SYSMEXXN-9000全自动血液分析仪检测外周血有核红细胞的可靠性评价

黄丹 张彬 苏建蓉（绵阳市中心医院检验科 四川 绵阳 621000）

有核红细胞（nucleated red blood cell，NRBC）一般仅存在于骨髓中，成年人外周血中无NRBC，在出生1周内的新生儿外周血中可见到少量的NRBC。外周血中出现有核红细胞多为病理因素导致，如病理状态下的溶血性贫血、急性大量失血、恶性肿瘤、骨髓纤维化症等导致骨髓及髓外红系细胞代偿性极度活跃增生，超出细胞自身衰亡程度而释放入外周血中，常可见晚幼红细胞及中幼红细胞或更幼稚的红细胞[1-2]。因此，外周血NRBC检测的准确性与及时性对各类疾病的诊断与鉴别诊断具有重要的临床意义。目前，计数NRBC的“金标准”[3]是对瑞氏染色血涂片在油镜下进行分类，计数100个白细胞时所见到的NRBC数量，即NRBC在外周血中的百分率（NRBC%）。SYSMEX XN-9000全自动血液分析仪添加特殊Sysmex溶解试剂Lysercell WNR进行红细胞溶解，NRBC将只剩下细胞核，然后加入Fluorocell WNR对白细胞（white blood cell, WBC）的核酸和细胞器及NRBC的细胞核进行荧光染色，通过鞘流式检测系统测定前向散射光和侧向荧光强度，依据细胞大小及荧光强度的差异可将NRBC与WBC区分开并计算有核红细胞数（NRBC#）与有核红细胞百分数（NRBC%）。本研究通过对仪器法检测NRBC结果与人工显微镜镜检法计数结果进行比较，从而对SYSMEX XN-9000全自动血液分析仪WNR通道检测外周血NRBC的可靠性进行评价。

1.资料与方法

1.1 标本来源

选取本院2018年1月到2018年6月SYSMEX XN-9000全自动血液分析仪检测出NRBC＞0/100个WBC的标本共324例，其中男性165例，年龄0～90岁，女性159例，年龄0～77岁。随机选取同时段仪器检测出NRBC为0/100个WBC的标本共100例，其中男性54例，年龄0～81岁，女性46例，年龄0～83岁。

1.2 仪器与试剂

1.2.1 仪器：日本SYSMEX公司XN-9000全自动血液分析仪，日本SYSMEX公司SP-10全自动血涂片制备仪，日本OLYMPUS公司CX23普通光学显微镜。

1.2.2 试剂：日本SYSMEX公司XN-9000配套试剂，日本SYSMEX公司SP-10配套染液及玻片，日本OLYMPUS公司CX23配套镜油，美国BD公司K2-EDTA真空采血管。

1.3 实验方法

1.3.1 仪器法：严格按照标准操作规程上机检测，记录XN-9000全自动血液分析仪在WNR通道中所得NRBC百分率（NRBC%仪器）（/100个WBC）。

1.3.2 镜检法：严格按照标准操作规程上机推片，SP-10全自动血涂片制备仪自动进行涂片制作与染色。有核红细胞计数由2名经验丰富的技师按全国临床检验操作规程[4]进行显微镜镜检，分类计数200个WBC中NRBC数量，计算每100个WBC所见NRBC数，结果取平均值，即NRBC百分率（NRBC%镜检）（/100个WBC）。

1.4 统计学处理

应用SPSS19.0和MedCalc软件进行统计学分析。采用Pearson相关分析评估仪器法和镜检法的相关性，采用Bland-Altman分析评估仪器法和镜检法的一致性。P＜0.05为差异具有统计学意义。

2.结果分析

2.1 仪器法与镜检法检测NRBC的相关性分析

图1 仪器法与镜检法的相关性分析

采用SPSS19.0软件进行线性回归分析（见图1），得回归方程：y=0.97x-0.8402，R2=0.9994＞0.995，且Pearson相关分析得，P＜0.001,说明仪器法与镜检法计数NRBC百分率的相关性良好。

2.2 仪器法与镜检法检测NRBC的一致性分析

图2 仪器法与镜检法的Bland-Altman散点图

采用MedCalc软件进行Bland-Altman分析（见图2），得回归方程：y=0.03014x+0.8642，仪器法与镜检法计数NRBC的结果差异的95%一致性界限为（1.98±9.76）个NRBC/100个WBC，仅有7例（2.16%）在一致性界限范围外，说明仪器法与镜检法具有良好的一致性。

2.3 仪器法与镜检法检测NRBC的结果比较

表1 仪器法与镜检法检测NRBC的结果比较

由表1可知，对324例仪器法检测NRBC阳性的标本进行人工镜检，其中320例为阳性，4例为阴性；对100例仪器法检测NRBC阴性的标本进行人工镜检，其中99例为阴性，1例为阳性。以镜检法为金标准，XN-9000全自动血液分析仪检测NRBC的灵敏度为99.7%，特异性为96.1%，假阳性率为3.9%，假阴性率为0.3%。

3.讨论

外周血NRBC可出现于多种疾病中，其不仅与诸多疾病的诊断与预后有关[5]，还可影响WBC计数的准确性，从而干扰临床诊断与治疗[6-7]。本研究中324例NRBC阳性标本的仪器法与镜检法计数NRBC结果呈明显正相关（R2=0.9994），与文献报道[8]一致。且仪器法与镜检法两组结果比较，P＜0.001，表明两种方法计数NRBC结果差异无统计学意义。采用Bland-Altman分析，可知仪器法与镜检法计数NRBC具有良好的一致性，因此，XN-9000全自动血液分析仪WNR通道检测NRBC结果基本可替代镜检法检测外周血NRBC。

本研究显示，XN-9000全自动血液分析仪WNR通道检出NRBC的灵敏度为99.7%，特异性为96.1%，假阳性率为3.9%，假阴性率为0.3%，其较高的灵敏度降低了NRBC的漏检率，较高的特异性降低了NRBC的误诊率，从而保证检测结果的准确性。

综上，XN-9000全自动血液分析仪WNR通道检测NRBC较传统镜检法优越，在保证结果准确性的同时，大大缩短了检测时间，提高了工作效率，且仪器法的阴性符合率高达99%，在仪器正常工作前提下，若未出现相应的警示信息，基本可排除NRBC的存在。