长江江豚细菌性疾病的诊治

刘志刚 郑爱芳 陈敏敏 连玉喜 蒋胡艳 于道平

(1. 安庆师范大学生命科学学院， 安庆 246011； 2. 水生生物保护与水生态修复安徽省高等学校工程技术研究中心， 安庆 246011)

长江江豚(Neophocaena asiaeorientalis asiaeorientalis)是鼠豚科唯一的淡水种类， 生活在长江中下游及毗邻的洞庭湖和鄱阳湖， 目前的种群数量已不足1000头， 且每年以13.7%的速度下降[1，2]。2014年起， 农业部把长江江豚视为I级重点保护动物，2016年发布了《长江江豚拯救行动计划2016—2025》， 其中明确提出加快建立长江江豚易地保护。

长江江豚极度濒危， 迁地保护被认为是最重要和最有效的保护措施， 这也是未来主要推动的保护措施之一， 目前国内已建成4个迁地保护区和1个人工养殖群体， 迁地保护的种群数量接近100头， 并且各保护区一定程度上实现了小环境下的自我繁育。但是这些区域由于水域面积有限， 水体流动不畅， 江豚活动范围相对较小， 温度显著上升的季节病原微生物也容易滋生， 易引起江豚抵抗力下降和诱发疾病[3—7]。

江豚、白鱀豚等大型水生动物由于操作难度大， 发病后症状不明显， 再加上专业人员缺乏， 所以目前关于豚类疾病方面的研究报道很少， 在已报道的研究中以细菌感染引起的呼吸系统疾病、消化系统疾病以及皮肤病最为常见且危害最大。20世纪70年代以来曾有相关学者[8]在人工环境下饲养过4头白暨豚， 其中3头都因呼吸系统和消化系统的疾病而死亡； 赵庆中等[8]在对大量死亡江豚进行剖解时发现， 人工环境下饲养初期死亡的江豚大部分死因为内科疾病； 于道平等[9]在对野外捕获的7头江豚进行健康调查中发现， 健康个体只占30%， 其余个体均存在不同程度的贫血症， 且有两头江豚呼吸系统症状较明显， 后经病原分离发现其致病菌为铜绿假单胞菌和醋酸不动杆菌； 郭政等[10]在对生活在豚馆里一头有呼吸道症状的江豚进行病原分离时获得了一株致病菌铜绿假单胞菌； 张西斌[7]在对铜陵半自然水域生活的江豚进行健康体检时发现， 大部分江豚健康状况良好， 但个别江豚存在贫血、身上长瘤状物以及患呼吸道疾病的风险。另外， 江豚疾病诊治方面， 成功的案列非常少， 目前除郭政等使用抗生素疗法对一头感染铜绿假单胞菌的病豚治疗成功以外[10]， 目前还没有其他相关报道。

本文利用兽医学诊断方法对安庆西江围网内一头感染细菌疾病的江豚进行了综合诊断， 并将静脉输液技术与科学护理运用到治疗过程中， 实现了对江豚的成功救治。本研究的成功开展， 对江豚、海豚等鲸类动物疾病的诊断与治疗具有重要的借鉴意义， 同时也为未来长江江豚迁地保护种群的健康管理提供了科学指导。

1 材料与方法

1.1 患病江豚基本情况

患病江豚来源于安庆西江江豚救护中心， 发病前被一直饲喂于围网环境中， 成年雄性， 营养状况良好， 全身皮肤无明显外伤， 眼结膜充血潮红， 粪便稍稀， 体温36.5℃， 治疗前已拒食5d左右， 水中游泳动作稍迟缓。具体体征测量指标为: 体长154 cm，体重48 kg， 腋下围88 cm， 最大围94 cm。

1.2 试剂材料

大豆酪蛋白琼脂TSA培养基、TSB培养基、Baird-Parker琼脂平板、血平皿培养基购自青岛海博生物技术有限公司； DNA聚合酶、dNTP、DNA Marker、琼脂糖、Loading Buffer等PCR扩增及鉴定相关试剂购自武汉生物技术有限公司； 革兰氏染色液， 购自武汉谷歌生物有限公司； 药敏片购自杭州微生物试剂有限公司； 血液血常规、生化采集管购自安庆海军医院； 16S rRNA通用引物由上海生物工程有限公司合成。

