1例温自身抗体引起的疑难配血的分析与探讨

高凌峰

（临汾市中心血站 山西 临汾 041000）

自身抗体是指机体自身耐受的完整性遭到破坏，无法识别自身组织器官、细胞及细胞成分，导致免疫系统产生针对自身相应组织器官、细胞及细胞成分的抗体。自身抗体一般分为冷自身抗体和温自身抗体2类。冷自身抗体多产生于某些疾病的活动期，这些抗体由于不引起溶血反应，因此没有临床意义。温自身抗体多产生于恶性肿瘤、淋巴组织增生性疾病、自身免疫紊乱等，能引起溶血反应，具有临床意义[1]。自身抗体一般无特异性，可凝集自身红细胞以及所有人的红细胞，因此对血型鉴定、抗体筛查及交叉配血造成影响。因本次发现一例病例，特作进一定的探讨，进行临床意义分析。

1.资料与方法

1.1 标本情况

市第二人民医院送至本单位的一例疑难配血标本，医院正反正型不符，送本单位进行鉴定并交叉配血。

1.2 试剂

ABO标准红细胞(本室自制)；抗-A、抗-B标准血清（长春博德）；抗-D、抗-C、抗-c、抗E、抗-e等血型定型试剂、谱细胞、筛选细胞（上海血液中心）。聚凝胺试剂盒(珠海贝索生物技术有限公司)；抗人球蛋白试剂(长春博讯生物技术有限责任公司)。试剂均为合格试剂并在有效期内。

1.3 方法及操作

1.3.1 方法 ABO血型、Rh（D）血型鉴定；吸收、放散试验；直接抗人球蛋白试验；间接抗人球蛋白试验；抗体筛选及特异性鉴定均按照标准方法操作。对送检患者的血样进行直接抗球蛋白试验，吸收放散试验，ABO、Rh血型鉴定，抗体筛查及抗体鉴定试验。

1.3.2 操作 患者红细胞的处理：取患者标本红细胞适量，用37℃温盐水洗涤3次，去除冷自身抗体对试验的影响。取试管2支，分别标记，在1管中加入1体积洗涤的患者红细胞和3体积的盐水，在2管中，加入同等体积的盐水和洗涤后的已知血型的压积红细胞，45℃孵育10min，振荡。1000转/分离心1分钟，吸去上清液。在1管中加入少量盐水，离心，观察，与未经放散时红细胞进行自身凝集强度作对比，如果标本红细胞仍有自身凝集但自身凝集强度减弱，重复上述试验，直至没有自身凝集。将放散后的标本红细胞用生理盐水洗涤3次，配成2%～5%的红细胞悬液，准备用于血型鉴定。如果处理后的己知血型的红细胞不与对应的抗血清发生凝集，则本次试验无效。

1.3.3 患者血清的处理 将放散之后的标本红细胞盐水洗涤3次，最后吸尽上清液，取压积红细胞1份，与等量的患者标本血清混合，在4℃孵育60分钟，不时摇匀，然后1000转/分离心5分钟，吸取上清液，检查凝集情况，以确定冷自身抗体对患者标本的影响；另取压积红细胞1份，与等量的患者血清混合，在37℃孵育60分钟，不时摇匀，1000转/分离心5分钟，吸取上清液，检查凝集情况，如果仍存在自身凝集，重复上述实验，排除温自身抗体对患者标本血清的影响

1.3.4 血型鉴定 取4支洁净试管，分别加入抗-A、抗-B、抗-AB、抗-H血清各2滴，并标记，再分别加入放散处理后的患者2～5%的红细胞悬液各1滴，混匀；取洁净试管3支，分别加入A、B、O型2～5%试剂红细胞悬液1滴，并标记，然后加入吸收处理后的患者血清2滴，混匀；另取试管1支，做自身对照，加入吸收后的患者血清2滴和放散后的患者2～5%红细胞悬液1滴，混匀。3000转/分离心10s，记录结果。

1.3.5 抗体筛查试验 血清两滴加入标有ⅠⅡⅢ的试管中，对应加入ⅠⅡⅢ套2%～5%筛选红细胞悬液1滴，37℃孵育30分钟。3000转/分离心10秒，观察凝集和溶血情况，并记录。盐水法如为阴性继续做抗人球蛋白法。如为阳性，则做谱细胞格局。

1.3.6 直接抗人球蛋白 实验取洁净试管2支，各加入患者洗涤3次后配制的3%红细胞悬液1滴，加入抗人球蛋白试剂1滴，混匀；不完全抗-D血清致敏的3%D阳性红细胞悬液1滴加抗人球蛋白试剂1滴，混匀，做阳性对照；正常人3%D阳性红细胞悬液1滴加抗人球蛋白1滴，混匀，做阴性对照。1000转/分离心1分钟，记录结果[2]。

2.结果

未经处理的患者标本血样ABO血型鉴定结果见表1。吸收放散处理后的患者标本血样ABO血型鉴定结果见表2。

表1 未经处理的患者标本血型鉴定结果

表2 处理后的患者标本血型鉴定结果

由上述结果可以看出，吸收放散处理后的标本红细胞和血清正反定结果在4℃、室温、37℃下均显示相同的反应，确定该患者血型为A型。处理后的血清抗筛试验为阴性，处理后的红细胞直接抗人球蛋白实验为阴性。

3.讨论

由以上结果可知，该患者血样中存在IgG和IgM性质的温自身抗体。温自身抗体多为IgG性质，IgM性质抗体较少，引起患者自身细胞凝集而影响血型鉴定的更为少见。当冷凝集自身抗体影响血型鉴定时，可以采用37℃温盐水洗涤红细胞的方法去除自身抗体的影响；当温自身抗体影响血型鉴定时，采用热放散的方法可以去除自身抗体的影响，但在热放散过程中需注意加入对照试验，以检查放散过程中是否破坏了抗原的反应性。对于此类病人的输血治疗，应注意严格掌握其输血指征，既要考虑输血的必要性，也要考虑输血后的危险性。在达到临床相应的输血指征并必须要输血的时候，既使交叉配血不相合，仍然可以输注配血不相合的血液。可选择ABO、Rh等重要血型相同的同型血多份，逐一与病人血液进行配血，从而选择“最小不相容性”，即配血中反应最弱的血液输注，洗涤红细胞为此类患者输血的首选。此时对于成人每次输血以不超过2U为宜，以尽量慢的速度输血，时刻观察[3]。

[1]张志峰，刘佳.温反应自身抗体导致两种交叉配血结果不一致分析[J].国际输血及血液学杂志，2012.35.2.

[2]中华人民共和国卫生部.中国输血技术操作规程（血站部分).

[3]向东，刘曦，王健莲，沈伟，陆琼.金沙红细胞温自身抗体的血清学特点分析及配血对策[J].中国输血杂志，2008.21.12.