VEGF基因沉默脂肪间充质干细胞对人MKN45胃癌细胞生长的影响

孙英慧

（北部战区总医院，辽宁 沈阳 110016）

肿瘤细胞有无限增殖特点，需要较多条件，其中血供最为关键，肿瘤患者肿瘤增殖转移过程中血管会起到重要作用，在肿瘤疾病治疗中，从控制肿瘤血管数量角度出发，能够对肿瘤生长起到一定的抑制效果[1]。肿瘤细胞想要实现自我增殖，可通过多种机制优化周围环境，诱导血管生成最为重要，血管生成诱导过程复杂性高，需要多个因素共同参与作用，VEGF（血管内皮生长因子）属于一个主要因素[2]。有研究发现，VEGF属于当前已发现的最强血管生成主要诱导因子，对肿瘤细胞生长、增殖和转移有促进作用[3]。脂肪间充质干细胞（ADSCs）为一种干细胞，本文研究VEGF基因沉默ADSCs对人MKN45胃癌细胞生长的影响，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2017年10月～2018年10月在本动物实验中心展开随机对照动物实验。根据VEGF基因序列相关原则，利用Blaster软件对比。具体分为空白对照组、阴性对照组及VEGF siRNA组。

1.2 方法

1.2.1 基因siRNA沉默

从siRNA中选择与VEGF有特异性相关序列。

1.2.2 基因介导传染

按照转染反应说明书要求操作，操作前取少量生长对数期MKN45胃癌细胞培养，选择不含抗生素培养基，持续24 h，加入含siRNA转染试剂，在细胞中孵育5 h，之后更换培养液。培养24 h、48 h、72 h、96 h后分别收集转染细胞，观察胃癌细胞生长情况。siRNA转染后使用RT-PCR方法检测细胞VEFG表达情况。利用CD34免疫组织化学法染色检测胃癌组织血管生成状况。

1.3 统计学方法

本次研究中所有试验数据均运用SPSS 20.0数据统计软件进行处理，其计量资料通过t检验。P＜0.05差异具有统计学意义。

2 结 果

2.1 VEGF表达情况

空白对照组、阴性对照组及VEGF siRNA组VEGF表达分别为（0.67±0.02）、（0.69±0.03）、（0.34±0.01），VEGF siRNA组VEGF表达明显下降，差异有统计学意义（P＜0.05）。

2.2 基因转染后胃癌细胞生长情况

空白对照组、阴性对照组及VEGF siRNA组肿瘤重量分别为（1.84±0.15）g、（1.83±0.14）g、（1.12±0.15）g，VEGF siRNA组肿瘤重量明显更低，差异有统计学意义（P＜0.05）。

2.3 各组MVD情况

空白对照组、阴性对照组及VEGF siRNA组MVD视野分别为（10.8±0.6）个、（10.7±0.5）个、（5.3±0.2）个，VEGF siRNA组MVD视野明显更低，差异有统计学意义（P＜0.05）。

3 讨 论

虽然肿瘤有无限增殖和转移能力，但是如果缺乏增殖和转移条件，这一过程将很难实现。肿瘤无线增殖和转移主要为营养支持，肿瘤中血管能够为其提供重要营养支持，同时这一过程受到较多生长因子的影响，复杂性高，VEGF属于最为主要的诱导因子[4]。ADSCs提取自脂肪组织，脂肪中含有大量间充质干细胞，具备体外增长以及多重分化等能力。VEGF作用机制为：（1）增加微血管通透性，促进血管分子向血管外渗透，肿瘤细胞可进入血管壁，发生转移；（2）通过EC上受体促进EC增殖，为肿瘤细胞转移提供条件[5]。肿瘤血管能够为肿瘤提供营养支持，血管尚未形成前，肿瘤几乎不会出现转移，随着病程延长，血管树木逐渐增多，增大肿瘤细胞进入血管的机会，造成病情恶化。

本次研究表明，在VEGF表达方面，VEGF siRNA组VEGF表达明显下降，差异有统计学意义（P＜0.05）；在基因转染后胃癌细胞生长情况方面，VEGF siRNA组肿瘤重量明显更低，差异有统计学意义（P＜0.05）；在MVD情况方面，VEGF siRNA组MVD视野明显更低，差异有统计学意义（P＜0.05）。

综上所述，VEGF基因沉默ADSCs后VEGF明显降低，混合MKN45胃癌细胞后接种未影响胃癌生长和血管形成。