1.3 病原菌的分离鉴定

细菌分离培养 用棉签沾取灭菌生理盐水对江豚呼吸孔及周边皮肤进行清洁处理， 之后分别用血平皿、Baird-Parker琼脂平板以及TSA平板无菌采集患病江豚呼吸孔微生物， 37℃恒温培养24h，挑取单一菌落接种TSA培养基， 在相同条件下培养16—18h对菌株进行纯化， 纯化后挑取单一菌落， 经革兰氏染色镜检， 对细菌进行形态学鉴定。

细菌PCR鉴定 利用细菌基因组提取试剂盒， 对纯化后的菌液进行基因组提取， 以提取后的DNA溶液作为模板， 使用16S rRNA通用引物(27F :AGAGTTTGATCCTGGCTCAG， 1492R: TACGGC TACCTTGTTACGACTT)对分离菌株进行PCR鉴定。PCR反应体系(25 μL)为: 27F和1492R引物各1 μL，TaqDNA聚合酶0.5 μL， dNTP 1 μL， 10×TaqDNA Buffer 2.5 μL， DNA模板5 μL， ddH2O 14 μL。PCR反应条件为: 95℃预变性5min， 94℃变性45s，54℃退火30s， 72℃延伸1.5min， 30个循环后， 72℃进一步延伸10min， 16℃ 10min。PCR产物用0.8%的琼脂糖凝胶电泳检测， 阳性样品送上海生工生物工程技术有限公司测序。测序结果通过GenBank中Blast应用对序列进行比对， 确定分离菌属性。

1.4 血样检验

江豚尾鳍静脉采取血液6 mL， 分别分装于血常规采集管和生化采集管各2 mL和4 mL， 送安庆海军医院进行血常规和血液生化检测。

1.5 药敏试验

采用Kirby-Bauer扩散法， 选取阿莫西林、阿米卡星、头孢曲松钠等抗菌药物对分离致病菌做药物敏感性测定， 具体做法及敏感性判定， 参照美国临床实验室标准化协会(CLSI)2010年制定的《抗微生物药物敏感性试验执行标准； 第二十版信息增刊》[11]。

1.6 治疗方案制定

治疗方案的制定， 综合考虑多种因素， 本病例主要采取起水输液的方式对患病江豚进行治疗。初期因部分诊断结果耗时较长， 因此， 前期以对症治疗为主， 针对本患病江豚存在的问题主要通过使用一些能量合剂和提高机体免疫力的药物来使患病江豚快速恢复体能和维持自身需求。通过细菌分离鉴定及血常规检测结果， 确定细菌性疾病感染时， 参照药敏试验结果， 优先选择一些分别针对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的广谱抗生素进行治疗。药物使用途径， 前期以静脉滴注为主， 待患病江豚食欲大部分恢复后改为口服给药。除此之外，整个治疗方案的制定还应将江豚护理考虑在内， 做好包括输液全程呼吸频率监测、用药后反应情况观察、定时浇水等工作。

2 结果

2.1 病原菌的分离鉴定

呼吸孔微生物样品接种培养纯化后， 在血平板培养基上生长良好， 菌落呈乳白色， 表面光滑湿润，呈革兰氏阴性菌， 单个或成对存在， 菌体大小(0.3—0.5) μm×(0.6—1.2) μm(图 1)。样品经Baird-Parker琼脂平板培养， 大量且比较均一的菌落长出， 菌落呈圆形， 黑色， 染色镜检可见呈葡萄串样排列的革兰氏阳性球菌(图 2)， 与血平皿和TSA平板培养基分离的阳性球菌属于同1种菌。

