西南獐芽菜中一个新的裂环烯醚萜苷

黄飞燕 吴健君 张应红 唐荣平 李干鹏

摘 要：为研究西南獐芽菜中的水溶性化学成分，该研究将西南獐牙菜80%甲醇提取物经二氯甲烷萃取后，水溶部分通过柱色谱及高效液相制备色谱分离纯化，结合波谱分析鉴定结构。结果表明：从西南獐芽菜甲醇提取物中分离并鉴定得到了一个新裂环烯醚萜苷，命名为西南獐牙菜内酯C。

关键词：西南獐芽菜， 裂环烯醚萜， 西南獐牙菜内酯C， 高效液相色谱

中图分类号：Q946

文献标识码：A

文章编号：1000-3142（2018）04-0441-03

Abstract：In order to study the water-soluble chemical constituents of Swertia cincta. The 80% MeOH extract of S. cincta was successively partitioned with dichloromethane. And water soluble fraction was separated and purified by column chromatography and high performance liquid chromatography， in combination of the structure accredited by spectroscopic analysis. A new secoiridoid glycoside separated from the methanolic extract out of S. cincta， named swertiacincside C.

Key words：Swertia cincta， secoiridoid glycoside， swertiacincside C， HPLC

西南獐芽菜为龙胆科獐牙菜属植物，多分布于云南、贵州、四川等地（何廷农，1988），具有清热解毒、利胆退黄的功效（耿家玲等，2012）。西南獐牙菜含有大量的裂环烯醚萜类成分（纪兰菊等，2004）。活性测试证实裂环烯醚萜类化合物多具有抑制HBV病毒作用，Jie et al（2015）从该植物中分离得到5个新裂环烯醚萜类化合物，其中swericinctosides A、9-epi swertiamarin、4″-O-acetyl swertianoside E对乙肝病毒表面抗原（HBsAg）有一定的抑制作用。在前期的研究中，本课题组从西南獐牙菜水溶性部分中已经分离得到多个环烯醚萜类化合物（Yang et al，2012； 李干鹏等，2011； Huang et al，2014）。在对西南獐牙菜的进一步研究中，采用高效液相色谱制备技术从该植物水溶成分中分离并鉴定得到一个新的裂环烯醚萜苷，命名为西南獐牙菜内酯C。其结构见图1。

1 仪器与材料

PE-241 旋光仪（美国PE）；Shimadzu UV-2401紫外可见分光光度计（日本岛津）；Shimadzu IR-435型红外光谱仪（日本岛津）；API QSTAR Pulsar液相色谱/四极杆/飞行时间串联质谱仪（美国PE）；Bruker AV-400Ⅲ核磁共振仪（德国布鲁克）；安捷伦LC-1100液相色谱仪（美国安捷伦）；MCI、大孔树脂（日本三菱）。

西南獐芽菜植物样品采自云南省玉溪新平县哀牢山，经云南省中医学院杨礼攀博士鉴定为西南獐牙菜（Swertia cincta），植物标本存于云南民族大学民族药资源化学国家民委—教育部重点实验室标本室（标本号：0601007）。

2 提取与分离

常温阴干的西南獐牙菜全草5.0 kg粉碎后，先用80%的甲醇低溫超声提取，共10次，每次4 h，提取液过滤、浓缩合并得棕色浸膏约800 g；然后加水搅拌至悬浮状，用二氯甲烷多次萃取。水相部分浓缩后经MCI脱色后合并，经大孔树脂脱糖洗脱，得到水（100%）部分156 g、甲醇（70%）部分273 g、甲醇（100%）部分45 g；取水部分浸膏45 g用HPLC制备（制备色谱柱为XDB-C18（21.2 mm × 250 mm）；进样量为250 μL；洗脱剂为V甲醇/V水=35/65（滴加3滴甲酸）；流速为8 mL·min-1得到Fr. 1-Fr. 5，再用艾杰尔半制备柱（Venusil XBP-C18 10 mm × 250 mm）；进样量为10 μL；洗脱剂为V甲醇/V水=8/92；流速为2 mL·min-1对其中的Fr. 1进行纯化制备，得到化合物1（11 mg）。

