血液筛查中常用的丙型肝炎病毒检测方法分析

谢玉娜 福建省龙岩人民医院检验科 （福建 龙岩 364000）

内容提要： 目的：探讨血液筛查中常用的丙型肝炎病毒检测方法分析。方法：选择从2016年3月～2017年3月输血前或手术前需检测丙型肝炎病毒抗体患者11216例纳入本次研究工作，均使用胶体金法丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒进行检测，使用酶联免疫吸附试验丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒及化学发光测定法丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒对检测结果为阳性及可疑的标本进行复检。结果：经胶体金法检测结果可知，检出阳性及可疑的标本223例；应用酶联免疫吸附试验法检验结果的阴性、可疑、阳性分别有27例、9例、187例；应用化学发光测定法阴性、可疑、阳性分别有21例、5例、197例；两组一致性强度较好（Kappa=0.728，U=16.21，P＜0.01）。检出56例可疑标本应用酶联免疫吸附试验法检验结果的阴性、可疑、阳性分别有5例、15例、36例；化学发光测定法阴性、可疑、阳性分别有6例、10例、40例；两组一致性强度中等（Kappa=0.496，U=6.78，P＜0.05）。检出167例阳性标本应用酶联免疫吸附试验法检验结果的阴性、可疑、阳性分别有6例、14例、147例；化学发光测定法阴性、可疑、阳性分别有5例、9例、146例；两组一致性强度较好（Kappa=0.704，U=11.57，P＜0.01）。结论：在临床血液筛查中使用酶联免疫吸附试验法、化学发光测定法等常用丙型肝炎病毒检测方法的可疑标本检测结果一致性中等，而阴性标本及阳性标本检测结果一致性较好，临床可使用更特异、更敏感检测方法以验证其可疑结果。

丙型肝炎病毒为临床常见的感染性疾病，且该疾病传染范围较广泛。相关临床调查结果显示，约有50%丙型肝炎病毒患者可转化成为慢性肝炎，个别患者甚至转变为肝细胞性肝癌、肝硬化等，危及生命。随着社会发展进步，临床医学水平持续提高，临床输血医学技术持续提高，输血而致感染被越来越受重视[1]。本次研究工作旨在探讨血液筛查中常用的丙型肝炎病毒检测方法分析，现报道如下。

1.资料与方法

1.1 一般资料

选择从2016年3月～2017年3月输血前或手术前需检测丙型肝炎病毒抗体患者11216例纳入本次研究工作。11216例患者的一般资料包括：男5911例，女5305例；年龄8～91岁，平均（55.55±18.35）岁。11216例患者或其家属均对本次研究工作目的、内容知情了解，并签署知情同意书，配合完成本次研究工作。本次研究工作均已征得医院伦理委员会批准同意。

1.2 方法

1.2.1 仪器选择

仪器选择FreedomEVOLyze全自动酶免分析仪的生产公司为瑞士TecanSchweizAG公司；CHEMCLI600科美东雅化学发光分析仪的生产公司为北京科美生物有限公司。

1.2.2 试剂选择

胶体金法丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒选择丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒的生产公司为英科新创科技有限公司；酶联免疫吸附试验法（即ENZYME LINKED IMMUNSORBENT，ELISA法）丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒的的生产公司为珠海丽珠试剂股份有限公司；化学发光测定法（即CHEMILUMINESCENCE IMMUNOASSAY，CLIA法）丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒的的生产公司为北京科美生物技术有限公司。

1.2.3 具体操作

给予11216例输血前或手术前需检测丙型肝炎病毒抗体患者以促凝管抽取其静脉血，接着离心10min（以3000r/min速度），常规分离血清，待检。首先，均给予11216份标本应用胶体金法丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒检测，观察记录其检测结果，若检测结果为可疑、阳性，则对其进行复检。复检选择酶联免疫吸附试验丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒及化学发光测定法丙型肝炎病毒抗体检测试剂盒进行，在整个实验操作过程中均严格依照试剂具体说明书进行[2]。

1.3 观察指标

观察记录①胶体金法检测结果；②分析两种复检方法的HCV抗体可疑、阳性检测结果；③分析两种复检方法的HCV抗体可疑阳性检测结果；④分析两种复检方法的HCV抗体阳性检测结果。

