高剂量乙氧基喹啉对生长育肥猪生长性能、 血清生化指标、抗氧化性能、脏器指数和 肉品质的影响

盖向荣 何东亭 杨文军 韩苗苗 来文晴 张丽英

(中国农业大学动物营养学国家重点实验室，北京100193)

乙氧基喹啉是目前生产中普遍使用的抗氧化剂，它可以清除饲料储存过程中所产生的自由基，因而广泛用于防止饲料中维生素和脂质的氧化[1]。早期有研究表明，在猪和肉鸡饲粮中添加125 mg/kg乙氧基喹啉可以提高机体抗氧化能力[2-3]。然而，也有研究表明，在狗和大鼠饲粮中添加乙氧基喹啉，能引起与健康相关的问题，并且乙氧基喹啉对肝脏和胃肠道的副作用较大；尽管不同动物对乙氧基喹啉的反应存在差异，但当乙氧基喹啉的添加量超过允许的添加量时，多数动物会出现日增重下降、肝脏及肾脏损伤和消化道的病变等症状[4]。虽然乙氧基喹啉已经在很多国家和地区被批准作为饲料添加剂使用，美国和欧盟推荐在全价料中推荐添加剂量为150 mg/kg[4]，我国也参照欧盟等国家标准，规定其在养殖动物(犬以外)的配合饲料中最高限量为150 mg/kg[5]。但实际上，饲粮中乙氧基喹啉的适宜添加量受动物品种、年龄和饲粮组成等影响。目前，有关饲粮中添加高剂量乙氧基喹啉对生长育肥猪耐受性和肉品质的影响尚未见报道。为了进一步验证150 mg/kg限量值[5]对生长肥育猪的适用性以及高剂量添加的影响效果，本试验依据农业部颁布的《饲料与饲料添加剂畜禽靶动物耐受性评价试验指南》[6]，以生长育肥猪为靶动物，研究饲粮中添加有效剂量及高倍剂量乙氧基喹啉对猪生长性能、血清生化指标、抗氧化指标、脏器指数和肉品质的影响，为乙氧基喹啉在生长肥育猪生产中的安全有效使用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

乙氧基喹啉购自江苏中丹集团股份有限公司，其中乙氧基喹啉含量≥95%。

1.2 试验动物及设计

选用180头体重为(31.98±2.34) kg三元杂交(杜×长×大)生长猪，按体重和性别区组，随机分为5个组，每组6个重复，每个重复6头猪(公母各占1/2)。试验采用玉米-豆粕型基础饲粮，5组饲粮中分别添加0、150(推荐剂量)、300(2倍剂量)、750(5倍剂量)和1 500 mg/kg(10倍剂量)乙氧基喹啉，试验期为98 d。

1.3 试验饲粮

基础饲粮参考NRC(2012)猪饲养标准配制，其组成及营养水平见表1。配制饲粮时，用大豆油对乙氧基喹啉进行逐级稀释放大，混匀后与其他原料混合。

表1 基础饲粮组成及营养水平(饲喂基础)

1)预混料为每千克饲粮提供 The premix provided the following per kg of diets：VA 6 000 IU，VD31 500 IU，VE 15 IU，VK31.5 mg，VB10.9 mg，VB23 mg，VB61.5mg，VB1210 μg，烟酸 nicotinic acid 17 mg，泛酸 pantothenic acid 9 mg，叶酸 folic acid 0.32 mg，生物素 biotin 0.02 mg，氯化胆碱 choline chloride 350 mg，Fe (FeSO4) 90 mg，Cu (CuSO4) 8 mg，Mn (MnSO4) 20 mg，Zn (ZnSO4) 50 mg，I (KI) 0.25 mg，Se (Na2SeO3) 0.30 mg。

2)代谢能为计算值，其余为实测值。ME was a calculated value, while the others were measured values.

