徐晓芳,舒 娟,王元辉,石玉梅
(铜仁市食品药品检验所,贵州 铜仁 554300)
中药丹参是指唇形科植物丹参(Salvia miltiorrhiza Bge.)的干燥根和根茎[1]。此药具有活血祛瘀、通经止痛、清心除烦、凉血消痈的功效。丹参酮类化合物(包括丹参酮ⅡA、隐丹参酮和丹参酮Ⅰ)是丹参的主要有效成分。在本文中,笔者主要比较不同产地丹参中丹参酮类化合物的含量。
1)1号样品:石阡五德地印产丹参(三年生)。2)2号样品:松桃正大产丹参(一年半生)。3)3号样品:松桃岑塘产丹参(一年生)。4)4号样品:松桃长兴产丹参(一年生)。5)5号样品:石阡五德地印产丹参(一年生)。6)6号样品:石阡坪山乡老寨村产丹参(2015年采一年生)。7)7号样品:石阡坪山乡老寨村产丹参(2014年采一年生)。8)8号样品:石阡龙塘大屯村产丹参(一年生)。9)9号样品:石阡坪山基地产丹参(一年生)。10)10号样品:石阡本庄产丹参(一年生)。11)11号样品:松桃正大基地产丹参(一年生)。12)12号样品:石阡龙井产丹参(一年生)。13)13号样品:山东淄博产丹参(一年生)。
1)日本岛津LC-20AD型高效液相色谱仪。2)AY-120-Z型电子天平和AUW-120D型电子天平。3)KQ-500E型超声波清洗器。
1)丹参酮ⅡA对照品(由中国食品药品检定研究院提供,批号:110766-200619)。2)乙腈为色谱纯,磷酸为优级纯,甲醇为分析纯。
色谱柱:Waters C18,4.6×200 mm;检测器:SPDM20A二极管阵列检测器;流动相:以乙腈作为流动相A,以浓度为0.02%的磷酸溶液作为流动相B[1];柱温:20 ℃;检测波长:270 nm;总流速:1 ml/min。
精密量取对照品溶液 0.25ml、0.5ml、1ml、1.5ml、2.5ml、5ml,分别置于10ml的棕色容量瓶中,加甲醇定容至刻度,超声处理5min。将上述溶液依次加入液相色谱仪中进行测定,记录峰面积。根据峰面积绘制标准曲线,并对所得数据进行回归计算。回归方程为Y=5E+07X+88152,r=0.9998。测定结果表明,丹参酮ⅡA在12.15~243μg/mL范围内的线性关系良好。
精密吸取供试品溶液10 μL,注入液相色谱仪中进行测定,记录峰面积。测定结果显示,丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA、隐丹参酮峰面积的RSD分别为0.232%、0.168%、0.145%(n=6)。这表明,本测定方法的重复性良好。
精密吸取对照品溶液10 μL,连续进样5次,计算色谱峰面积。测定结果显示,丹参酮ⅡA的RSD为0.142%。这表明,本测定方法的精密度良好。
精密吸取供试品溶液10 μL,于室温下放置0 h、1 h、2 h、4 h、8 h、12 h、24 h、36 h后分别注入液相色谱仪中进行测定。测定结果显示:丹参酮Ⅰ峰面积、丹参酮ⅡA峰面积、隐丹参酮峰面积的RSD分别为0.798%、0.501%、0.902%。这表明,供试品溶液在室温下放置36 h内的稳定性良好。
分别称取6份同一供试品约0.3 g。将1~3号供试品分别加入到1 ml的对照品溶液(精密称取丹参酮ⅡA 12.15 mg,加甲醇25 mL,摇匀)中,将4~6号供试品分别加入到1.5 ml的对照品溶液中。分别精密吸取上述溶液10 μL,注入液相色谱仪中进行测定,记录色谱图,计算回收率。详见表1。
表1 进行加样回收率试验的结果(n=6)
取13批样品,将其制成供试品溶液。将上述供试品溶液加入液相色谱仪中进行测定丹参酮类化合物的含量。详见表2。
表2 进行样品中丹参酮类化合物含量测定的结果
进行丹参酮类化合物含量测定的结果显示:从产地方面来看,铜仁市各地区出产的丹参中松桃长兴出产丹参中丹参酮类化合物的含量最高,其次是石阡本庄、石阡龙井和石阡坪山基地出产的丹参。其中有7个产地出产的丹参中丹参酮类化合物的含量高于山东淄博出产的丹参中丹参酮类化合物的含量。可见,铜仁市多数地区出产的丹参中丹参酮类化合物的含量均高于山东淄博出产的丹参。这说明,铜仁市多数地区均适合进行丹参的栽培种植。从采收年限方面来看,一年半生及三年生的丹参中丹参酮类化合物的含量低于一年生的丹参。可见,丹参更适于一年生种植。
参考文献
[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京:化学工业出版社,2015,52.