高良姜正丁醇萃取部位化学成分研究△

魏娜，王勇，魏晴，张旭光，张俊清，黄艳

(1.海南医学院 药学院，海南 海口 571199；2.海南省药用植物研究与开发重点实验室，海南 海口 571199)

高良姜为姜科山姜属多年生草本植物高良姜AlpiniaofficinarumHance的干燥根茎，别名高凉姜、良姜、小良姜、佛手根等，始载于《名医别录》，历版《中华人民共和国药典》均有收载。主产于广东、广西、海南等省区，是“十大广药”之一，也是海南省重要的南药品种之一。高良姜味辛，性热，归脾、胃经，具有温胃止呕、散寒止痛的功能，用于脘腹冷痛、胃寒呕吐、嗳气吞酸[1]。由于高良姜为脾胃疾病的常用药之一，对其化学成分研究较多，但多集中在其黄酮、二芳基庚烷及挥发油等小极性成分的研究上[2]，往往忽略了其中极性较大部位的化学成分分离。高良姜中极性较大的成分类型主要有糖苷类和苯丙素类化合物[2-3]。本研究对高良姜正丁醇萃取部位进行了系统的化学成分分离，从中分离得到8个化合物，其中2个化合物为首次从山姜属植物中分离得到，3个化合物为首次从该植物中分离得到，本研究为该资源的进一步研究与开发提供了重要的物质基础。

1 仪器和材料

AV-400型核磁共振仪(瑞士Bruker公司)；岛津(LC-8A制备液相系统)；ODS(40-75 μm，日本富士公司)；Sephadex LH-20(瑞典GE公司)；氘代试剂(美国CIL公司)；柱色谱硅胶(青岛海洋化工厂，200～300，300～400目)；薄层色谱硅胶板(青岛海洋化工厂)；乙腈、甲醇(色谱纯，Honeywell公司)；其余试剂均为分析纯(国药集团化学试剂有限公司)。

高良姜于2014年12月采于海南省临高县，经海南医学院生药教研室曾念开教授鉴定为姜科(Zingiberacea)山姜属(Alpinia)植物高良姜AlpiniaofficiniarumHance的干燥根茎。原植物标本(HY2015012237)保存于海南医学院药物化学教研室。

2 提取和分离

将高良姜干燥根茎的粗粉8.0 kg用70%乙醇水回流提取3次，每次3 h，滤过，合并乙醇液，减压回收，醇提物加水混悬后依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇反复萃取，得正丁醇萃取物79.65 g。将正丁醇萃取物经常压硅胶柱色谱，以三氯甲烷-甲醇溶剂系统梯度洗脱，TLC检测，合并相同组分，再反复经硅胶柱色谱及凝胶柱色谱得到化合物1-8。

3 结构鉴定

化合物1：无色结晶(CHCl3-CH3OH)，mp 150～151 ℃，Molish反应阳性，ESI-MSm/z235[M-H]-1。1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ：4.23(1H，d，J=6.4 Hz，H-3)，3.73(1H，dd，J=3.5，9.8 Hz，H-6a)，3.66(1H，m，H-5)，3.60(1H，dd，J=3.4，9.6 Hz，H-4)，3.56(1H，d，J=11.2 Hz，H-1a)，3.52(1H，d，J=11.5 Hz，H-1b)，3.47(1H，dd，J=1.2，11.3 Hz，H-6b)，3.39(2H，m，CH2-7)，1.45(2H，m，CH2-8)，1.33(2H，m，CH2-8)，0.88(3H，t，J=7.3 Hz)；13C-NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ：100.3(C-2)，69.5(C-5)，69.3(C-3)，68.9(C-4)，63.6(C-6)，62.2(C-1)，31.9(C-8)，19.0(C-9)，13.8(C-10)。将化合物1的NMR数据与文献比对，最终鉴定其为正丁基-β-D-吡喃果糖苷[4]。

化合物2：白色粉末(CH3OH)，1H-NMR(400 MHz，CD3OD)δ：2.10(1H，m，H-2)，1.47(1H，m，H-2)，4.35(1H，d，J=13.0 Hz，H-3)，2.38(1H，m，H-4)，1.46(1H，m，H-4)，5.83(1H，s，H-8)，2.19(3H，s，H-10)，1.38(3H，s，H-11)，1.16(3H，s，H-12)，1.39(3H，s，H-13)，4.45(1H，d，J=7.8 Hz，H-1′)，3.16(1H，m，H-2′)，3.88(1H，dd，J=3.2，12.0 Hz，H-6′)，3.67(1H，dd，J=4.8，12.0 Hz，H-6′)；13C-NMR(100 MHz，CD3OD)δ：37.2(C-1)，46.8(C-2)，72.7(C-3)，48.2(C-4)，72.5(C-5)，120.2(C-6)，201.0(C-7)，101.3(C-8)，211.6(C-9)，26.7(C-10)，29.6(C-11)，32.4(C-12)，31.0(C-13)，102.9(C-1′)，75.3(C-2′)，78.3(C-3′)，71.8(C-4′)，78.1(C-5′)，62.9(C-6′)。将化合物2的NMR谱数据与文献比对，最终鉴定其为省沽油紫罗苷D[5]，为从高良姜中首次分离得到。