1.4 饲养管理

试验于2017年1月至2017年4月在中国农业大学丰宁动物试验基地(河北丰宁)进行。试验前对猪舍进行彻底消毒，清洗料槽、水槽，并对试验猪进行常规免疫与驱虫。猪舍温度控制在21 ℃左右，自由采食与饮水。按常规程序进行消毒。严格遵循猪场饲养和管理制度。

1.5 测定指标及方法

1.5.1 营养成分测定

饲粮中干物质、粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维、粗灰分、钙和总磷含量分别按照GB/T 6435—2014、GB/T 6432—2014、GB/T 6433—2006、GB/T 6434—2006、GB/T 6438—2007、GB/T 6436—2002和GB/T 6437—2002进行测定。饲粮中赖氨酸含量按照GB/T 18246—2000进行测定。

1.5.2 生长性能测定

试验开始时，称量每头猪初始体重，于试验第70天和第98天早晨空腹称重并结算耗料量，计算平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。

1.5.3 血清生化及抗氧化指标

试验第70天和第98天时，每个重复选取1头体重接近该圈平均值的猪进行前腔静脉采血，采集非抗凝血10 mL，室温下倾斜放置30 min，3 000 r/min离心15 min制备血清，于-20 ℃保存备用。测定血清临床生化指标，包括葡萄糖(GLU)、尿素氮(UN)、肌酐(CREA)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、总胆红素(TBIL)含量及碱性磷酸酶(ALP)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和谷氨酸氨基转移酶(ALT)活性。检测方法为比色法，按照试剂盒(中生北控股份有限公司，中国)说明进行测定，使用仪器为迈瑞BS-420全自动生化仪。测定血清抗氧化指标，包括总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量，检测方法为比色法，按照试剂盒(北京华英生物研究所，中国)说明进行测定，使用仪器为A6半自动生化仪。

1.5.4 脏器指数测定

试验第98天时，每个重复选取1头体重接近该圈平均值的猪，空腹24 h后称其宰前活重，进行屠宰取样，取出心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏，用吸水纸吸干表面组织液后称重。脏器指数按以下公式计算：

脏器指数(g/kg)=内脏重量(g)/宰前活重(kg)。

1.5.5 肉品质测定

肉品质取样和测定参照NY/T 1333—2007《畜禽肉质的测定》[7]进行，测定项目包括滴水损失、蒸煮损失、剪切力、pH45 min、pH24 h和肉色。pH采用便携式酸度计(OPTP-STAR，德国麦特斯公司)测定；肉色用美能达色差计(CR-410，日本美能达公司)测量屠宰后45 min背最长肌的亮度(L*)、红度(a*)和黄度(b*)；剪切力用肌肉嫩度仪(CLM3B，北京天翔飞域仪器设备有限公司)进行测定。

1.6 数据处理与统计分析

试验数据采用SAS 9.2统计软件进行单因素方差分析(one-way ANOVA)，采用Duncan氏法进行多重比较。采用线性模型和二次曲线模型对乙氧基喹啉添加量的影响进行评定。P<0.05为差异显著。

2 结果与分析

2.1 饲粮添加乙氧基喹啉对生长育肥猪生长性能的影响

饲粮添加乙氧基喹啉对生长育肥猪生长性能的影响见表2。由表可见，试验各组间ADG、ADFI及F/G均无显著差异(P>0.05)。

2.2 饲粮添加乙氧基喹啉对生长育肥猪血清生化指标的影响

饲粮添加乙氧基喹啉对生长育肥猪血清生化指标的影响见表3。由表可见，试验第70天时，血清ALP活性和TBIL含量随着饲粮中乙氧基喹啉添加量的增加而降低(线性P<0.05)。试验第98天时，血清TBIL含量随着饲粮中乙氧基喹啉添加量的增加而增加(线性P<0.05)；同时，血清ALP活性随着饲粮中乙氧基喹啉添加量的增加而降低(二次P<0.05)。

2.3 饲粮添加乙氧基喹啉对生长育肥猪血清抗氧化指标的影响

饲粮添加乙氧基喹啉对生长育肥猪血清抗氧化指标的影响见表4。由表可见，试验第70天时，试验各组的血清T-AOC以及SOD、GSH-Px和CAT活性随着饲粮中乙氧基喹啉添加量的增加而降低(线性P<0.05)；与对照组相比，饲粮添加300～1 500 mg/kg乙氧基喹啉显著降低了血清T-AOC以及SOD、GSH-Px和CAT活性(P<0.05)。试验第98天时，试验各组的血清T-AOC以及GSH-Px和CAT活性随着饲粮中乙氧基喹啉添加量的增加而降低(线性P<0.05)，试验各组的血清MDA含量随着饲粮中乙氧基喹啉添加量的增加而升高(二次P<0.05)；与对照组相比，饲粮添加750 mg/kg乙氧基喹啉显著降低了血清T-AOC以及GSH-Px和CAT活性(P<0.05)，饲粮添加750和1 500 mg/kg乙氧基喹啉显著提升了血清MDA含量(P<0.05)。