3 结构鉴定与分析

化合物1 无色固体（MeOH），mp145～148 ℃。 [α]D19-8° （c 0.070， MeOH）。ESI--MS m/z=425（M+Cl），HR-ESI-MS m/z=425.0850（C16H22O11Cl），推测分子式为C16H22O11，IR（KBr）cm-1：3431（-OH），1624（C=O），UV中λmax=203 nm。1H-NMR 和13C-NMR 数据见表1。从表1可以看出，1H-NMR和13C-NMR中显示分子结构中含有4个亚甲基、9个次甲基和3个季碳，13C-NMR谱中低场区碳信号δ161.2提示化合物结构中存在一个内酯羰基，烯碳信号δ157.3，122.4可推断化合物结构中存在一个C=C。

分析化合物的1H-NMR，质子信号δ2.95～δ4.32之间有特征的葡萄糖基信号，结合13C-NMR中δ98.1，73.1，76.5，69.9，76.9，60.9等数据进一步确定，化合物经酸水解分析确认苷元为D-葡萄糖，苷元端基质子偶合常数为8.0 Hz，可确定糖的相对构型为beta构型。1H，1H-COSY谱中可以看出C-H （9）与C-H （8）、C-H （1）相连，C-H （8）与CH2 （10）相连，CH2 （6）与CH2 （7）相连。结合13C-NMR及 1H-NMR谱可以看出8位的碳有一个-OH取代。HMBC谱表明H-1与C-1′相关，表明苷元连在C-1上，H-1与C-3相关可得知C-1与C-3之间通过O相连， 同时H-1还与C-5、C-8相关， H-3与C-10、C-5、C-11，H-6与C-4有相关性；H-7与C-11、C-5相关，可推测化合物结构中存在六元内酯结构， H-9与C-4、C-10存在联系，相关核磁波谱数据与化合物swertiacinctosides B（Jie et al，2015）、sweitiajaposide A（Masao et al，2005）、sweitiajaposide C（Masafumi et al，2008）进行比对后推测该化合物为裂环烯醚萜苷，结合H-3与C-10的相关性可推导C-H （3）与CH2 （10）之间通过O相连形成七元氧杂环。

4 结论

依据化合物的结构解析见图1，通过查询国内外文献以及数据库均未见有相关的报道。因此，确定该化合物为新化合物，命名为西南獐牙菜内酯C。

参考文献：

GENG JL， GENG CA， CHEN JJ， 2012. Chemical constituents of Swertia cincta [J]. Nat Prod Res Dev， 24（1）：42-46. [耿家玲， 耿长安， 陈纪军， 2012. 西南獐牙菜化学成分的研究 [J]. 天然产物研究与开发， 24（1）：42-46.]

HE TL， 1988. Flora Republicae Popularis Sinicae [M]. Beijing：Science Press， 62：408. [何廷农， 1988. 中国植物志 [M]. 北京：科学出版社， 62：408.]

HUANG FY， WU JJ，LI GP， 2014. A new secoiridoid glycoside from Swertia cincta [J]. Chin Herb Med， 6（1）：73-75.

JI LJ， BAO Y， SUN HF，et al， 2004. Determination of active constituents in fifteen species Swertia of genus by high performance liquid chromatography [J]. Acta Bot Boreal-Occident Sin， （7）：1298-1302. [纪兰菊， 保怡， 孙洪发， 等， 2004. 15种獐牙菜属植物中主要药用成分的高效液相色谱分析 [J]. 西北植物学报， （7）：1298-1302.]

JIE XX，GENG CA， CHEN JJ， et al， 2015. Five new secoiridoid glycosides and one unusual lactonic enol ketone with anti-HBV activity from Swertia cincta [J]. Fitoterapia， 102：96-101.

LI GP， ZENG SW， HUANG FY， et al， 2011. Studies on chemical constituents in Swertia cincta Burk （Ⅰ） [J]. J Yunnan Univ Nat （Nat Sci Ed）， （5）：350-352. [李干鵬， 曾思为， 黄飞燕， 等， 2011. 西南獐芽菜化学成分研究Ⅰ [J]. 云南民族大学学报 （自然科学版）， （5）：350-352.]

MASAO K， RIE K， MASAFUMI K， et al， 2005. Secoiridoid glycosides from Gentiana scabra [J]. J Nat Prod， 68（5）：751-753.

MASAFUMI K， RIE K， YAKUDA Y， et al， 2008. New secoiridoid glycosides from Swertia japonica [J]. Helv Chim Acta， 91：1236-1243.

YANG J， HUANG FY， LI GP， et al， 2012. Three new iridoid compounds from Swertia cincta Burkill [J]. Heterocycles， （11）：2775-2780.