外源激素处理对奶牛同期发情的调节效果

刘立山 郎侠 王彩莲 周瑞 宋淑珍 宫旭胤 王斐 吴建平

摘要：联合使用PGF2α和GnRH对荷斯坦奶牛进行不同的同期发情定时输精程序处理，结果表明：4次PGF2α、2次GnRH法同期发情定时输精程序处理后，奶牛子宫黏液评分和直肠检测评分分别较试验前提高了0.55分（P < 0.05）和0.45分（P < 0.05），2次PGF2α、4次GnRH法同期发情定时输精程序处理后，奶牛子宫黏液评分和直肠检测评分分别较试验前分别提高了0.30分（P < 0.05）和0.45分（P < 0.05）。4次PGF2α、2次GnRH法同期发情定时输精程序处理和2次PGF2α、4次GnRH法同期发情定时输精程序处理后的奶牛同期发情率分别为80%、90%，第1个情期受胎率分别为65%、70%，比对照自然发情牛分别高25、30百分点。说明利用外源激素PGF2α和GnRH处理能促进奶牛卵巢和子宫复旧，达到同期发情的效果，并提高奶牛受胎率。

关键词：奶牛;激素;PGF2α;GnRH;同期发情;定时输精;受胎率

中图分类号：S663          文献标志码：A         文章编号：1001-1463（2018）12-0076-04

doi：10.3969/j.issn.1001-1463.2018.12.023

近年来，中国的畜牧业比重不断增加，乳品行业已发展迅速，总产奶量也不断提高。但在快速发展的过程中，奶牛养殖业也出现了很多问题，比如产后奶牛疾病过多，影响奶牛生殖机能的恢复，受胎率低、产犊间隔过长等，都影响和制约着我国奶牛养殖业现代化的发展[1 - 2 ]。奶牛产后的子宫机能恢复程度与早期卵巢机能的恢复及活动密切相关。在卵巢活动周期正常的前提下，子宫机能的恢复程度决定了受胎率[3 - 5 ]。對产后奶牛的保健治疗，加强机体免疫力，是加快子宫机能复旧的重要措施。目前，对奶牛产后疾病的治疗基本是采用化学和激素类药物，通过对产后奶牛早期的激素分泌进行调控，促进奶牛产后子宫复旧，达到同期发情的效果，提高奶牛繁殖率[6 - 8 ]。因此同期发情定时输精技术在养殖场的应用对家畜繁殖率的提高具有重要意义[9 ]。同期发情可以实现难孕母牛以及繁殖有障碍的母牛集中发情和配种，达到正常受孕和产犊。定时输精可以使牛的发情时间集中，防止隐性发情造成的漏配现象，有利于集中输精，降低了劳动强度，不需要观察发情就能定时进行人工授精[10 ]。因此，同期发情定时输精技术是提高养殖场母牛繁殖效率以及经济效益的重要保证。

我们使用不同的同期发情定时输精程序，对荷斯坦奶牛进行同期发情处理，以探讨联合使用PGF2α和GnRH的定时输精效果，完善同期发情定时输精技术，为奶牛的同期发情定时输精技术提供参考。

1   材料与方法

1.1   试验材料

指示奶牛为荷斯坦奶牛，由甘肃省临洮县华加牧业科技有限责任公司提供。

试剂①PGF2α，为PGF2α类似物氯前列醇钠注射液（Cloprostenol Sodium Injection，苏州市苏牧动物药业有限公司，规格为0.2 mg×10支）。②GnRH为人工合成促性腺素释放激素（Gonadotropin-releasing hormone，苏州市苏牧动物药业有限公司，规格为20 μg×10支，冻干粉针）。

试验仪器包括：CS101-A型电热鼓风干燥箱（重庆实验设备厂）、BCD-539WF海尔电冰箱（青岛海尔股份有限公司）、5mL注射器（宣城市江南医疗器械有限公司）、爱德士测孕试剂盒（美国爱德士生物科技有限公司）。