化合物3：淡黄色粉末(CH3OH)，1H-NMR(400 MHz，CD3OD)δ：7.59(1H，d，J=2.0 Hz，H-2′)，7.58(1H，dd，J=2.0，9.2 Hz，H-6′)，6.84(1H，d，J=9.2 Hz，H-5′)，6.40(1H，d，J=2.0 Hz，H-8)，6.20(1H，d，J=2.0 Hz，H-6)，5.46(1H，d，J=7.2 Hz，H-1″)，3.23～3.76(6H，m，H-2″～6″)；13C-NMR(100 MHz，CD3OD)δ：156.2(C-2)，133.2(C-3)，177.3(C-4)，161.1(C-5)，98.5(C-6)，164.0(C-7)，93.4(C-8)，156.0(C-9)，103.8(C-10)，121.5(C-1′)，115.1(C-2′)，144.7(C-3′)，148.3(C-4′)，116.1(C-5′)，121.0(C-6′)，100.7(C-1″)，74.0(C-2″)，76.4(C-3″)，69.8(C-4″)，77.4(C-5″)，60.8(C-6″)。将化合物3的NMR数据与文献比对，最终鉴定其为异槲皮苷(isoquercitrin)[6]，为从高良姜中首次分离得到。

化合物4：白色粉末(CH3OH)，ESI-MSm/z301[M+Na]+。1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ：7.72(2H，m，H-3，H-6)，7.67(2H，m，H-4，H-5)，4.28(4H，m，H-1′，H-1″)，1.72(4H，m，H-2′，H-2″)，1.47(4H，m，H-3′，H-3″)，0.98(6H，m，H-4′，H-4″)；13C-NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ：131.7(C-1，C-2)，128.6(C-3，C-6)，131.5(C-4，C-5)，166.9(C-7，C-7′)，66.6(C-1′，C-1″)，31.7(C-2′，C-2″)，19.8(C-3′，C-3″)，14.1(C-4′，C-4″)。将化合物4的NMR数据与文献比对，最终鉴定其为邻苯二甲酸二丁酯[7]，为从高良姜中首次分离得到。

化合物5：无色油状物(CH3OH)，1H-NMR(400 MHz，CD3OD)δ：7.97(2H，d，J=8.8 Hz，H-2，H-6)，6.96(2H，d，J=8.8 Hz，H-3，H-5)，3.84(3H，s，H-7)；13C-NMR(100 MHz，CD3OD)δ：129.2(C-1)，132.8(C-2，C-6)，114.5(C-3，C-5)，164.7(C-4)，55.9(C-7)。将化合物5的NMR数据与文献比对，最终鉴定其为对甲氧基苯酚[8]。

化合物6：浅黄色油状物(CH3OH)，1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ：9.56(1H，s，H-1)，7.49(1H，d，J=3.5 Hz，H-3)，6.60(1H，d，J=3.5 Hz，H-4)，4.51(2H，s，H-6)；13C-NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ：177.5(C-1)，151.3(C-2)，123.9(C-3)，109.2(C-4)，161.8(C-5)，55.5(C-6)。将化合物6的NMR数据与文献比对，最终鉴定其为5-羟甲基糠醛[9]，为从山姜属中首次分离得到。

化合物7：无色针状结晶(CH3OH)，1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ：7.76(2H，d，J=8.4 Hz，H-2，H-6)，6.93(2H，d，J=8.4 Hz，H-3，H-5)，9.79(1H，s，-CHO)，10.16(1H，s，-OH)；13C-NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ：128.0(C-1)，132.0(C-2)，115.9(C-3)，163.9(C-4)，115.9(C-5)，132.0(C-6)，190.7(-CHO)。将化合物7的NMR数据与文献比对，最终鉴定其为对羟基苯甲醛[10]。

化合物8：白色粉末(CH3OH)，1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ：7.35(1H，d，J=1.6 Hz，H-2)，6.92(1H，d，J=8.0 Hz，H-5)，7.39(1H，dd，J=8.0，1.6 Hz，H-6)；13C-NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ：128.6(C-1)，110.8(C-2)，148.2(C-3)，153.2(C-4)，115.4(C-5)，126.0(C-6)，190.8(-CHO)，55.6(-OCH3)。将化合物8的NMR数据与文献比对，最终鉴定其为香草醛[11]，为从山姜属中首次分离得到。

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[S].北京：中国医药科技出版社，2015：287-288.

[2] 高振虎，陈艳芬，杨全，等.南药高良姜的研究进展[J].广东药学院学报，2016，32(6)：817-820.

[3] 李洪福，李永辉，王勇，等.高良姜化学成分及药理活性的研究[J].中国实验方剂学杂志，2014，20(7)：236-244.

[4] An N，Jia L，Yang S L. A new glycoside fromAlpiniaOfficinarum[J].药学学报, 2006,41(3):233-235.

[5] 谢彬彬，侯蕾，郭宝林，等.中药益智正丁醇萃取部位的化学成分研究[J].药学学报，2014，49(11)：1569-1573.

[6] 张志强，李石飞，张立伟，等.黄芫花化学成分及其抗乙肝病毒作用[J].中草药，2017，48(7)：1292-1297.

[7] 魏华，何春年，彭勇，等.川木香化学成分研究[J].中国中药杂志，2012，37(9)：1249-1253.

[8] 蔡元元.月季花正丁醇部位的化学成分及抗肿瘤活性的研究[D].郑州：郑州大学，2014.

[9] 艾凤伟，张嵩，李艳凤，等.白附子的化学成分研究[J].中草药，2010，41(2)：201-203.

[10] 李丽，孙洁，孙敬勇，等.马尾松花粉化学成分的研究[J].中草药，2010，41(4)：530-532.

[11] 郑俊霞，王乃利，陈海峰，等.翠云草中酚性成分的分离与鉴定[J].中国药物化学杂志，2007，17(5)：302-305.