山葵墨入病的预防研究

孙若轩

【摘 要】每当芥末作为高级调料出现在我们餐桌上时，我都会思考，芥末是由什么制作而成呢？它的价格为什么会这么高呢？经过查阅资料后了解到，上等芥末的原材料为山葵（直径2-3cm的山葵根价格大约在40万/吨），山葵是极为珍贵的调味食品，在国际市场上需求量极大，但是产量极少。山葵的生长条件特殊，对温度、湿度和营养物质的需求都非常严格，适宜生长种植的地方有限。同时，在种植区域较少的客观情况下，山葵还会受到墨入病（俗称黑斑病，黑心病）的侵害，严重制约了其产量，并降低其价值。在一次和父母到广元拜访朋友的情况下我了解到，四川广元部分山区就有种植。因此，在发现有实验条件得情况下，通过设计有关山葵墨入病致病菌葵茎点霉抑菌效果的比对试验，寻找出一种更有效的抑制山葵墨入病的方法，尽量提升其产量和质量。

【关键词】山葵种植；墨入病；抑菌研究

中图分类号： S436.3 文献标识码： A 文章编号： 2095-2457（2018）23-0230-002

DOI：10.19694/j.cnki.issn2095-2457.2018.23.104

【Abstract】When mustard appears on our table as a high grade condiment， I wonder， what is it made of？ And why is the price so high？ After consulting the materials， I learned that the raw materials of the best mustard are horseradish（The price of horseradish， 2-3cm in diameter， is about 400，000 per ton）， which is a very precious flavoring food. It is in great demand in the international market， but its yield is very small. The growing conditions of horseradish are special， the demand for temperature， humidity and nutrients is very strict， and the suitable places for growing and planting are limited. At the same time， under the objective situation of fewer planting areas， horseradish will also be affected by some kinds of disease， which seriously restricts its production and reduces its value. When I visited friends in guangyuan with my parents， I learned that there are horseradish planting in some mountainous areas of guangyuan， sichuan province. Therefore， in the case found that the experimental conditions， through the design about the bacteriostatic effect of horseradish virus comparison test， find out a more effective method of inhibition of horseradish virus， try to improve the yield and quality.

【Key words】Studies on horseradish cultivation； Virus in horseradish； Antibacterial research

0 引言

在芥末价格比较贵而我又喜爱芥末的情况下，我萌生了研究芥末原材料——山葵的念头：希望通过调研和试验研究，寻找出一种更有效的提升山葵产量和质量，预防山葵病变的方法。在父母朋友为我提供研究条件的情况下，通过实地调研后，我开始了我对山葵墨入病（俗称黑斑病，黑心病）的研究。

芥末加工的上等原料山葵，经济价值极高，无论在日本还是在中国，市场需求量都非常大。但根据调研和查阅资料发现，山葵受到墨入病侵害严重，是除了地域因素外制约其生长的主要因素。这种病害会引起山葵产量下降，品质降低。一般山葵的叶发病率为25%～70%，枝干发病率为90%～100%，损失在30%～70%之间，严重时甚至会连带毁坏整片种植区域。因此，山葵墨入病的防治研究对于提高山葵产量和质量具有一定的意义。

根据资料显示，山葵墨入病的病原为葵茎点霉，该病菌适宜的生长温度为19～25℃；适宜生长的pH值为6.0～9.0。墨入病在山葵整个生育期都可发病，随着山葵幼苗的生长，枝干发病率增加，发病程度加重。山葵种苗携带病菌是墨入病发病的主要因素，带菌率可以达到17%-85%。而病菌在田间除了通过雨水飞溅和灌溉水传播外，还可以通过各种农事活动、昆虫、种子、苗、土壤进行远距离传播。所以，墨入病传播途径广，传播率高，致病能力强。因此，在挑选好幼苗的前提下，要防止病害的传播蔓延，挑选抑菌效果好，消毒能力強的药剂尤其重要。

经调研发现，目前常用方法是使用药剂对山葵种子和山葵幼苗进行浸泡处理。经查阅资料，了解到有五种常见易得、适合用于生产的抑菌药剂，分别是：（1）50%苯菌灵1500倍液；（2）70%托布津1500倍液；（3）45%特克多悬浮剂2000倍液；（4）50%施宝功可湿性粉剂2000倍液；（5）5%霉能灵可湿性粉剂1000倍液。另外，我想创新性地对五种药剂进行两两搭配使用，打破使用单一药剂的局限。

