雄性猕猴去势操作技术

谢金东, 周建华, 李志雄, 杨燕燕, 俞春英, 王训立

(1. 福建中医药大学实验动物中心, 福州 350122;2. 福建省计划生育科学技术研究所, 福州 350011)

在医学生命科学研究中, 去势手术是制作某些疾病动物模型的常用手段。例如, 制作大鼠、犬前列腺增生动物模型需要摘除睾丸; 骨质疏松症动物模型需要摘除老年雌性动物卵巢等。不同种类、不同大小的实验动物, 因其体质量、解剖结构等不同, 对去势手术的要求也不一样。猕猴(Macaca Nulatta), 在生物进化、生殖生理等方面与人类较为相似, 是研究人类疾病机制的理想动物模型[1]。在研究猕猴前列腺增生动物模型过程中, 我们对12只雄性猕猴实施了睾丸切除手术(去势手术), 现把手术操作方法, 介绍如下。

1 材料与方法

1.1 实验动物

普通级雄性猕猴, 12只, 年龄8～12岁, 体质量7～12 kg，由福建省计划生育科学技术研究所提供[闽林驯繁(2008-7)号, SCXK(闽)2015-0002]。动物单笼悬挂饲养，笼具规格: 75 cm×80 cm×90 cm,[SYXK(闽)2015-0007]。适应性饲养一周后开始实验，所有实验操作符合动物福利和伦理原则。

1.2 主要器械和药物

常规手术器械和消毒药品。盐酸氯胺酮注射液(2 mL、含0.3 g氯胺酮)，沈阳市兽药厂出品;陆眠宁II注射液(40 mg/2 mL/支)(主要成分: 盐酸塞拉嗪)，鹿醒宁注射液(250 mg/2 mL/支)(主要成分:尼可刹米)，吉林省华牧动物保健品有限公司出品;注射用头孢拉定(粉剂、1 g/瓶)，浙江海正药业股份有限公司出品。

1.3 操作方法

1.3.1 术前准备 预先清洁消毒手术室。彻底清洁墙壁、天花板及地面粉尘，保持手术台及手术用具干净整洁，不放置与手术无关物品; 提前1 h开启手术室紫外灯进行消毒; 保持室内温度20～25 ℃。手术者(主刀与助手)2～3人，戴一次性(已灭菌的)口罩帽子与乳胶手套，穿手术衣，严格无菌操作。术前动物禁食12 h，麻醉前检查动物精神状况、排泄物等正常后，方可安排手术。

1.3.2 麻醉与手术 按8 mg/kg氯胺酮注射液肌肉注射, 同时肌肉注射陆眠宁II注射液0.07 mL/kg, 协同麻醉后, 仰躺, 四肢固定于手术台上。此麻醉剂量下动物在无催醒剂催醒的情况下, 一般在1.5 h后会自然苏醒。术中观察动物的呼吸、心跳及体温。阴囊剃毛备皮, 0.5%碘伏消毒, 75%消毒酒精脱碘后, 暴露阴囊中隔皮肤, 放置消毒好的方巾及洞巾, 用皮钳固定。采用阴囊中隔皮肤切口, 切口长度3～4 cm(以睾丸大小可刚好能用手挤出为佳), 切开皮肤, 注意不要伤及睾丸(图1左)。分离睾丸与阴囊腔, 用手把一侧睾丸往切口轻轻拉出, 用力不宜太大, 以免扯动腹股沟管环, 引起疝气。依次分离并钳夹输精管、睾丸、附睾的动静脉和输精管动脉, 用3-0号PGLA可吸收缝线双重结扎后, 切除睾丸及附睾。同法切除对侧睾丸及附睾(图1右)。最后观察处理阴囊腔内无出血及异物后, 洒上头孢拉定粉约0.5 g。缝合阴囊中隔皮肤切口, 用3-0号PGLA缝线全层圆针连续内缝，整齐创面, 涂0.5%碘伏消毒。最后，在腿部肌注头孢拉定1 g，防感染。术后均不放置引流条，无需拆线。

图1 猕猴睾丸摘除手术

1.3.2 术后护理 手术完后, 可肌注与陆眠宁II注射液同剂量的鹿醒宁注射液, 使动物早些苏醒, 恢复体温, 以便于观察术后动物体况, 并密切观察手术部位愈合情况。术后单笼悬挂饲养, 饲喂方式不变。观察室保持室温20～26 ℃。本手术是小型手术, 术后无使用镇痛药。手术第2日始, 每日肌注头孢拉定1 g, 手术部位0.5%碘伏消毒, 防感染; 连续3 d。

2 结果

实施手术12例，其中3只猴第2日见阴囊有肿胀现象, 说明有术后阴囊出血或发生疝气。经按压触摸, 有一只肿胀较软，有波动感, 是出血引起。用10 mL注射器吸取约15 mL血样液体后，注入0.5 g(2 mL)头孢拉定注射液。另二只肿胀较硬，应为发生疝气。我们于下午再次麻醉手术，切开有肿胀一侧阴囊皮肤，注意不要伤及肿胀内容物。发现一只是肠系膜漏出，另一只为肠管漏出。肠系膜漏出者，慢慢用手指回纳至腹腔; 肠管漏出者，扩大(剪开)一点腹股沟管环，慢慢用手指回纳至腹腔。之后，用3-0号PGLA缝线包裹阴囊内精索残端，行疝囊口“8”字缝合闭合。阴囊皮肤切口缝合及抗炎同上，再手术后，恢复良好。

3 讨论

本实验采用的猕猴睾丸切除术与其它动物的手术方法有所不同[2-6], 与人的传统睾丸切除术相似[7,8],但另有其特点。为了特定的科研要求, 本文中12只实验猴均切除睾丸及附睾, 术后恢复观察2个月后开始给予药物制作动物模型。所有手术遵守无菌操作原则。特别是做疝气手术, 与人的手术有异[9], 不采用腹部切口, 而是在疝气一边的阴囊做切口复位,主要是考虑猕猴不宜在清醒状态下输液, 连续手术,腹部切口创伤较大, 术后护理难度大, 不利受试动物恢复体况。再者, 采用二种麻醉药合用方法[10](同时肌肉内注身8 mg/kg氯胺酮注射液和0.07 mL/kg陆眠宁II注射液), 较适用于猕猴手术操作, 简便且效果好。