探讨蒸汽安瓿检漏灭菌器灭菌性能验证方法

摘 要：确保XG1.DN-3.0蒸汽安瓿检漏灭菌器按设定的灭菌参数对小容量注射液进行灭菌，能有效地达到灭菌效果，保证小容量注射液的无菌。用经过校准合格的温度探头分别对蒸汽安瓿检漏灭菌器进行连续三次空载热分布、满载热分布、热穿透及生物指示剂挑战测试，验证过程灭菌温度设定为115℃，灭菌时间为30min。热分布验证过程，蒸汽安瓿检漏灭菌器腔体内所有探头温度均维持在115℃～117℃，蒸汽安瓿检漏灭菌器空载热分布、满载热分布/热穿透及生物指示剂挑战测试结果表明，灭菌过程，在设备空载、满载情况下，蒸汽安瓿检漏灭菌器温度分布均匀，热穿透各探头温度F0值均>8，灭菌后所有生物指示剂挑战检验结果均为阴性，阳性对照检验结果为阳性。因此，按照预期的灭菌参数进行灭菌，灭菌过程蒸汽安瓿检漏灭菌器空载热分布、满载热穿透及灭菌效果有效。该设备符合灭菌设备设计及GMP要求。

关键词：蒸汽安瓿检漏灭菌器 热分布 热穿透 生物指示剂挑战

中图分类号：R11 文献标识码：A 文章编号：1672-3791（2018）05（c）-0099-02

蒸汽安瓿检漏灭菌器性能验证的目标是，按预期的灭菌工藝参数对小容量注射液进行灭菌，保证小容量注射液的无菌性。蒸汽安瓿检漏灭菌器灭菌性前应确保设备的真空保压及B-D测试结果合格。笔者就XG1.DN-3.0蒸汽安瓿检漏灭菌器的灭菌性能验证介绍如下，以便互相学习和借鉴。

1 器材与试剂

1.1 XG1.DN-3.0蒸汽安瓿检漏灭菌器

该设备系采用饱和蒸汽，利用蒸汽的穿透性以及冷凝时释放出大量的潜热，使被灭菌物品处于高温和潮湿的状态下，从而使细菌蛋白质凝固而被杀死。

1.2 温度验证仪

温度计量干井炉为FLUKE-914X系列；湿热探头（传感器）为德国UST原产高精度薄膜铂电阻芯片，芯片等级为1/3B级。

1.3 安瓿瓶

山东力诺特种玻璃股份有限公司生产、规格2mL、批号201611012。

1.4 生物指示剂

美国3M公司生产、批号S-495、含菌量（>1.0x106 cfu/支）。

2 方法与结果

2.1 热电偶校准

热分布前后用三点校准法（低点温度、验点温度、高点温度）分别对验证用的15组热电偶进行校准，校准时间设定为3min，校准精度为0.5℃。校准过程如下。

（1）将验证仪的15组热电偶置于温度干井之中，打开温度干井的电源，待其稳定后，将验证仪打开使之处于测试状态，进行90℃校验，记录数据并保持3min。

（2）将验证仪的15组热电偶置于温度干井之中，打开温度干井的电源，待稳定在130℃后，将验证仪打开，使之处于测试状态，进行130℃校验，记录数据并保持3min。

（3）进行115℃校验，校验过程同⑵。

合格标准：热电偶在确认试验前后于90℃、115℃、130℃三个点校验，恒温保持3min，各热电偶温差≤±0.5℃。

（4）数据分析。在校准的3个温度点，验证用测试热电偶与标准探头的温差最大值没有超过0.5℃，因此，验证用测试探头的精度和范围符合规定要求。

2.2 空载热分布试验

（1）将经校准合格的15组温度探头通过验证接口放入灭菌腔室。其中1支探头置于蒸汽进口处，1支探头置于灭菌器温度控制探头旁（冷凝水出口处），其余均匀分布在灭菌室各处。按《02车间灭菌检漏岗位SOP》进行操作，运行过程中每隔0.5min记录各点温度，按设定灭菌温度为115℃、灭菌压力为75kPa、灭菌时间为30min，连续运行3次，以检查其灭菌效果及重现性。