我将使用上述药剂对从病变叶片中提取，在培养皿中培养的葵茎点霉进行抑菌能力实验。并对比单一药剂与复合使用方式抑菌能力的大小，对药剂的抑菌能力进行定性定量的评价，最终得出最优的抑菌药剂及使用方式。

1 实验准备

我在山葵养殖基地工作人员的帮助下，通过病变特征挑选病变的山葵，首先摘取同一植物上的病变程度相当的叶片、叶柄、茎干，其次，再分别摘取病变程度不同的叶片、叶柄、茎干。

采集好样品之后，参考资料，着手制作PDA培养基（全称马铃薯葡萄糖琼脂培养基，是一种最常用的菌落培养物质）：马铃薯洗净去皮，称取200g马铃薯切成小块，加水煮烂（煮沸20～30分钟，能被玻璃棒戳破即可），用八层纱布过滤，加热，再据实际实验需要加琼脂（15-20g），继续加热搅拌混匀，待琼脂溶解完后，加入20g葡萄糖，2gKH2PO4，0.5gMgSO4，10mg维生素B1，搅拌均匀，稍冷却后定容1升，调PH为7-8，分装，灭菌20分钟后取出，乘其未冷却凝固前倒出，冷却后用于实验。

准备好培养基后，提取葵茎点霉来进行抑菌实验，提取过程如下：选取山葵的某一个病变部位作为样本，首先用无菌水冲洗，放入75%乙醇中消毒1min，再用无菌水冲洗3次左右，然后用灭菌的滤纸吸去多余的水分，剪取病变处的植物组织，用镊子将植物组织块放在之前制备好的PDA培养基上，然后放入22-25℃的培养箱中培养5天左右。之后，再挑取出上述培养基上长出的菌落，获得培养物。

2 实验过程

2.1 实验设置

（1）对照组：将不加任何农药的培养基设置为三组平行的空白对照组。

（2）单一抑菌剂实验组：苯菌灵、甲基托布津、霉能灵、百菌清、链霉素（设置三组平行对照）

（3）混合抑菌剂实验组：苯菌灵+托布津、苯菌灵+特克多悬浮剂、苯菌灵+施宝功可湿性粉剂、苯菌灵+霉能灵可湿性粉剂、托布津+特克多悬浮剂、托布津+施宝功可湿性粉剂、托布津+霉能灵可湿性粉剂、特克多悬浮剂+施宝功可湿性粉剂、特克多悬浮剂+霉能灵可湿性粉剂、施宝功可湿性粉剂+霉能灵可湿性粉剂（设置三组平行对照）

2.2 实验方法

按照单独抑菌剂实验组和混合抑菌剂实验组的计划配置好抑菌药剂，同时再按照培养基的制作方法和对比实验的组数制作16*3=48个培养基。分别在培养基中单独加入配置好的相应实验组的抑菌药剂。再加定量入事先已培养好的，生长一致的山葵墨入菌菌落，放入恒温培养箱中培养5天。首先通过肉眼观察菌落形态，再利用下列公式计算抑菌率：

抑菌率=（对照菌落直径-处理菌落直径）/对照菌落直径*100%

3 实验结果

（1）单一抑菌剂效果：

苯菌灵>甲基托布津>百菌清>霉能灵>链霉素

（2）混合抑菌剂效果：

①&②、①&③、①&④、①&⑤>②&③>②&⑤>④&⑤>②&④>③&④）>③&⑤

其中：①：苯菌灵②：甲基托布津③：霉能灵④：百菌清⑤：链霉素

4 小结

通过对比实验结果我发现，復合药剂使用后的抑菌效果没有单一药剂的抑菌效果明显，说明当两种或两种以上药物合并使用后，反而会使各自的抑菌作用减弱或消失，不推荐使用。在单一药剂中，苯菌灵的灭菌效果最好，如果山葵在生产过程中出现大规模植株患病的情况，更建议喷洒苯菌灵。