刘建国,惠军来,陈 军
(1.商洛市洛南县保安镇农业综合服务站,陕西洛南 726115;2.洛南县职教中心,陕西洛南 726100;3.洛南县巡检镇农业综合服务站,陕西洛南 726104)
热应激是指在高温环境中对机体提出的任何要求所做的非特异性生理反应的总和。其主要原因是环境温度增高,主要发生在夏季及温度较高的地区,雏鸡多发生,生理反应多为呼吸速度加快,心率加快,水及电解质平衡紊乱。动物表现食欲降低,张口呼吸,少动懒动,严重者大量死亡,给养鸡业造成巨大损失。当环境温度高于26℃时,鸡生长速度缓慢且在一定范围内成正相关(孔丽娜等,2015),发现在鸡处于热应激条件下其肉品质下降(李军乔,2012)。国内外对此进行大量研究,但尚未有较好的解决方法。
常用抗热应激剂有微量元素类、有机酸类、维生素类、抗生素类、镇静剂类和中草药类等。化药作为抗热应激有很好的效果,由于化药纯度较高,对机体造成的伤害较大,兽药残留较高。中草药是在中医基础理论和临床辨证基础上,依据药物的四气五味对机体进行调理,具有疗效显著、副作用小,残留少等特点,同时我国中草药资源丰富,因此,将中草药作为饲料添加剂对资源的利用有重要意义(于翠平,2014;陈国顺,2007)。本研究以金银花、地榆、白术、石膏等中草药为原料,依据中草药组方原则对其进行组方,并添加到饲料中,观察自拟中草药复方对仔鸡热应激的影响。
1.1 试剂 试验药材:金银花、地榆、白术、黄芪,以2∶1∶1∶1的比例进行组方,然后对各个药物进行粉碎。
1.2 试验动物 80只健康仔鸡来自洛南县秦丰源养鸡专业合作社王明亮养鸡场,试验于夏天环境温度,5 d平均温度在30℃以上进行。
2.1 动物分组 选取80只健康仔鸡,随机分为中草药饲料添加剂高剂量组、中剂量组、低剂量组和空白对照组,中草药饲料添加剂高剂量组、中剂量组、低剂量组分别按照基础日粮的1.5%、1.0%、0.5%进行添加。空白对照组不添加,正常饲喂,饲喂方式为自由采食和饮水,连续饲喂14 d。
2.2 中草药饲料添加剂对热应激试验鸡临床表现的影响 试验期间,在称饲料,饲喂饲料及定时对试验鸡进行观察,主要观察试验鸡的精神状态,运动情况、呼吸情况、采食和饮食情况及粪便状态等临床表现。
2.3 中草药饲料添加剂对热应激试验鸡生长性能的影响 试验前对试验鸡称重。每天上午定时给予饲料并称上一天没吃完的饲料,记录其日采食量。在第2天给料时称重并记录,试验结束时对试验鸡称末重。计算其日增重,料重比。计算公式如下:
2.4 中草药饲料添加剂对热应激试验鸡组织器官的影响 试验结束时,对试验鸡每组随机取3只进行剖检,观察试验鸡各脏器状态,有无肉眼可见的病变,若有进行病理切片制作,观察中草药添加剂对试验鸡组织的影响。
2.5 中草药饲料添加剂对热应激试验鸡血液生化指标的影响 试验结束时,对试验鸡翅静脉采血2 mL,置于抗凝管中,分离血清,使用全自动血液生化分析仪进行检测,其检测项目主要包括总蛋白,白蛋白,球蛋白,葡萄糖,谷丙转氨酶和谷草转氨酶。
2.6 中草药饲料添加剂对热应激试验鸡血清热休克蛋白含量的影响 试验结束时,对试验鸡翅静脉采血2 mL,置于抗凝管中,分离血清,利用ELISA试剂盒测定试验鸡血清中热休克蛋白含量的影响。2.7 数据处理 利用SPSS20.0软件进行单因素方差分析,Duncan’s法多重比较,试验数据均以“平均值±标准差”表示。P<0.01表示差异极显著,P<0.05表示差异显著。
3.1 中草药饲料添加剂对热应激试验鸡临床表现的影响 试验期间,试验鸡精神状态良好,反应灵敏,运动姿势正常,无扎堆现象,被毛光亮不杂乱,采食饮水正常,粪便正常。
