建昌马血液生理生化指标的测定分析

杨世忠 ，林代俊 ，郑玉才 ，王 毅 ，张 涛 ，周 潇 ，陈 益

（1.凉山州畜牧兽医科学研究所，四川 西昌 615042；2.西南民族大学生命科学与技术学院，成都 610041）

建昌马是中国山地马的优良地方品种，是西南马的类群之一，主要分布在四川省木里、盐源、金阳、西昌、普格等县市，体型较矮小，对栖息地的生态环境有很好的适应性［1］。有关建昌马的生理常值迄今为止没有进行过系统的研究，而国外发表的马的血液生理生化常值与建昌马的实际情况存在差异［2］。因此，本研究开展了建昌马血液生理生化指标的系统测定，以期为其遗传育种、疾病诊断等提供必要的数据。

1 材料与方法

1.1 样品的采集

2015年12月—2016年9月在四川省凉山州随机选择建昌马的中心产区3个有代表性的地点，对1 063匹成年建昌马（公马285匹、母马778匹）进行了体温、脉搏、呼吸等生理指标的测定；用真空采血管（含抗凝剂和无抗凝剂）采集成年马血液（公马15匹，母马25匹），分别制备抗凝血和血清，用于血液常规和生化等指标的测定。血清保存于-20℃冰箱至分析。

1.2 血液常规指标的测定

血液常规指标按常规临床检验的要求测定。红细胞沉降速度：用长管法（魏斯特格林法）；红细胞计数：用钮巴氏改良血细胞计算板，生理盐水作稀释液；白细胞计数：计算板同上，用l%冰醋酸和1%盐酸混合作稀释液；血红蛋白：用萨里氏法；白细胞分类计数：涂片干燥后，用罗曼洛夫-姬姆萨法染色并分类计数；血清钾：用四苯硼钠比浊法；血清钠：用焦锑酸钾法；血清钙：用乙二胺四乙酸二钠滴定法；血清磷：用氯化亚杨法；血糖：用福林-吴宪氏法。

1.3 血液生化指标的测定

建昌马的血液生化指标采用AUTOLAB PM4000全自动生化分析仪（意大利），按试剂盒提供的说明书要求测定。使用的14种试剂盒均购自中生北控生物科技股份有限公司。

1.4 血液电解质的分析

电解质采用SPOTCHEM EL SE-1520电解质分析仪测定，仪器购自爱科来医疗电子（上海）有限公司。

2 结果与分析

2.1 建昌马的基础生理指标测定

本研究测试分析的建昌马共1 063匹，其中公马285匹，母马 778匹，其基础体温公马（37.05±0.76）℃，母马（37.33±0.72）℃；呼吸频率依次为每分钟24.23次±9.96次和23.73次±9.15次；脉搏依次为每分钟41.42次±5.95次和40.41次±6.89次。这些指标在公马与母马之间无明显差别。

2.2 血液常规测定

由表1可知，建昌马血液常规的性别差异主要体现在红细胞及血红蛋白方面，其中公马血液中的红细胞数量、血红蛋白含量、红细胞压积、红细胞平均血红蛋白量均显著或极显著低于母马（P＜0.05或P＜0.01），其他指标无显著差异（P＞0.05）。与普通马相比，血液中红细胞数量和血红蛋白含量、淋巴细胞数量及血小板数量均偏低，而红细胞平均血红蛋白含量却是普通马的1倍。

表1 血液常规检测指标

2.3 血液生化指标分析

由表2可知，建昌马公马血清中总胆固醇、甘油三酯和总胆红素含量均显著或极显著低于母马（P＜0.05或P＜0.01），但肌酐和无机磷含量均显著或极显著高于母马（P＜0.05或P＜0.01），其他指标无显著差异（P＞0.05）。建昌马血液中碱性磷酸酶、源于肝的转氨酶、谷氨酰转肽酶活力存在较大的个体间差异，但与普通马较接近；母马血液甘油三脂含量也存在很大的个体差异。与普通马相比，建昌马血液中尿素氮含量高，而血糖含量偏低。

2.4 血液电解质测定

表3结果表明，血清中的Na、K、Cl含量在建昌马公马与母马之间均无显著差异（P＞0.05），且与普通马的参考值接近。

表2 建昌马血液生化指标

表3 建昌马血清电解质的含量mEq/L

3 讨论

血液生理生化指标是反映动物内环境稳态的核心参数，包括血细胞数量和比例、血清蛋白含量和组成、血脂含量和组成、酶活力、血糖含量等，与机体的物质代谢和能量代谢水平直接相关，并在一定程度上受物种、环境、营养状态、疾病等因素的影响。

本研究测定的建昌马基础体温与李诗洪等［6］分析的建昌马数值十分接近，但呼吸频率介于12～28次/分钟之间，脉搏次数也存在一定差异。这可能与试验马生活的地区海拔差异或活动状态不同有关。

本研究显示，建昌马公马血液中的红细胞数量低于母马（表 1）。这与李诗洪等［4］报道的较高海拔（2 600 m）地区的建昌马结果类似，但血红蛋白含量、红细胞压积与报道的不同。这可能与地区间差异或试验马的数量不同有关。建昌马的血红蛋白含量与肖开进等［5］对云南矮马和安宁果下马的测定结果接近，但红细胞数量明显低很多。这可能与分析方法、实验动物的选择有关。建昌马栖息的环境与安宁果下马类似，二者血红蛋白水平接近，反映了它们对环境海拔高度的适应性。建昌马的红细胞数量和血红蛋白含量母马高于公马，与朱辉清等［6］的报道结果类似，可能与建昌马的血液生理生化组成特性有关。建昌马红细胞数量低于普通马，但红细胞平均血红蛋白量高，导致血液中的血红蛋白含量、红细胞平均血红蛋白浓度与普通马的差异减小。该结果表明，高浓度的血红蛋白仍可有效地运送氧气到组织中。建昌马的血小板数量明显低于普通马，这是否提示其血液凝固特性有改变尚不清楚。至于淋巴细胞数量的差异，推测可能与马的品种有关［2］。

血液生化指标种类多，反映了机体在肝、肌肉等组织中的物质和能量代谢状况，并受品种、性别、年龄、训练状态等多种因素影响［2，7-8］。因此，针对不同品种以及不同生态环境等，测定马的血液生理生化值是十分必要的。建昌马血液生化值存在性别差异，其中公马血清中总胆红素含量低于母马，可能与其红细胞数量少有直接关系。因为胆红素来自红细胞降解［9］；而肌酐含量高于母马，有助于其在肌肉中作为底物合成磷酸肌酸，作为能量储备［9］，符合其性别特征。推测血液肌酐水平的差异或许与不同性别、不同年龄马的运动多少有关。另外，建昌马血液中尿素氮含量明显高于普通马、蒙古马和英纯血马［10］，可能与品种差异有关，或许还与建昌马血糖含量偏低有关［5］，这需要进一步研究比较。不同性别建昌马血液中Na+、K+和Cl-离子的含量相似，且Na+和Cl-离子的含量与普通马接近（表3），也与Kiso马与普通马的结果十分接近［2］。提示Na+和Cl-两种细胞外液的主要阳离子和阴离子的含量对机体的正常功能和稳态十分重要。

总之，建昌马是优质的西南马品种，本研究通过对建昌马血液生理生化指标的测定，为建昌马的选育、开发利用和健康状况监测、疾病防治、临床诊断等提供更全面、科学的依据，对建昌马遗传资源保护与利用有直接的参考价值［11］。