潘琳
阿克苏地区检验检测中心 新疆阿克苏 843000
酶标仪一般在食品工业、临床检验等方面被广泛使用,其主要是对样本进行检测,对样本进行定量或者定性的检测,一般通过吸光度进行确定。但在实际检测的过程中,其会受到保温、洗涤等多方面的因素影响,进而使得测量结果发生变化。因此,如果想要提升测量结果的精准性,就必须要对测量过程中的质量严格的把控,对酶标仪进行定期的计量。但纵观国际上还没有对其性能检测和评价的相关完善报道,与此同时,国家在计量检测中相应的规程没有得到良好的应用和实施,因此导致在诸多的临床实验中,针对于酶标仪没有准确且系统的计量检测计划。因此,通过笔者的实践和探索,拟定了一套计量检测的方式以供参考。
酶标仪一般都是通过其产生的显色反应,并根据不同物质对谱线的吸收原理,遵守朗伯比尔相关的定律,从而进行相关分析的仪器,其主要通过比色法来进行酶含量的确定。酶标仪从某种方面来讲就是一台光电比色计,或者说其为分光光度计,因为其主要的工作原理、结构都与光电比色计相同[1]。其主要由单色器、光源等系统组成。
在临床工作中对血清或其他组织进行测量,测量其中的酶的水平,对诸多疾病的诊疗都有着非常重要的作用。在测定酶的过程中,可以利用生物化学相关的方式对酶的活性进行测量[2]。另外一种方式为将酶作为一种蛋白,继而利用免疫方法来对其质量进行测定。相比来说测量酶的活性是最广泛应用的方式,主要源于其迅速、灵敏等优势,因此被广泛的使用,其主要是通过酶标仪来进行相关的测定工作。与此同时,近些年来酶标仪相关的技术也有所提升,进而也有效提升了酶免疫分析法的质量,其精准度、自动化度明显提高。最明显的为近些年来进口、国产的酶标仪的质量有所提高,但通过相关探究发现,虽然酶标仪的发展迅速,但是关于其计量测量相关的方法仍不多见。其中由于太过简单,或者太过具体,又或者过于笼统,从而导致没有使用、通用的价值,也没有良好的操作性。近些年来,酶标仪已经成为与临床实验、食品工业相关的医疗机构、食品厂家中的必备设备之一。但其在应用中也是频繁出现问题,因此对酶标仪进行质量方面、性能方面的研究已迫在眉睫[3]。但我国关于酶标仪相关的计量检测规程没有在实际中进行严格的落实,也没有足够的实用性,但在实际工作中又必须对其进行质量控制和计量检测。因此针对于不同厂家的酶标仪进行论证并建立相对完善的计量、检测方式十分有必要。
滤光片的波长准确度是通过检测值检取标定值所产生的数值,其应控制偏差在510nm以内。
在酶标仪的吸光度方面,其吸光度值会因为漂移而产生变化,其在十分钟之内产生的变化数值应该控制在0.005A以内,而对其电压的变动在百分之十的时候,酶标仪相关的吸光度值应该控制在0.003A以内。
在进行该项检测时,首先应该准备十个小孔杯,然后在小孔杯的通道中,在其相应的位置中加入100ul的蒸馏水,同时将其调零,然后每过三十分钟450nm时进行一次测定,反复观察到两小时,所得出的测定值与原有的零点之间产生的差数值,则被视为零点漂移,其偏差应该控制在0.003A以内。
首先要选取三块标准干涉滤光片,这三块滤光片要有不同的波长,然后对随意选择的三个通道进行相关的平行测定,该测定每天要进行两次,总共测定达到六天,分别进行计算每批内、每天的每批之间、隔日间产生的精密度以及总精密度相关的CV百分比,同时要对其偏差进行控制,要控制在0.09A以内。
当在450nm单波长状态中时,要使用蒸馏水来进行调零的工作,然后再采用五块标准干涉滤光片,同样也要选取不同波长的滤光片,然后随意选择对应的五个通道进行平行测定工作,同样是总共测定六天,且每天要进行两次测定。然后进行回归方程的计算,在方程中利用r来表示相关的系数,用sy.x来表示其标准估计误差。与此同时要控制器偏差在百分之五以内。
酶标仪在我国临床实验、食品工业等方面有着越来越多的应用,因此在实际对其应用的过程中,需要定期的校准,同时利用较为系统、完善的校准方式进行校准工作,这是从事关于临床实验相关工作的人员的首要任务,其可以提升相关检测结果的精准度和可比性。