3.2 中草药饲料添加剂对热应激试验鸡生长性能的影响 由表1可知,饲料中添加中草药后,试验动物的末重增加,但以高剂量组效果最好,与空白对照组相比差异极显著(P<0.01);添加剂中、低剂量组对日增重效果影响不显著,与空白对照组相比差异不显著(P>0.05),而高剂量与空白对照组相比日增重显著增加(P<0.05);日采食量各组之间无显著性差异(P>0.05),但添加剂组有升高趋势,料重比降低,与空白对照组相比,中草药添加剂高剂量组差异显著(P<0.05)。
3.3 中草药饲料添加剂对热应激试验鸡组织器官的影响 试验结束后对试验鸡进行解剖,试验鸡内脏无出血,无结节,无溃疡,脏器均正常,表明中草药饲料添加剂对热应激试验鸡组织器官无不良影响。
3.4 中草药饲料添加剂对热应激试验鸡血液生化指标的影响 由表2可见,给药中草药饲料添加剂后,各试验组鸡甘油三脂、球蛋白、白蛋白均无显著性差异(P>0.05),但中草药饲料添加剂组球蛋白、白蛋白含量有上升趋势。血清总胆固醇含量升高,与空白对照组相比,中草药添加剂中、低剂量组差异显著(P<0.05);血清总蛋白含量升高,与空白对照组相比,中草药饲料添加剂低剂量组差异显著(P<0.05)。
表1 中草药饲料添加剂对热应激试验鸡生长性能的影响
表2 中草药饲料添加剂对热应激试验鸡血液生化指标的影响 g/L
3.5 中草药饲料添加剂对热应激试验鸡血清热休克蛋白含量的影响 由表3可知,饲料中添加中草药后,热应激试验鸡的血清热休克蛋白含量升高,其中中草药添加剂高剂量组效果明显,与空白对照组相比,差异显著(P<0.05)。
表3 中草药饲料添加剂对热应激试验鸡血清热休克蛋白含量的影响 ng/L
随着集约化养殖方式的发展,空气流通和热量散发成了重要问题,加之夏天天气较热,湿度较大,因此,在温度较高地区热应激的发生率较高。对基础设施的改建又耗资较大。因此,在饲料中添加中草药或者某些药物来减少动物热应激是种较好的方式(胡永灵,2015;贺绍君,2014)。化药添加剂疗效显著,但长期添加可能出现耐药性或者器官毒性问题。由于中草药具有毒性小、残留低等特点,所以作为添加剂有较明显的优势,本研究以热应激临床表现对其进行辩证组方,选取具有清热解毒、疏散风热的金银花;具有凉血解毒的地榆;清热解毒,凉血止痢的白头翁;补气升阳,固表的黄芪进行组方,并以梯度剂量进行添加。试验中,临床表现结果表明:自拟的中草药复方添加剂对试验鸡并无不良影响,对试验动物安全。
生长性能是通过动物增重、采食量等指标进行判断的,可以直接表现试验动物的生长发育情况,研究表明,中草药饲料添加剂对热应激试验鸡有促生长作用,这种作用可能是通过改善试验鸡的热应激状态完成的。
血液是由血浆和血细胞组成。血浆为浅黄色半透明液体,含有无机盐、纤维蛋白原、白蛋白、球蛋白、酶、激素、各种营养物质、代谢产物等,对机体功能的行使具有重要作用(李振,2011;孙友林,2006)。血液生化指标可以间接反映机体代谢和正常情况,如总蛋白和白蛋白是机体蛋白质,是反映机体营养的重要指标,同时球蛋白是维持机体免疫功能的重要物质(杨恒伟,2010),研究结果表明,饲料中添加中草药可以增加血清总蛋白,这与陈静等(2006)研究结果一致。其余各生化指标虽无显著性差异但有升高趋势,如球蛋白含量,可以推测中草药添加剂亦有增强免疫的功能。
热休克蛋白是一类功能性相关蛋白质,当细胞受到温度或其他压力时,其表达会增长。热休克蛋白的主要功能是提高细胞抗应激能力,特别是耐热能力。热休克蛋白70家族最为重要和保守(TISSI RESA)。当机体出现热应激时,热休克蛋白70会被大幅度诱导,以提高细胞的耐热性和对细胞的保护作用(王丹,2011;孙培明,2006),因此,热休克蛋白70可以作为热应激指标。本研究结果表明,当试验动物在高温状态下,热休克蛋白70含量增加,使机体抵抗高热环境,饲喂添加中草药的饲料后,热休克蛋白70含量下降,表明饲喂中草药饲料添加剂能改善动物的热应激状态。