表2 饲粮添加乙氧基喹啉对生长育肥猪生长性能的影响

同行数据肩标不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，肩标相同小写字母或无字母表示差异不显著(P>0.05)。下表同。

In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), while with the same small letter or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

表3 饲粮添加乙氧基喹啉对生长育肥猪血清生化指标的影响

表4 饲粮添加乙氧基喹啉对生长育肥猪血清抗氧化指标的影响

2.4 饲粮添加乙氧基喹啉对生长育肥猪脏器指数的影响

饲粮添加乙氧基喹啉对生长育肥猪脏器指数的影响见表5。由表可见，与对照组相比，生长育肥猪饲粮中添加150～1 500 mg/kg乙氧基喹啉对生长育肥猪脏器指数无显著影响(P>0.05)。

表5 饲粮添加乙氧基喹啉对生长育肥猪脏器指数的影响

2.5 饲粮添加乙氧基喹啉对生长育肥猪肉品质的影响

饲粮添加乙氧基喹啉对生长育肥猪肉品质的影响见表6。由表可见，试验各组间滴水损失、蒸煮损失、剪切力、pH和肉色无显著差异(P>0.05)。

3 讨 论

3.1 饲粮添加乙氧基喹啉对生长育肥猪生长性能的影响

有关饲粮添加乙氧基喹啉对猪生长性能影响的报道较少。早先有研究表明在饲粮中添加150和1 500 mg/kg乙氧基喹啉显著降低了断奶仔猪的生长性能(ADG和ADFI)[4]。另外，Lu等[8]研究发现，在饲粮中添加135 mg/kg乙氧基喹啉和没食子酸丙酯混合物对断奶仔猪生长性能无显著影响，但显著降低了生长育肥猪的ADFI和饲料转化率。本研究结果表明，在生长育肥猪饲粮中添加150～1 500 mg/kg乙氧基喹啉对生长育肥猪生长性能没有显著影响。

3.2 饲粮添加乙氧基喹啉对生长育肥猪血清生化指标的影响

有研究表明，血液中ALP活性的异常可能表明机体出现与肝脏、胆囊或骨骼有关的问题，肝脏压力变大可能引起血液ALP活性的升高[4]。胆红素是由脊椎动物的血红素经正常代谢途径分解产生，TBIL含量升高表明动物体可能存在某些疾病[9]。目前报道的关于乙氧基喹啉对胆红素的影响的结果并不一致。有研究报道在断奶仔猪饲粮中添加150～1 500 mg/kg乙氧基喹啉对血清TBIL含量没有显著影响[4]，也有研究表明在大鼠饲粮中添加200、400、500和1 000 mg/kg乙氧基喹啉能提高血清中TBIL含量[4]。根据默克兽医手册[10]，猪血清中ALP正常活性为118～395 U/L，TBIL正常含量为0～17.1 μmol/L。本试验中，试验第70天的血清TBIL含量和第98天的血清ALP活性虽然受到饲粮中乙氧基喹啉的影响，但是其水平均处于正常参考范围内。然而，饲粮中添加750和1 500 mg/kg乙氧基喹啉时，试验第70天的血清ALP活性(低于正常水平)和第98天的血清TBIL含量(高于正常水平)均不在正常参考范围内。有研究报道，TBIL含量的升高程度与肝细胞的损伤程度成正比[11]。由此推断，饲粮中添加750～1 500 mg/kg乙氧基喹啉可能会导致生长育肥猪肝细胞损伤。