对纯化后的菌液进行PCR扩增， 得到1条约1500 bp大小的目标片段， 与测序结果基本一致(1449 bp和1453 bp， 见附件1和2)。将序列在NCBI上经Blast进行同源性比对， 结果显示， 分离的革兰氏阳性球菌与金黄色葡萄球的序列同源性最高， 相似性高达97%， 分离的革兰氏阴性杆菌与魔氏摩根菌的序列同源性最高， 相似性高达98%， 综合细菌形态学鉴定结果， 可确定从患病江豚呼吸孔分离到的致病菌为金黄色葡萄球和魔氏摩根菌。

2.2 血样检验

图 1 革兰氏阴性菌分离株菌落及菌体形态Fig. 1 The Colony and morphology of the strains of Gram-negative bacteria

图 2 革兰氏阳性菌分离株菌落及菌体形态Fig. 2 The Colony and morphology of the strains of Gram-positive bacteria

以江豚尾静脉采取的血液为材料， 对病程中的江豚分别进行了3次血常规和血液生化指标检测，并与发病前健康血象指标进行比较(表 1、表 2)， 血常规检测结果显示， 白细胞总数明显升高， 中性粒细胞百分比也由发病前的46.2%升高到91%， 淋巴细胞百分比明显降低， 由发病前的28.9%下降到5.8%， 表明江豚机体有炎症。另外， 平均血红蛋白量和平均血红蛋白浓度明显升高， 揭示机体有脱水现象。红细胞数量轻微下降不排除机体内脏器官有出血或败血症的可能。此外， 血常规检测结果还显示单核细胞百分比和嗜酸性粒细胞百分比明显降低， 预示机体免疫功能有降低趋势。血清生化检测结果显示， 总胆红素与间接胆红素， 谷丙转氨酶和碱性磷酸酶4项指标升高， 提示肝脏可能损伤， 而尿酸升高及肌酐降低， 也预示患病江豚肾功能有异常。血常规及血清生化检测结果揭示， 患病江豚发生了严重的细菌感染且病情有恶化趋势， 细菌导致的感染已引起肝脏、肾脏等内脏器官功能异常。

2.3 药敏试验

采用Kirby-Bauer扩散法， 选取阿莫西林、阿米卡星、头孢曲松钠等抗菌药物对分离致病菌做药物敏感性测定， 结果显示金黄色葡萄球菌对氨苄西林、阿莫西林、头孢曲松等药物敏感， 对克林霉素中度敏感， 对红霉素、四环素、庆大霉素等药物耐药； 魔氏摩根菌对多粘菌素B、头孢曲松、阿米卡星等药物敏感， 对阿奇霉素、氧氟沙星、链霉素中度敏感， 对万古霉素、庆大霉素、复方新诺明耐药(表 3、表 4)。

2.4 治疗结果

通过对患病江豚致病微生物的分离培养与鉴定， 结合血液检测结果， 可确诊该病是由金黄色葡萄球菌和魔氏摩根菌混合感染引起的严重细菌性疾病。在正确诊断的基础上， 综合考虑多方面因素制定了治疗方案(表 5)。治疗结果显示用药后第3天， 病情明显好转， 江豚拒食现象消失， 可自由采食一部分人工投喂的饵料鱼， 并出现水中捕鱼行为。至用药后第8天江豚采食量和行为基本恢复正常， 血液检测结果接近该江豚发病前健康状态参数(表 1、表 2)。此外， 为减少离开水面对江豚造成的应激和避免意外发生， 江豚起水输液治疗过程中，除保持输液室内合适的温度和空气流通外， 还对江豚进行了包括定时向其呼吸孔和皮肤浇水、紧张按摩、呼吸频率监测(表 6)等在内的多种护理行为。行为观察结果显示除治疗第1天， 江豚有比较剧烈的挣扎行为， 稍有紧张以外， 从治疗第2天， 尤其是从第3天开始江豚表现相当温顺， 基本不需要人员保定。江豚呼吸频率监测结果显示， 治疗前2天江豚呼吸频率分别为(24.2±17.5)次/s和(28±14.3)次/s， 较水中呼吸频率(36.8±26.4)次/s用时较短， 说明江豚治疗前两天有紧张表现， 从第3天开始，江豚呼吸频率趋于稳定并与水中自由活动的呼吸频率相当， 这与江豚的行为表现相一致， 说明江豚适应了整个治疗过程。