（2）按上述空载（热分布）测试⑴，反复进行3次验证测试过程。

（3）检测后用检测仪读取、打印数据。

合格标准：达到115℃后，各测点最大值与平均值、平均值与最小值温度之差不应越过1℃。

（4）数据分析。

①空载热分布。

探头布点位置：其中1支探头置于蒸汽进口处，1支探头置于灭菌器温度控制探头旁（冷凝水出口处），其余均匀分布在灭菌室各处。

开启灭菌程序，灭菌程序设定为115℃灭菌30min，连续运行3次，检查其重现性，根据灭菌过程15组探头温度，检验其灭菌性能。

第一，空载1灭菌期间。

最大值：116.18℃；最小值：115.03℃；平均值： 115.51℃；

最大值-平均值：0.67℃；平均值-最小值：0.48℃。

第二，空载2灭菌期间。

最大值：116.14℃；最小值：115.08℃；平均值： 115.48℃；

最大值-平均值：0.66℃；平均值-最小值：0.40℃。

第三，空载3灭菌期间。

最大值：116.07℃；最小值 115.04℃；平均值： 115.43℃；

最大值-平均值：0.64℃；平均值-最小值：0.39℃。

结论：空载灭菌期间，灭菌设备腔室各点温度分布均匀，前门下部温度稍低，经分析为灭菌柜的冷点，该设备满足生产工艺及符合GMP要求。

②满载热分布/热穿透试验。

灭菌器内装载的物品：小容量注射液（2mL）。装载量：满载约13.5万支。

探头布点位置：其中1支探头置于热水进口处，1支探头置于灭菌器温度控制探头旁（冷凝水出口处），其余均匀插入在灭菌室各处的药液中（将装有内容物的安瓿瓶颈部切开，插入探头，然后用生胶布将切口包裹严密）。

开启灭菌程序，灭菌程序设定为115℃灭菌30min，满载连续运行3次，检查其重现性，根据灭菌过程15组探头温度，检验其灭菌性能。

第一，满载热分布1：最大值：115.70℃；最小值： 115.04℃；平均值：115.45℃；

最大值-平均值：0.25℃；平均值-最小值：0.41℃。

第二，满载热分布2：最大值：115.98℃；最小值： 115.06℃；平均值：115.46℃；

最大值-平均值：0.52℃；平均值-最小值：0.40℃。

第三，满载热分布3最大值：115.73℃；最小值：115.00℃；平均值：115.50℃；

最大值-平均值：0.23℃；平均值-最小值：0.50℃。

結论：满载灭菌期间，灭菌设备腔室各测点温度分布均匀，该设备满足生产工艺及符合GMP要求。满载热穿透测试结果见表1。

由表1可知以上三次满载各探头温度符合设计及GMP要求，各探头F0值均>8，满足灭菌要求。

③生物指示剂挑战。

同步满载热穿透试验，将15支含菌量为3.3×106的3M嗜热脂肪杆菌指示剂均匀分布在设备腔室内，连续运行3次，并对灭菌后的各BI指示剂取样检验，同时做阳性对照，结果表明，未灭指示剂培养结果呈阳性，被灭指示剂培养结果均呈阴性，指示剂灭菌后均已失活；灭菌结果生物指示剂挑战合格。

3 结语

连续三次空载及满载运行结果表明，灭菌过程，蒸汽安瓿检漏灭菌器腔体内所有探头温度均维持在115℃～117℃，平均值与最小值温度之差小于1℃，蒸汽安瓿检漏灭菌器空载热分布及满载热分布均匀；三次满载热穿透及生物指示剂挑战结果表明，灭菌过程，在设备满载情况下，各探头温度F0值均>8，灭菌后所有生物指示剂检验结果均为阴性，阳性对照检验结果为阳性。因此，按照预期批准的灭菌参数进行灭菌，蒸汽安瓿检漏灭菌器热分布均匀、灭菌效果有效。该设备符合灭菌设备设计及GMP要求。

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