1.2   试验方法

试验于2015年9月在甘肃省临洮县华加牧业科技有限责任公司养殖基地进行。试验共设3个处理，分别为处理A，“4+2法”（4次PGF2α、2次GnRH法）同期发情定时输精程序处理;处理B，“2+4法”（2次PGF2α、4次GnRH法）同期发情定时输精程序处理;处理C，自然发情，不进行同期发情定时输精程序处理（CK）。处理A和处理B各选取产后90 d以上不发情、以及2次配种仍然不孕且体况评分在2.5～4.0分的有繁殖障碍的荷斯坦经产奶牛20头，处理C选取自然发情的奶牛20头。

试验采用2种不同的同期发情定时输精程序，即试验组Ⅰ程序（4次PGF2α、2次GnRH法，简称“4+2法”）和试验组Ⅱ程序（2次PGF2α、4次GnRH法，简称“2+4法”）。

处理A 同期发情定时输精程序：试验开始的当天记为0 d，并且在当天10：00时注射1次PGF2α，14 d后的10：00时注射1次PGF2α，25 d后的10：00时注射1次GnRH，30 d后的10：00时注射1次PGF2α，31 d后的10：00时注射1次PGF2α，33 d后的10：00时注射GnRH同时进行人工授精。 处理B同期发情定时输精程序：试验开始的当天10：00时注射1次GnRH，7 d后的     10：00时注射1次PGF，10 d后的10：00时注射1次GnRH，17 d后的10：00时注射1次GnRH，24 d后的10：00时注射1次PGF，26 d后的午16：00时注射GnRH，27 d后的10：00时进行人工授精。

试验每次注射激素均为10：00时和16：00时，PGF2α每次注射剂量为0.6 mg，GnRH每次注射剂量为60 μg。严格按照牛场的饲养管理进行试验。对实施不同的同期发情定时输精程序处理的奶牛进行子宫黏液评分和直肠检测评分，统计比较不同处理的同期发情率、受胎率。

1.3   测定指标及方法

1.3.1    发情统计    试验期间对不同试验的奶牛进行发情观察，及时记录发情时间及次数，计算同期发情率。

1.3.2    评分记录    以试验当天记为0 d，并在试验前进行1次子宫粘液评分和直肠检测评分，试验期间每隔7 d进行子宫粘液评分和直肠检测评分，并记录统计。子宫粘液评分和直肠检测评分均参照宫艳斌[11 ]的方法。

1.3.3    受胎率    定时对配种后的母牛进行仔细的返情观察，对未返情的母牛使用爱德士测孕试剂盒严格按照试剂盒标明的步骤进行检测，确定受孕母牛数，计算受胎率（配种后受孕母牛数和参配母牛数的比值）。

1.4   數据处理

试验数据使用Excel 2010统计数据，通过SPSS 19.0 软件中的单因素方差分析对数据进行统计分析和显著性检验，结果以平均值与标准差表示。

2   结果与分析

2.1   不同处理的发情率

由表1可以看出，2组试验奶牛发情均主要集中在第5次注射激素后，说明第5次注射激素后奶牛均会出现发情高峰期。处理A的奶牛5次肌肉注射激素后发情率分别为 25%、35%、5%、15%、80%，处理B的奶牛5次肌肉注射激素后发情率分别为 0%、30%、15%、5%、90%，两处理的奶牛均以第5次肌肉注射激素后发情率最高，分别为80%和90%。

2.2   不同处理下子宫粘液和直肠检测

由表2可以看出，处理A试验后比试验前子宫黏液评分高0.55（P < 0.05），直肠检测评分高0.45（P < 0.05），处理B试验后比试验前子宫黏液评分高0.30（P  < 0.05），直肠检测评分高0.45（P  < 0.05）。从子宫黏液评分和直肠检测评分可以看出，两处理的奶牛卵巢和子宫生理功能均有显著改善。

2.3   受胎率统计

由表3可以看出，处理A、处理B和对照的第1个情期受胎率分别为65%、70%、40%，第2个情期受胎率分别为57%、66%、42%，总受胎率分别为85%、90%、65%，处理A、处理B第1个情期受胎率分别比对照高25、30百分点，总受胎率分别比对照高20、35百分点，可以看出经同期发情定时输精方案处理的奶牛受胎率要远高于自然发情奶牛的受胎率。