表 1 江豚血常规指标Tab. 1 Hematology values of the Yangtze finless porpoise

3 讨论

长江江豚是目前生活在长江中下游及通江湖泊的唯一淡水豚类， 目前生存状况不容乐观。迁地保护作为目前长江江豚保护的重要举措之一， 在种群繁育、科学研究等方面发挥了积极作用。但在迁地保护过程中， 由于环境变化和应激反应等因素导致的江豚疾病问题应值得关注。研究发现， 江豚等鲸类动物一旦从辽阔的海洋或大型江河转入人工环境或小型水域进行饲养， 由于多种条件的改变和应激因素的存在， 极易诱发多种疾病且在转移后的几个月死亡率极高[8，9，12]。我国饲养江豚的历史由来已久， 尽管多次进行过白鱀豚和江豚的人工豢养， 但有相当一部分以失败而告终， 繁殖成功的案列更是少之又少[13—15]， 导致失败的原因大多归于疾病， 其中消化系统疾病和呼吸系统疾病最为常见且危害最大[8， 9， 12， 15， 16]。

表 2 江豚血液生化指标Tab. 2 Biochemistry values of the Yangtze finless porpoise

表 3 金黄色葡萄球菌药敏试验结果Tab. 3 Drug sensitivity test of Staphylococcus aureus

注: “S”表示敏感； “I”表示中度敏感； “R”表示耐药Note: S-sensitive； I-inhibition； R-resistant

表 5 治疗方案Tab. 5 Therapeutic schedule

长江江豚等水生动物的疾病诊断与陆生动物相类似， 但难度更大， 需利用多种方法进行综合确诊， 本文虽然分离到了金黄色葡萄球菌等致病菌，但这些菌大多为条件性致病菌， 在健康动物体内时常也可检测到[17]， 只有当动物持续受到应激刺激，导致抵抗力下降后才可引发疾病， 因此， 要对本病例进行确诊， 还要参考其他诊断方法。临床视诊作为疾病诊断的常用方法， 对于陆生动物尤其是临床症状比较典型的患病动物具有十分重要的诊断意义， 因长江江豚在感染疾病后， 除表现一般的临床症状外， 大多临床表现不典型， 所以临床视诊对于江豚疾病诊断意义不大。血液学诊断在人类和小动物疾病诊断中发挥重要作用， 通过血液检测可快速对病性以及各器官的损伤程度进行确诊， 该方法对江豚疾病诊断同样较为实用， 正确诊断的前提条件是有患病江豚健康时血液基础参考值。本研究通过细菌分离鉴定到两株致病菌， 血液检测结果呈细菌感染指征， 抗生素治疗有效且预后良好， 多种诊断方法确诊江豚感染了细菌性疾病， 且致病菌为金黄色葡萄球菌和魔氏摩根菌。

表 6 江豚治疗期间呼吸频率监测Tab. 6 The respiratory rate during therapy

金黄色葡萄球菌， 隶属于葡萄球菌属， 是一种重要的病原菌， 广泛存在于自然环境中， 可感染多种动物， 是一种重要的人兽共患病[18—21]。鲸类动物也有感染金黄色葡萄球的报道[22—25]， 且感染以后多呈肺炎经过[26]。魔氏摩根菌， 为革兰氏阴性杆菌，毒力较强， 可感染水龟、大鲵、锦鲤等水生动物，感染后可引起皮肤溃烂、败血症、肺炎、心包炎、脑膜炎、关节炎等[27—29]。对于2株细菌的致病性本文并未涉及， 后期可通过感染模式动物或鱼类对其感染性和致病力进行评价。

