乳房肥大患者外周血中雌激素表达水平研究

王钠 马显杰 栗勇

[摘要]目的：研究乳房肥大患者外周血中雌激素表达水平，为乳房肥大患者病因学研究奠定基础，为腺性乳房肥大症的临床治疗提供相关实验依据。方法：将乳房肥大（95例）和正常体积乳房患者（84例）按照入院时处于月经周期的卵泡期、排卵期、黄体期进行分类，抽取患者入院当天外周血5ml，采用17β-雌二醇放射免疫药盒及SN-682放射免疫计数器测定外周血中17β-雌二醇表达水平，根据各指标OD值计算其浓度，结果采用放射免疫γ计数器及配套统计软件进行计数和数据处理。结果：在体重指数同一范围内，乳房肥大组与正常体积乳房组17β-雌二醇表达水平比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论：外周血中17β-雌二醇可能与乳房肥大的发生无关。

[关键词]乳房肥大症；雌激素；17β-雌二醇；外周血；体重指数

[中图分类号]R622 [文献标志码]A [文章编号]1008-6455（2018）05-0119-03

Study on Expression of Estrogen in Peripheral Blood of Patients with Mammary Hypertrophy

WANG Na，MA Xian-jie，LI Yong

（Department of Plastic Surgery，Xijing Hospital of the Military Medical University of the Air Force，Xi'an 710032，Shaanxi，China）

Abstract： Objective To study the expression of estrogen in peripheral blood of patients with mammary hypertrophy， and to lay a foundation for the study of etiology of mammary hypertrophy in the future， and to provide relevant experimental evidence for the clinical treatment of glandular mammary hypertrophy. Methods After admission， mammary hypertrophy （95 cases） and normal volume breast patients （84 cases） were classified according to the follicular phase， ovulation phase， and luteal phase during the menstrual cycle at the time of admission， and 5ml of peripheral blood was collected on the day of admission， using 17β-estradiol Radioimmunoassay kit and SN-682 radioimmunoassay counter were used to measure the expression level of 17β-estradiol in peripheral blood. The concentration was calculated according to the OD value of each index. The results were counted and processed by radioimmunoassay r counter and statistical software. Results There was no significant difference in the expression level of 17β-estradiol between hypertrophic breast and normal breast in the same range of body mass index（P>0.05）. Conclusion 17β-estradiol in peripheral blood may not be related to the occurrence of mammary hypertrophy.

Key words： mammary hypertrophy； estrogen； 17β- estradiol； peripheral blood； body mass index

乳房肥大症，指女性乳房腺体及脂肪结缔组织过度增生导致的体积和重量增加[1-2]。乳房肥大多发生在青春期和妊娠后女性的一侧或两侧乳房，给年轻女性带来巨大的痛苦。雌激素（estrogen）是一种女性激素，由卵巢和胎盘产生，肾上腺皮质也产生少量雌激素。雌激素是生物体内许多生物学过程如生长、发育和复制的关键调节剂，在男性和女性体内都包括许多雌激素的靶器官如生殖道、乳房组织、骨骼、心血管和中枢神经系统[3-4]。乳房组织在体内作为一个性激素作用的重要靶器官，性激素在其生长、发育、成熟及功能方面发挥着重要作用。有关外周血中雌激素水平与乳房肥大是否有关系一直存在争议，课题组在乳房肥大患者和正常体积乳房患者的外周血中检测雌激素的水平，分析雌激素对乳房肥大的Z作用。由于前来就诊的患者处于绝经期的稀少，临床资料无统计学意义，本次只研究卵泡期、排卵期和黃体期3个时期各组患者外周血中17β-雌二醇水平的差异。

1 材料和方法

1.1 一般资料：实验组为2012年12月-2014年2月西京医院整形外科收治的因乳房肥大行乳房缩小整形术的患者95例（见图1），其中卵泡期37例，排卵期32例，黄体期26例，均为女性，年龄14～51岁，平均29岁，平均体重指数22.25kg/m2，选择单侧乳房体积600ml以上，单侧乳房切除量均在300g以上。

