不孕类型和不孕年限与常规体外受精结局的相关性分析*

(内蒙古医科大学附属医院，内蒙古 呼和浩特 010050)

近年来，辅助生殖技术(assist reproduction technology,ART)无论是受精率还是妊娠率均取得很大的提高，但仍无法避免受精失败事件的发生，其发生率为5%～10%[1]。为提高卵子利用率，及时避免受精失败的发生，本文回顾性分析2014年3月-2016年10月在内蒙古医科大学附属医院生殖医学中心因女方因素接受体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)治疗(排除男方因素)1 128个周期，从不孕类型和不孕年限分析临床及实验室数据，旨在寻找受精失败发生的高危因素，为进一步选择合适的授精方式，提高卵子的利用率，提高受精率及周期妊娠率提供参考。

1 资料与方法

1.1 资料

回顾性分析因女方因素接受IVF-ET治疗1 128个周期，根据不孕类型分为原发不孕组591个周期和继发不孕组537个周期；其中受精正常1 063个周期和受精失败行早期补救卵胞浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)65个周期。

1.2 方法

1.2.1 控制性超促排卵 根据患者个体因素采用不同的促排卵方案，当2个主导卵泡≥18 mm时，注射绒毛膜促性腺激素(hCG,丽珠制药)5 000～10 000 u，35～37 h后穿刺取卵。

1.2.2 受精、受精后观察及胚胎评级 手淫法取精，采用密度梯度离心法+上游法处理精液，取卵后3～4 h受精，根据精子活力每个卵子添加精子1～1.5万条。受精后4～5 h去除卵母细胞周围的卵丘颗粒细胞，观察第二极体，推断卵子受精情况，第二极体排出少者继续培养至6 h；若第二极体排出卵子数占总卵子数比例＜30%，则行补救ICSI。受精后20 h观察原核，并于采卵后48和72 h分别进行胚胎形态学评价。评级为Ⅰ～Ⅲ级者为可移植胚胎[2]。

1.3 妊娠及随访

移植后14 d测血hCG，3～4周后B超检查孕囊确定临床妊娠。

1.4 统计学方法

数据分析采用SPSS 19.0统计软件，计量资料采用均数±标准差(±s)表示，符合正态分布采用独立样本t检验，计数资料采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组不孕基本情况比较

原发不孕组共591个周期，继发不孕组537个周期，两组在体重指数、年龄、基础内分泌、促性腺激素(Gonadotropins,Gn)总数、Gn天数与继发不孕组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)，两组不孕年限比较，差异有统计学意义(t=0.531，P=0.000)，原发不孕组的不孕年限高于继发不孕组。见表1。

表1 两组基本情况比较 (±s)

表1 两组基本情况比较 (±s)

?

2.2 两组不孕妊娠结局情况比较

两组受精率、正常受精率、卵裂率、受精失败补救ICSI率比较，经χ2检验，差异有统计学意义(P＜0.05)；两组妊娠率、胚胎种植率比较，经χ2检验，差异无统计学意义(P＞0.05)。见表2。

2.3 两组不孕年限对受精结局的影响分析

将原发不孕组和继发不孕组的不孕年限分为4个时间段进行受精结局比较，两组在不孕年限达4～6年和＞6年补救ICSI比较，经χ2检验，差异有统计学意义(χ2=4.528和4.580，P=0.034和0.049)。见表3。

表2 两组妊娠结局比较 %

表3 两组不孕年限对补救ICSI影响比较 例

3 讨论

在进行常规IVF助孕之前，受精情况是无法准确预测。若能从临床资料中初步预测IVF受精情况从而选择合适的受精方式避免受精失败是改善IVF结局的重要环节。受精失败主要与不孕年限、精子的质量、外界条件等因素有关，本研究较准确的分析不孕类型及年限与受精结局的相关性，特将纳入者排除男方精子因素，单纯因女方因素行ART者，结果显示:原发和继发不孕两组在不孕年限达4年以上者，原发组受精失败率高于继发组，可见原发不孕且不孕年限长的患者，受精失败的风险更大[3-4]，受精方式的选择和应用至关重要。原发不孕者不孕年限越长，患者体内存在的精卵结合障碍可能越严重[5]，且随着患者年龄增大，卵子质量降低，自然受精能力降低，因此，部分学者把原发性不孕患者作为直接ICSI或Half-ICSI的指征，虽然受精率可以达到20%～60%[6]，但是卵裂率及优质胚胎率降低，妊娠率及胎儿出生率仍偏低。2003年CHEN等[7]首次提出短时受精联合早期补救ICSI，可减少受精失败。但取卵时未成熟的卵母细胞在短时受精时由于脱离了受精环境而无法受精，从而造成短时受精组受精率低[8]，同时由于观察极体剥除颗粒细胞的时间正是原核形成的关键时期，外界的过多刺激可能增加遗传风险[9]。

综上所述，对原发不孕(排除男方因素)行IVF助孕的患者中不孕年限达4年以上者，高度警惕有受精失败的风险，在不影响正常受精率前提，并保证提高优质胚胎率的同时，该患者可以行短时受精结合早期补救ICSI，从而降低受精失败的风险[10]，既可避免过度ICSI治疗，又可选择性降低受精失败的风险。