细菌性疾病的治疗原则以对症治疗和抗生素治疗相结合， 国内外兽医临床工作者也多采用这种方法对患细菌病的江豚或海豚进行治疗且效果良好[15，30—32]。本病例治疗方案的制定综合考虑了多种因素， 由于缺乏长江江豚用药参考， 药物选择方面多参考人药和小动物用药， 抗生素优先选择一些针对性强且安全系数高的药物， 注意轮换用药， 防治耐药性产生， 对于一些必选且容易产生副作用的药物比如氨苄西林， 除了配伍抗过敏药物地塞米松磷酸钠注射液以外， 用药过程中还应密切关注动物反应， 一旦出现问题， 应及时终止。药物剂量把控方面， 多参照每种药物的安全剂量以每公斤体重进行换算， 治疗初期剂量稍大， 后期根据需要适当减少。本病例由于感染非常严重且江豚食欲废绝无法通过口服给药， 为了达到较快疗效， 用药途径采取静脉滴注和肌肉注射相结合， 抗生素也尽可能选择一些杀菌机理不同的药物。关于江豚输液量的确定， 一般是根据丢失量加代谢需要量进行计算，但因无法对其评估， 所以这方面的工作还有待于进一步摸索， 目前仅能参考陆生动物。另外， 在江豚输液过程中， 精心护理至关重要， 其目的是最大程度减少江豚应激和保证顺利完成输液。输液过程中应认真做好以下工作: (1)定时浇水， 刺激江豚呼吸和防止其皮肤过于干裂； (2)密切关注其呼吸频率和行为， 有憋气现象应适当对其进行按摩或捶打；(3)保持治疗室内合适的环境温度和通风； (4)根据药物性质和江豚反应合理控制输液速度。通过本次治疗发现江豚的适应能力特别强， 药物治疗效果也比较显著， 输液疗法完全可以作为一种安全有效的技术手段用于江豚疾病的治疗。

疾病问题是江豚迁地保护区将来面临的主要问题之一， 积极进行长江江豚疾病的病原学研究，研制出可用于江豚疾病预防或诊疗的生物制品具有重要的意义。此外， 许多动物疾病的发生与饲养管理不善息息相关， 因此各迁地保护区应加强保护区的人员管理和培训， 以更加科学合理的方法对江豚进行保护。

参考文献:

[1] Mei Z G， Zhang X， Hao Y，et al. Accelerating population decline of Yangtze finless porpoise (Neophocaena asiaeorientalis asiaeorientalis) [J].Biological Conservation，2012， 153: 192—200

[2] Wang D， Turvey S T， Zhao X，et al. Neophocaena asiaeorientalis ssp. asiaeorientalis. In IUCN 2013. IUCN Red List of Threatened Species. Version 2013.1. www.iucnredlist.org

[3] Wang D. Present situation and protection of the Yangtze finless porpoise [J].Jiangxi Fishery Sciences and Technology， 2011， (126): 8—9 [王丁. 长江豚类的现状及其保护. 江西水产科技， 2011， (126): 8—9]

[4] Mei Z， Zhang X， Huang S L，et al. The Yangtze finless porpoise: on an accelerating path to extinction [J].Biological Conservation， 2014， 172: 117—123

[5] Huang D， L X， Wang Z F，et al. Phytoplankton Community Structure and Water Quality Assessment in the Tian-e-zhou Oxbow of the Yangtze River [J].Acta Hydrobiologica Sinica， 2016， 37(5): 8—13 [黄丹， 李霄， 望志方， 等. 长江天鹅洲故道浮游植物群落结构及水质评价. 水生态学杂志， 2016， 37(5): 8—13]

[6] Zhang J J. Protective measures for finless porpoises in phase II project of 12.5 m deepwater channel from Nanjing in the Yangtze River [J].China Harbour Engineering， 2016， 36(2): 20—21 [张建军. 长江南京以下12.5 m深水航道二期工程施工中江豚保护措施. 中国港湾建设， 2016， 36(2): 20—21]