对照组（正常体积乳房组）为2012年12月-2014年2月收治的乳房下垂行乳房上提悬吊术患者84例，乳房体积正常行单纯乳房下垂悬吊术81例，女复男乳房全切术3例（未服用激素）。其中卵泡期27例，排卵期31例，黄体期26例，均为女性，年龄17～45岁，平均年龄29岁，平均体重指数21.65kg/m2，乳房体积为250～350ml。经文献回顾及临床病例分析，目前学者们认为正常乳房体积250～350ml较合适[5]。两组年龄等基本资料比较，差异无统计学意义（P>0.05）。两组手术时间均不在月经期，选自月经周期后的第2～3周。所有患者均无全身其他系统疾病，无不良嗜好，饮食规律，生活健康，无明显手术禁忌证。

1.1.1 乳房体积计算：采用Sigurdson[6]等报道的方法。计算公式：乳房体积=33.5×PP+37.7×FP-1305（患者双手叉腰，背靠墙站立，用软卷尺沿乳房基底部测量其周长计为PP，在乳房表面标记一点P，该点为乳房下皱襞最低点在乳房前表面的投影，乳房下皱襞最低点到P点的直线距离为FP）。

1.1.2 排除标准：①人流及引产手术未满2月者；②近期内或1个月内有服用雌激素及相关药物史者；③6个月内有乳房手术史者；④有乳腺癌或乳腺癌家族病史者；⑤2个月内有乳房急慢性炎症史者；⑥停止哺乳未满6个月者；⑦乳房触诊可以摸到硬块及结节者；⑧既往有乳腺双侧或单侧的非典型增生者；⑨12个月内有子宫及卵巢等生殖系统切除及部分切除者；⑩长期月经周期不规律及行药物治疗者； 双侧或单侧乳腺痛及乳头溢液者； 乳房皮肤颜色及质地发生改变者。

1.2 主要试剂与仪器：17β-雌二醇试剂盒购自R-biopharm（德国拜发），血浆购自R-biopharm（德国拜发），甲基叔丁基醚购自R-biopharm（德国拜发），石油醚购自R-biopharm（德国拜发）。微孔板酶标仪（德国拜发），冰柜（美国Thermo Scientific公司），移液器（德国Eppendorf公司），刻度移液管（德国Eppendorf公司）。

1.3 实验方法：①将乳房肥大（95例）和正常体积乳房患者（84例）按照入院时处于月经周期的卵泡期、排卵期、黄体期进行分类，详细记录患者资料，抽取患者入院当天外周血5ml后静置并离心，取上清液（血清）；②取1ml样品于标记好的玻璃试管中，加入5ml醚混合物中[甲基叔丁基醚/石油醚（30/70 v/v）]，室温下（20℃～25℃）摇床内震荡20min；③提取液在-20℃冰箱内冷冻60min（或-80℃冰箱内冷冻30min），收集上清液于一个标记好的试管中；④含醚上清液在60℃水浴锅中蒸干，干燥残留物用400μl样品稀释液稀释并充分吹打混匀，每孔取20μl样品进行检测；⑤将稀释后的酶连接物溶液50μl与标准品或处理好的样品溶液20μl吹打混匀后逐一的加入到对应的微孔中；⑥向每一个微孔中加入50μl提前稀释的17β-雌二醇抗体溶液，充分吹打混匀，静置10min，在室温（25℃）条件下孵育2h；⑦将微孔中的液体弃去，将微孔架倒置于滤纸上，轻轻拍打微孔架，直至微孔中的液体完全干燥，蒸馏水清洗微孔；⑧向每个清洗过的微孔中加入提前预冷好的50μl底物和50μl发色剂，充分混合后在室温（25℃）條件下避光处孵育1h；⑨恢复光照，将100μl反应终止液仔细加入前面每一个微孔中，充分混合；⑩向微孔中加入反应终止液，静置20min后于450nm处测量吸光度值； 根据各指标OD值计算其浓度并记录，采用放射免疫γ计数器及配套统计软件进行计数和数据处理。

