外周血中MAGE-A3mRNA的检测与肝癌早期转移的相关性研究

聂 影

（吉林市中心医院检验科，吉林 吉林 132000）

肝癌作为临床常见恶性肿瘤疾病，其发病率较高，临床分为继发性肝癌与原发性肝癌两类，我国以原发性肝癌较为常见，其危害性较大，是临床常见致死疾病之一。原发性肝癌早期无特异症状，患者难以早期发现，因而临床早期获诊率不高，大多患者获诊时已为中晚期[1]。目前在肝癌的治疗中根治性切除术应用较多，但存在较高转移风险，若未及时发现给予治疗，早期微小转移浸润附近组织导致患者5年生存率降低，为此，在肝癌患者的诊疗工作中，早期转移的诊断工作尤为重要[2]。相关研究提示MAGE-A3mRNA在肝癌早期转移的诊断中具有较高特异性，可为肝癌早期转移的临床诊断指标，本文为进一步探讨MAGE-A3mRNA与肝癌早期转移的相关性，选入80例研究对象完成对比观察，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料：将2016年1月至2017年12月我院收治的40例肝癌早期转移患者及同期在院体检的健康人40例纳入，对应入组患者组与对照组，患者组男26例，女14例，平均（49.63±5.14）岁，对照组男25例，女15例，平均（49.68±5.32）岁，此80例研究对象均知情本次研究内容，对比两组一般资料无显著差异（P＞0.05）。

1.2 方法：取1×107个PBMC混入Trizol试剂，再行三氯甲烷分层，异丙醇完成沉淀，利用乙醇洗涤干燥后，将RNA溶于无RNA酶的纯水，利用紫外光官渡对其进行定量后合成cDNA及RNA电泳合成。cDNA合成利用Promega公司的反转录试剂盒完成，操作严格按照相关说明书进行。PCR反应物严格按照同类研究引物序列完成，RT-PCT反应：25 μL反应体积内含有5 μL cDNA，外引物对200 nmol/L，TaqDNA聚合酶1 U，dNTP150 μmol/L，在DNA循环仪中变性3 min，温度94 ℃ 0.5 min，55 ℃ 0.5 min，72 ℃ 1 min，完成30次循环扩增，延伸7 min，获取PCR产物后外引物改变为内引物，完成第二轮PCR，扩增条件与第一轮相似。最终产物在2.0%琼脂糖凝胶上电泳，于紫外灯照射下对其DNA条带及凝胶成像分析仪照相。

1.3 观察指标：MAGE-A3mRNA、MAGE-A1mRNA表达阳性率情况。

1.4 统计学处理：数据录入SPSS23.0软件处理，%表示计数资料，χ2检验，P＜0.05有统计学意义。

2 结果

2.1 两组MAGE-A3mRNA、MAGE-A1mRNA表达阳性情况对比：本次研究的对照组40例正常人MAGE-A3mRNA、MAGE-A1mRNA表达阳性例数为0例、0例，对阳性表达率为0.0%、0.0%，患者组40例患者中MAGE-A3mRNA、MAGE-A1mRNA表达阳性例数对应为47.5%、42.5%，对比可知患者组MAGE-A3mRNA、MAGE-A1mRNA表达阳性率显著高于对照组（χ2=62.295，P=0.001；χ2=53.968，P=0.001）。

2.2 MAGE-A3mRNA与肝癌早期转移相关性：肝癌早期转移与患者年龄无相关性（r=0.867，P=0.069），与MAGE-A3mRNA、MAGEA1mRNA相关（r=0.812，P=0.001；r=0.632，P=0.001）。

3 讨 论

原发性肝癌为全球常见的恶性肿瘤，我国恶性肿瘤疾病中其致死率占第二位，目前在肝癌的治疗中根治术切除治疗后患者易发生转移情况，若在微小转移时及时发现并对症治疗，可有效提高患者5年生存率[3-4]。

本次研究对MAGE-A3mRNA、MAGE-A1mRNA与肝癌早期转移进行相关性分析，发现肝癌早期转移与MAGE-A3mRNA、MAGEA1mRNA表达阳性率存相关性（P＜0.05），在对照组正常人的MAGEA3mRNA、MAGE-A1mRNA表达阳性率均为0.0%。相关研究指出恶性黑色素瘤抗原家族（MAGE）为一类肿瘤特异性抗原，MAGE-A基因仅在肿瘤、胎盘、睾丸内表达，其他组织内部不表达，因而正常人外周血MAGE-A3mRNA、MAGE-A1mRNA表达阳性率为0.0%，因而通过MAGE-A3mRNA或MAGE-A1mRNA检测即可对肝癌早期转移患者做出准确判断[5]。

此外，本次所用巢式逆转录聚合酶链反应检测方法为近年来新兴MAGE-A基因检测方法较以往肝癌组织及癌旁组织检测创伤更小，且检查费用更低，有利于减轻患者经济负担。

综上所述，MAGE-A3mRNA表达情况与肝癌早期转移存相关性，外周血MAGE-A3mRNA检测可用于肝癌早期转移的临床诊断中。