1.4 统计学分析

使用统计学软件SPSS22.0进行处理分析本次研究所得数据，以P＜0.05代表数据有差异性。

2.结果

2.1 胶体金法检测结果分析

本次研究的11216例患者经胶体金法检测，其检测结果中，共检出223例阳性及可疑的标本，包括可疑结果56例，阳性结果167例，阳性率为1.49%。

2.2 两种方法的HCV抗体可疑、阳性检测结果分析

经酶联免疫吸附试验法复检可知，有27例阴性，有9例可疑，有187例阳性；经酶化学发光测定法复检可知，有21例阴性，有5例可疑，有197例阳性；两组比较分析，Kappa=0.728，U=16.21，P＜0.01，即存有显著差异性，提示两种复检方法的一致性强度较好，见表1。

2.3 两种方法的HCV抗体可疑阳性检测结果分析

经酶联免疫吸附试验法复检可知，有5例阴性，有15例可疑，有36例阳性；经酶化学发光测定法复检可知，有6例阴性，有10例可疑，有40例阳性；两组比较分析，Kappa=0.496，U=6.78，P＜0.05，即存有差异性，提示两种复检方法的一致性强度中等，见表2。

2.4 两种方法的HCV抗体阳性检测结果分析

经酶联免疫吸附试验法复检可知，有6例阴性，有14例可疑，有147例阳性；经酶化学发光测定法复检可知，有5例阴性，有9例可疑，有146例阳性；两组方法的复检结果比较分析，Kappa=0.704，U=11.57，P＜0.01，即存有显著差异性，提示两种复检方法的一致性强度较好，见表3。

表1. 两种方法的HCV抗体可疑、阳性检测结果分析 (n)

表2. 两种方法的HCV抗体可疑阳性检测结果分析(n)

表3. 两种方法的HCV抗体阳性检测结果分析(n)

3.讨论

目前绝大部分医院已开展丙型肝炎病毒检测，但仅应用于输血前检查、手术前检查及怀孕前检查等[3]。当患者感染丙型肝炎病毒后，其初始临床症状体征不明显，随着疾病逐渐发展，可能转变为肝硬化、肝癌等。其次，部分丙型肝炎病毒携带者因早期未得到及时对症诊治，或在不知情的情况下以手术方式、献血方式传播。因此，临床需加强丙型肝炎病毒检测。

使用胶体金法检测丙型肝炎病毒抗体，该检测方法不但操作简便省时，不需使用特殊仪器，因此费用较低。而且胶体金法检测具有较高灵敏度及特异性，因此可以应用于紧急情况下初筛[4]。运用酶联免疫吸附试验法进行检测免疫系统正常患者，其丙型肝炎病毒抗体检出率可达99.00%。但酶联免疫吸附试验法的缺点为无论何种污染均十分容易导致假阳性结果。除此之外，酶联免疫吸附试验法的诊断试剂盒以选择人工合成多肽抗原、基因工程制造多肽等，通过间接法原理检测，但制造商不同，其测定结果存有较显著差异性，因此早期丙型肝炎病毒感染检测结果不理想[9]。化学发光测定法具有众多优势，如检测方便、检测灵敏度高、无放射污染、标记物来源多样、标记物有效期长等，因此被越来越广泛运用于临床检测中。但化学发光测定法的检测结果与具体酶标记物质量好坏具有一定相关性，同时，与酶（抗原或抗体）的纯度、亲和力及活性均密切相关[10]。从本次研究结果可知，酶联免疫吸附试验法与化学发光测定法对阳性标本、阴性标本的复检结果一致性均较好，但对于可疑标本的复检结果一致性则中等。其中原因考虑为所应用的丙型肝炎病毒抗体试剂盒的丙型肝炎病毒基因重组抗原各区段及比例不相同，或丙型肝炎病毒抗原各区段各区段及比例不相同[5]。

综上所述，临床血液筛查工作中，可选择更高特异性检测方法以验证可疑结果，从而提高临床用血安全性，降低临床医疗纠纷发生率，提高患者的信任度及满意度，促进疾病早日康复。