1.4 统计学分析：采用SPSS 18.0版本统计软件进行分析处理，两组间体重指数比较采用t检验，外周血激素水平比较采用t检验的Mann-Whtney U进行统计分析，P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 体重指数检测结果：如图1所示，实验组95例患者体重指数为（22.25±5.11）kg/m2，对照组84例患者体重指数为（21.65±5.07）kg/m2，组间比较差异无统计学意义（P=0.9462），本次选择的患者来源排除了由于肥胖原因造成的乳房体积的差异，为后面进一步的实验奠定了基础。

2.2 外周血17β-雌二醇水平检测结果：如图3所示，实验组卵泡期患者外周血17β-雌二醇水平为（174.43±42.32）pmol/L，对照组为（189.11±57.45）pmol/L，组间比较差异无统计学意义（P=0.3029）；如图4所示，实验组排卵期患者外周血17β-雌二醇水平为（121.11±31.23）pmol/L，对照组为（132.77±41.42）pmol/L，差异无统计学意义（P=0.8160）；如图5所示，实验组黄体期患者外周血17β-雌二醇水平为（229.66±74.98）pmol/L，对照组为（214.11±63.25）pmol/L，差异无统计学意义（P=0.5526）。

3 讨论

至今，乳房肥大症只能通过手术治疗而达到缓解，对于腺性乳房肥大的发病机制尚不清楚。有学者认为体内雌激素在乳房的正常发育过程中起着重要的作用[7-8]。另有学者认为，乳房肥大的发生可能与乳腺组织局部的雌激素水平增多或靶细胞对雌激素的反应性增强有关[3，9]。雌激素相关的乳房肥大症多发生在青春期和妊娠后妇女，因其体内的激素水平处于比较敏感的变化时期，临床上有少部分青春期乳房肥大患者有着明显的遗传倾向[10]。

雌激素在人体内发挥着重要的作用，雌激素的主要成分是17β-雌二醇，17β-雌二醇在人体内许多器官的生长、发育过程中起着关键性的作用[11-13]，例如乳房、子宫、卵巢、前列腺等。雌激素能促进人类乳房正常生长发育，还在体内通过与雌激素受体的共同作用参与了各种乳房疾病的发生，例如：乳房的各种良恶性肿瘤等[11，14]。

目前有关外周血中雌激素水平与乳房肥大的统计学研究数据及病例较少。所以，为了使乳房肥大的病因学研究更好地服务于临床，本次收集了西京医院乳房肥大患者95例和正常体积乳房患者84例作为研究对象，为了确保所选患者均为腺性乳房肥大，排除一些由于过度肥胖所导致的脂肪性乳房肥大，对患者的体重指数及其他全身性疾病进行了严格筛选，排除由于肥胖原因造成的乳房体积的差异。女性患者的生理周期分为卵泡期、排卵期、黄体期及绝经期，由于处于绝经期的患者稀少，且绝经期妇女激素水平相对稳定，所以本次研究主要以卵泡期、排卵期和黄体期患者为主。3组处于不同生理周期的研究资料显示，乳房肥大组与正常体积乳房组患者外周血中17β-雌二醇比较，无明显升高，提示探索乳房肥大的病因应该从局部着手。大量的研究资料表明，乳房肥大可能是局部雌激素增多或乳房局部组织对雌激素的敏感性增强有关，所以进一步实验需要从局部去寻找与乳房肥大有关的雌激素水平及其受体的表达情况。

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[收稿日期]2018-01-28 [修回日期]2018-04-10

編辑/朱婉蓉