3.3 饲粮添加乙氧基喹啉对生长育肥猪血清抗氧化指标的影响

机体的抗氧化状态在维持动物健康、生长性能和繁殖性能方面都有着重要作用[12]。动物机体的抗氧化状态必须保持一定的平衡，过高或过低都会影响机体健康[13]。T-AOC是体内各种氧化和抗氧化物质共同作用的结果，是反映机体总体抗氧化能力强弱的综合指标。SOD是机体内广泛存在的一种内源抗氧化酶，具有清除自由基的作用。MDA为脂质过氧化代谢的产物，是反映脂质过氧化程度的重要指标[14]。据报道，乙氧基喹啉可能对虹鳟鱼[15]和家禽[16]具有抗氧化作用。Lu等[8]研究发现在生长育肥猪饲粮中补充135 mg/kg乙氧基喹啉和没食子酸丙酯混合物可提高其血浆和肝脏的抗氧化能力。本研究发现，随着饲粮中乙氧基喹啉添加量的增加，血清中抗氧化能力呈降低趋势，且饲粮添加300～1 500 mg/kg乙氧基喹啉时与对照组产生显著差异，这表明机体抵御氧化损伤的能力减弱了，可能对生长育肥猪有不利影响。另有研究表明，乙氧基喹啉与其他抗氧化剂一样，饲粮中添加剂量太高反而会起到促进氧化的作用[4]。Baszczyk等[17]研究显示，溶解状态下的乙氧基喹啉可能一部分以自由基形式存在，因此，乙氧基喹啉的氮氧自由基像其他氮氧自由基一样具有氧化属性。因此，推断使用过高剂量的乙氧基喹啉可导致较多自由氧的形成，从而导致抗氧化酶活降低和氧化产物MDA含量的升高，但具体机理还有待进一步研究。

3.4 饲粮添加乙氧基喹啉对生长育肥猪脏器指数的影响

动物的器官指数是一项生物学特征指标，在一定程度上反映机体的机能状况，对于理论实践和生产具有重要意义。Parke等[18]研究报道了在大鼠饲粮中添加乙氧基喹啉可以增加肝脏指数，Bailey等[19]研究表明在鸡饲粮中添加1 000 mg/kg乙氧基喹啉增加了其肝脏指数。而本研究表明，在生长育肥猪饲粮中添加150～1 500 mg/kg乙氧基喹啉对其脏器指数没有显著影响，这可能是由于试验动物的种类不同所致。此外，本实验室同时也评价了乙氧基喹啉对断奶仔猪脏器指数的影响，结果显示饲粮添加750和1 500 mg/kg乙氧基喹啉显著增加了断奶仔猪的肝脏指数，比对照组分别增加了11.16%和27.09%(未发表数据)。因此，脏器指数的结果也受试验猪日龄的影响。

3.5 饲粮添加乙氧基喹啉对生长育肥猪肉品质的影响

猪肉品质评定常用肉色、pH、滴水损失、蒸煮损失和剪切力等指标评定，这些指标是感官和食用适口性的综合反映，决定着顾客的消费取向。肉色主要由肌红蛋白和血红蛋白含量决定，肌红蛋白的含量受多种因素制约，使肉色呈现由灰白到暗红的差异[20]。Tavárez等[21]研究表明，在罗斯308肉鸡饲粮中添加135 mg/kg抗氧化剂(乙氧基喹啉和没食子酸丙酯混合物)对胸肌的肉色没有显著影响，但目前还没有研究报道乙氧基喹啉对生长育肥猪肉色的影响。在本试验中，生长育肥猪饲粮添加150～1 500 mg/kg乙氧基喹啉对肉品质无显著影响。

3.6 推荐用量

鉴于生长育肥猪饲粮中添加300～1 500 mg/kg乙氧基喹啉降低了血清抗氧化能力，750和1 500 mg/kg乙氧基喹啉可导致生长育肥猪肝细胞损伤，生长肥育猪饲粮中乙氧基喹啉的推荐量为150 mg/kg。

4 结 论

① 饲粮中添加150～1 500 mg/kg乙氧基喹啉对生长育肥猪生长性能和肉品质无显著影响。

② 饲粮中添加750和1 500 mg/kg乙氧基喹啉会导致生长育肥猪肝细胞损伤。

③ 饲粮中添加300～1 500 mg/kg乙氧基喹啉降低了生长育肥猪血清抗氧化能力。

④ 生长育肥猪饲粮中乙氧基喹啉的推荐量为150 mg/kg。