市售雷公藤多苷片中雷公藤内酯甲含量比较

黄海燕，钟建理 ，饶伟文

（广西壮族自治区桂林市食品药品检验所，广西 桂林 541001）

雷公藤多苷片可祛风解毒、除湿消肿、舒筋通络，具有抗炎及抑制细胞免疫和体液免疫等作用，多用于风湿热瘀、毒邪阻滞所致的类风湿性关节炎、肾病综合征、白塞氏三联征、麻风反应、自身免疫性肝炎等。原收载于《卫生部药品标准·中药成方制剂（第十七册）》[1]，名为雷公藤多甙片，现行标准为国家食品药品监督管理局国家药品标准 WS－B－3350－98－2011[2]，其含量测定均以雷公藤内酯甲为指标，每片含雷公藤内酯甲不得少于10 μg。雷公藤治疗安全范围较窄，有效治疗量与最小中毒量较接近。服用雷公藤后产生严重脏器损害致死亡的，90%以上的患者是因超大剂量服用[3]。因此，控制其临床用药量是控制雷公藤中毒的关键。但由于雷公藤多苷原料的质量不一，或生产企业为避免不符合标准要求，或为了追求疗效，加大用料量，给患者带来重大安全隐患。为了考察市售雷公藤多苷片的质量稳定性，指导医生合理、安全、有效用药，本研究中对不同厂家雷公藤多苷片中雷公藤内酯甲的含量进行了比较。现报道如下。

1 仪器与试药

仪器：Waters 2695高效液相色谱分离单元－Waters 2489检测器（美国Waters公司）；XS205DU型电子分析天平（梅特勒－托利多仪器＜上海＞有限公司）；KQ－600E型超声仪（江苏省昆山市超声仪器有限公司）。

试药：雷公藤内酯甲对照品（批号为 111597－200505，中国食品药品检定研究院）；甲醇、乙腈、甲酸为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为超纯水。雷公藤多苷片共10批，均为市售品。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：ThermoBDSHypersilC18柱（250mm ×4.6mm，5 μm）；流动相：甲醇 －乙腈 －水（64 ∶16 ∶20）；检测波长：210 nm；柱温：25 ℃；流速：1.0 mL ／min。

2.2 溶液制备

取雷公藤内酯甲对照品约10mg，精密称定，置100mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，制成每1 mL含0.1 mg的对照品溶液。取本品研细，取相当于20片，精密称定，置具塞锥形瓶中，加乙酸乙酯30 mL，超声处理30 min，放冷，滤过，容器及滤器用乙酸乙酯适量分次洗涤，合并滤液及洗液，蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至5 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。

2.3 测定方法

精密吸取对照品溶液、供试品溶液各10 μL，注入液相色谱仪，以外标法计算雷公藤内酯甲的含量。色谱图见图1。

图1 高效液相色谱图

2.4 方法学考察

线性关系考察：取质量浓度为61.14 μg／mL的对照品溶液，分别进样 1，2，5，10，20，30，50 μL，测定。以峰面积（Y）为纵坐标、进样量（μg，X）为横坐标进行线性回归，得回归方程 Y＝905.19X－11 009，r＝0.999 9（n＝7）。结果表明，雷公藤内酯甲进样量在61.14～3 057.00 μg范围内线性关系良好。

稳定性试验：取同一供试品溶液，分别于 0，2，4，8，12 h时测定。结果峰面积的 RSD为 0.81%（n＝5），表明供试品溶液在12 h内稳定性良好。

精密度试验：取同一对照品溶液，连续进样5次。结果峰面积的 RSD为0.86%（n＝5），表明仪器精密度良好。

重复性试验：称取同一批样品（1号样品）6份，依法测定含量。结果平均含量为 0.167 2 mg／g，RSD为0.94%（n＝6），表明方法重复性良好。

加样回收试验：分别取质量浓度为0.061 14 g／L的对照品溶液1，2，3 mL各3份，置三角烧瓶中，挥干溶剂，加入研细的已知含量的样品（0.167 2 mg／g）10片，按供试品溶液制备方法制备溶液，测定含量，计算回收率。结果见表1。

2.5 样品含量测定

取样品10批雷公藤多苷片（9个厂家），依法制备供试品溶液并测定，按外标法计算含量。结果见表2。

表1 雷公藤内酯甲加样回收试验结果（n＝9）

表2 各批样品含量测定结果

3 讨论

雷公藤药材有大毒，雷公藤多苷片作为其制剂，疗效好但毒副作用也大。雷公藤多苷片临床不良反应报道较多[4－14]，主要表现为药物性肝炎、肾功能不全、粒细胞减少、白细胞减少、血小板减少、闭经、精子数量减少、心律失常等[15]，甚至有造成死亡的后果。印成霞[16]对1984年至2013年中国涉及雷公藤多苷片致药品不良反应的28篇文献中报道的55例病例报告进行统计与分析，有3例死亡病例，其中急性肾功能衰竭、急性再障性贫血并发渗出性胸膜炎各1例，患者出现大口咳血导致死亡1例。

不同生产厂家的雷公藤多苷片中雷公藤内酯甲含量差异大，其中有2个厂家不合格（标准规定每片不得少于10 μg），同时测定样品中雷公藤甲素的含量，结果最高为每片7 μg，最低则为0（未检出），最大相差7倍。说明不同生产厂家的雷公藤多苷片质量不稳定。建议制剂标准同时规定合理的含量上下限，以规范企业生产，保证制剂质量稳定，保障用药安全有效。