性蓝耳病病毒，势必会导致养殖场病情进一步流行传播。即便是四周之后，能够产生相应的免疫应答，猪群的抗体水平也处于较低状态，因此必须进行强化免疫，只有确保抗体水平达到标准之后，才能提高猪群的防疫能力，所以使用灭活疫苗存在着较大的免疫风险。而活疫苗进入机体之后能够快速增殖，具有较好的免疫应答性能，机体能够快速产生免疫抗体，具有持续时间长，免疫空白期短的特点，适合发病养殖场紧急免疫使用。而在本次免疫抗体监测过程中，两种灭活疫苗的抗体水平存在较大的差异性，其中经典毒株（CH-1R）活疫苗的免疫抗体水平要高于变异毒株，出现该种情况可能是现有的检测试剂比较适合于检测经典毒株（CH-1R）所产生的抗体，所以导致两种活疫苗的抗体水平存在一定的检测差异。

经过2014年8月到2015年8月的免疫效果观察和持续三年的跟踪调查，总结了高致病性猪蓝耳病活疫苗免疫的经验。首先，为了有效预防高致病性猪蓝耳病的传播流行，选择免疫疫苗时一定要选择一个县域内使用一种与流行毒株基因序列同源性最高的活疫苗进行集中免疫。目前，发病地区最好选择变异毒株（JXA1-R株）活疫苗，未发病的地区猪群、种公猪、怀孕母猪禁止使用活疫苗。已经发生过该种疾病的养殖场或养殖区域，经产母猪每年至少要跟胎免疫两次，分别在产前和产后两周免疫接种一头份，仔猪14日龄，免疫接种0.5头份，35日龄，强化免疫接种一次。对于曾发生过高致病性猪蓝耳病的疫区，应该对受威胁区域的假定健康猪紧急免疫接种活疫苗。各种活疫苗的接种量和接种方法，应该严格按照使用说明书进行操作，免疫接种28天之后，监测猪群的免疫效果。

（作者单位：122500辽宁省凌源市乌兰白动物卫生监督所）