3   小结与讨论

同期发情主要是通过调节生殖激素的水平，调控卵泡的发育和排卵。定时输精技术是目前国内外应用较为广泛的一种同期发情技术，主要使用GnRH与PGH2α 2种激素， 通过调控卵巢的发育，使处于不同发育阶段的卵泡达到同时排卵的作用。这种技术不需要观察发情，即可直接进行人工授精，其受胎率一般在50% ～60%[12 ]。PGF2α的合成类似物氯前列醇钠等，对母畜繁殖疾病具有治疗的作用[13 ]，是同期发情广泛使用的一种激素，尤其对黄体囊肿、持久黄体、子宫内膜炎等的治疗有较好的效果。本试验也充分说明了这一点：4次PGF2α、2次GnRH法同期发情定时输精程序处理、2次PGF2α、4次GnRH法同期发情定时输精程序处理的子宫黏液评分和直肠检测评分均显著提高（P < 0.05）。子宫黏液评分和直肠检测评分是对母畜繁殖机能以及子宫健康与否的最直观的评判依据，评分显著提高也说明了同期发情定时输精对不发情以及多次配种不孕的具有繁殖障碍的母畜有一定的治疗效果。

本试验显示，2个同期发情定时输精程序处理的受胎率均比对照自然发情牛的受胎率高，且2次PGF2α、4次GnRH法同期发情定时输精程序处理的第1个情期受胎率最高到达70%，4次PGF2α、2次GnRH法同期发情定时输精程序处理的第1个情期受胎率为65%，同时两组试验的奶牛同期发情率也达到80%以上，激素处理后明显提高了同期发情率和受胎率，这些结果与李启业等[14 ]、姚国良[15 ]、刘念锐等[16 ]研究结果一致。“2+4法”（2次PGF2α、4次GnRH法）同期发情定时输精程序处理第5次肌肉注射激素后奶牛的发情率高达90%。PGF2α处理主要作用是将卵巢中的功能性黄体退化，由于牛的个体差别，有些牛发情后5～6 d肌肉注射PGF2α就会对溶解黄体起作用，但大多数牛需要在发情后7～8 d才会有相同的效果，因此在母畜发情晚期处理时，卵巢中黄体就会被溶解[17 - 18 ]。母牛在注射激素（GnRH）时容易启动生殖周期的开始，如果母畜正处于黄体期或卵泡期，再利用激素调整到生殖周期的开始状态，要比处于卵巢静止的母牛要困难。余长林等[19 ]研究发现，利用OVS（GnRH+PG+GnRH） 同期发情程序的荷斯坦奶牛比自然发情的奶牛繁殖效率著提高了18.86%，且21 d 妊娠率也显著提高。曹晓云等[20 ]对黄牛采用OVS程序进行同期发情试验，得到了80%以上的受胎率，通过同期发情处理后任然不孕，推测可能是母畜生殖机能未具备完好的生殖条件所致[21 ]。因此，对于不发情、多次配种不孕以及生殖有障碍的奶牛，需要用药物适量多次调控奶牛的生殖周期，以便启动生殖周期的开始，使奶牛达到同期发情的目的。

本试验2种同期发情定时输精程序处理使用的PGF2α和GnRH均可以促进子宫复旧，恢复其正常功能。4次PGF2α、2次GnRH法同期发情定时输精程序处理后奶牛的子宫黏液评分和直肠检测评分分别较试验前提高了0.55分（P < 0.05）和0.45分（P < 0.05），2次PGF2α、4次GnRH法同期发情定时输精程序处理后的奶牛分别较试验前提高了0.30分和0.45分（P < 0.05）;4次PGF2α、2次GnRH法同期发情定时输精程序处理和2次PGF2α、4次GnRH法同期发情定时输精程序处理后奶牛的同期发情率分别为80%、90%，总受胎率分别比对照自然发情牛提高了20、25百分点。以上数据均表明，联合使用PGF2α和GnRH，通过2种同期发情定时输精程序均能有效的调节卵巢的功能与活性，尤其对于不发情、多次配种不孕以及生殖有障碍的奶牛，有效地控制了奶牛的繁殖障碍以及子宫炎症，且大大提高了奶牛受胎率。

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（本文责编：郑立龙）