30年冷冻湖羊“复苏”记—“湖羊冷冻精液和冷冻胚胎保存效果验证试验”项目通过验收

文│本刊记者 刘源

2018年，全国畜牧总站在浙江省湖州市、杭州市等地组织实施了“国家家畜基因库湖羊冷冻精液和冷冻胚胎保存效果验证试验”项目，本项目由国家家畜基因库和浙江省畜牧技术推广总站共同承担，杭州华丽牧业有限公司和长兴永盛牧业有限公司两个湖羊种羊场参与实施。为科学客观评估试验效果，进一步做好家畜地方品种保种工作，10月22～24日，全国畜牧总站组织由浙江省农业科学院、扬州大学、内蒙古自治区农牧业科学院、内蒙古自治区农牧场科学技术推广站、浙江省湖州市畜牧兽医局组成的专家组一行五人，前往湖州、杭州两地，对项目进行验收。农业农村部种业管理司畜禽种业处周晓鹏、全国畜牧总站畜禽资源处处长刘长春、全国畜牧总站畜禽遗传资源保存利用中心（国家家畜基因库）常务副主任孙飞舟、浙江省畜牧技术推广总站副站长任丽等参加了项目验收鉴定。

认真谋划，推动首例活体验证试验顺利实施

孙飞舟向专家组介绍，2017年年底，全国畜牧总站就开始谋划在2018年对国家家畜基因库长期保存的湖羊冷冻胚胎、冷冻精液开展复苏试验，检查保存效果。湖羊是我国特有的羔皮和多胎绵羊品种，也是首批列入《国家畜禽遗传资源保护目录》的珍贵地方畜禽品种之一。为加强湖羊品种资源保护工作，针对浙江省湖羊部分个体纯度不够等问题，在2018年年初，浙江省畜牧兽医局向农业农村部畜牧业司申请使用湖羊冷冻精液和冷冻胚胎。之后，全国畜牧总站两次派专家考察试验点条件，2月初，经农业农村部批准，国家家畜基因库与浙江省畜牧技术推广站合作，开展湖羊冷冻胚胎保存效果验证试验。

试验使用了制作于1988年5只公羊的27剂颗粒冻精、1998年3只公羊的75剂细管冻精以及1998年4对公母羊组合的22枚胚胎。到2018年，这些冷冻精液和冷冻胚胎已经保存长达30年、20年，是我国最早一批保存在国家家畜基因库的冷冻精液和冷冻胚胎之一。同时，这也是首次用国家家畜基因库保存的冷冻精液和冷冻胚胎进行活体验证试验，首次验证了1988年、1998年制作的冷冻精液和1998年制作的冷冻胚胎保存质量。

为确保试验效果，国家家畜基因库和浙江省畜牧技术推广总站前期进行了充分沟通，做了大量细致的准备工作，精心设计试验方案，明确项目进度和各单位职责分工。项目启动后，国家家畜基因库立即对试验用冷冻精液按照不同个体、不同批次进行活力、剂量、前进运动精子数和畸形率4项指标进行了质量检测；3月15日，冷冻精液和冷冻胚胎一同运抵杭州，浙江省畜牧技术推广总站保存；4月11日开始，国家家畜基因库邀请国内顶尖专家，采用内窥镜子宫角输精手术操作方式，在两个试验种羊场进行了胚胎移植和冻精配种；8月29日至9月14日，冻精配种和胚胎移植羔羊陆续出生。

浙江省畜牧技术推广总站副站长任丽介绍，试验人工授精母羊共79只，其中丽华牧业配种46只，永盛牧业配种33只，配种成功48只母羊，共产羔羊94只，冻精配种受胎率达到61%；胚胎移植母羊共9只，移植胚胎22枚，怀孕6只，分娩9只，胚胎复苏率41%。下一步，项目组还将制作冻精3000份、冷冻胚胎200枚，返还国家家畜基因库；同时对试验羔羊生长发育、繁殖性能、生产性能、市场需求等做好综合评估。

利用现代保种技术，让基因活起来

目前为止，国内外还没有对保存时间长达20年的羊冷冻胚胎和30年的冷冻精液进行复苏效果验证的相关文献报道，试验也没有现成的经验模式可以参考。因此，有必要对试验结果进行认真评估，指出成绩，寻找不足，提出有针对性的改进措施，为下一步保种工作提供指导和遵循。在听取了项目组汇报后，专家组认真审阅了试验相关档案资料和保存的试验材料，实地察看了胚胎移植和冷冻精液人工授精生产的湖羊羔羊。

经过一整天紧张的评估与讨论，专家组对试验成果给予了充分肯定。经过超低温长期冷冻的精液和胚胎，受胎率和产羔率都高于预期，甲级羔皮羊比例达到34%。与对照组相比，冷冻精液和冷冻胚胎活羔的毛色更加洁白、波浪形花纹更加突出，再现了20、30年前湖羊的典型特征，就像20、30年前的湖羊“复苏”在眼前，这也表明冷冻精液和冷冻胚胎保存对种群恢复保留原有遗传资源特征，丰富原产地群体的血统，开展异地保种具有十分重要的作用。专家们一致同意项目通过验收。对下一步工作，专家们建议，要加强对试验羊的饲养管理和跟踪观察，采用分子生物学手段研究评估湖羊保种效果，设立家畜冷冻精液和冷冻胚胎保种效果评价专项，让基因活起来，进一步做好遗传资源保护利用工作。

专家们表示，此次试验成功代表着我国畜禽保种技术的重大突破。采用冷冻精液和冷冻胚胎技术保存相关家畜遗传资源，对进一步探索我国特有畜禽品种，特别是珍贵、稀有、濒危畜禽品种的保种具有深远意义。

农业农村部种业管理司畜禽种业处周晓鹏指出，此次评估只是对试验的阶段性评价，今后还有很多工作需要持续开展下去。畜禽遗传资源保护是一项投入大、持续时间长的基础性工作，需要长期坚持，不间断地进行检测评估，怎样保护好、用好这些遗传物质是一大关键。

随着现代畜牧业发展，散户逐渐退出，生产效率不能满足现在市场需要的品种逐渐被大量选育淘汰，畜禽遗传资源保护利用的压力也越来越大。全国畜牧总站畜禽资源处处长刘长春表示，这次试验另辟蹊径，一方面验证了利用超低温冷冻技术可以长期保存种质资源；另一方面也验证了国家家畜基因库连续30年的保种工作没有出现纰漏。同时，证明了当初设立国家家畜基因库的设想是正确的，超低温冷冻技术在保种工作中可以发挥独特的重要作用。

据了解，全国畜牧总站畜禽遗传资源保存利用中心在2008年被农业农村部授予首批国家级家畜基因库。主要从事全国畜禽遗传资源冷冻精液、冷冻胚胎和体细胞等遗传物质的制作、收集和保存工作。国家家畜基因库是目前亚洲最大的以现代生物技术为主要手段，进行异地基因保种的基因库，也是我国保存畜禽品种遗传物质数量最多、范围最广的基因库。截至2018年6月，已保存牛、羊、猪、马（驴）、犬等遗传物质，涉及品种共计104个。其中牛、羊、猪、驴的冷冻精液55万余剂；冷冻胚胎1.5万余枚；牦牛、绵山羊品种的成纤维细胞系5000余头份；收集了60个猪品种、88个牛品种、74个绵羊、山羊品种和55个马（驴）品种、共计2万余份DNA和血样等。（更多资讯，请关注微信公众号：中国畜牧业）