[7] Zhang X B. Study on the health status ofNeophocaena asiaeorientalis asiaeorientalisin Jiajiang Semi-nature Water of Tongling [J].Journal of Anhui Agricultural Sciences， 2017， 45(5): 83—84， 88 [张西斌. 铜陵半自然水域夹江长江江豚的健康状况研究. 安徽农业科学， 2017，45(5): 83—84， 88]

[8] Zhao Q Z， Gong W M， Liu R J. Clinical observation and pathological diagnosis of the two cases of porpoise disease [J].Chinese Journal of Animal Science， 1998:381—389 [赵庆中， 龚伟明， 刘仁俊. 两例江豚疾病的临床观察和病理诊断. 中国兽类生物学研究， 1998:381—389]

[9] Yu D P， Jiang W H， Dong M L，et al. Investigation of health status of Yangtze finless porpoise in the field [J].Chinese Journal of Zoology， 2002， 37(5): 70—73 [于道平， 蒋文华， 董明琍， 等. 长江江豚野外健康状况的调查.动物学杂志， 2002， 37(5): 70—73]

[10] Guo Z， Zhao Q Z， Zhang X F. Diagnosis and treatment of pneumonia caused by Pseudomonas aeruginosa in a Yangtze finless porpoise (Neophocaena phocaenoides asiaeorientalis) [J].Acta Theriologica Sinica， 2007，27(1): 86—91 [郭政， 赵庆中， 张先锋. 长江江豚感染铜绿假单胞菌肺炎的诊治. 兽类学报， 2007， 27(1):86—91]

[11] Clinical and Laboratory Standards Institute. Performance Standards for Antimicrobioal Susceptibility Testing；Fourteenth Informational Supplement. 940 West Valley Road， Suite 1400， Wayne， Pennsylvania. 2010，19087—1898 USA

[12] Liu R J， Zhao Q Z. Study on the prevention and treatment of some internal diseases in Lipotes [J].Acta Hydrobiologica Sinica， 1994， 18(3): 174—179 [刘仁俊， 赵庆中. 白暨豚某些内科疾病的防治. 水生生物学报， 1994，18(3): 174—179]

[13] Liu R J， Wang K X， Zhao Q Z. Rearing of Cetaceans in Captivity in China [J].Acta Theriologica Sinica， 2002，22(2): 130—135 [刘仁俊， 王克雄， 赵庆中. 中国鲸类动物的人工饲养. 兽类学报， 2002， 22(2): 130—135]

[14] Wang D， Hao Y J， Wang K X，et al. The first Yangtze finless porpoise successfully born in captivity [J].Environmental Science & Pollution Research， 2005， 5(12):247—250

[15] Huang Y A. The first Yangtze finless porpoises living under semi-natural conditions was successfully born [J].Fisheries Science & Technology Information， 2015，42(5): 294—295 [黄有安. 国内首例围网小江豚成功诞生. 水产科技情报， 2015， 42(5): 294—295]

[16] Tao C H， Chen Y F， Xu M，et al. Pathological anatomy and analysis of death causes for a strand Chinese white dolphin in Xiaodeng waters [J].Journal of Applied Oceanography， 2016， 35(1): 102—106 [陶翠花， 陈月妃，许敏， 等. 小嶝水域一头搁浅中华白海豚的病理解剖及死因分析. 应用海洋学学报， 2016， 35(1): 102—106]

[17] Rong D， Wu Q， Xu M，et al. Prevalence， virulence genes，antimicrobial susceptibility， and genetic diversity of staphylococcus aureus from retail aquatic products in China[J].Frontiers in Microbiology， 2017， 20(8): 714， doi:10.3389/fmicb00714.eCollection2017.90806

[18] Lowy F D.Staphylococcus aureusinfections [J].New England Journal of Medicine， 1998， 339(8): 520—532

[19] Murray R J. Recognition and management ofStaphylococcus aureustoxinmediated disease [J].Internal Medicine Journal， 2005， 35(Suppl. 2): S106—S119

[20] David M Z， Daum R S. Community-associated methicillin-resistantStaphylococcus aureus: epidemiology and clinical consequences of an emerging epidemic [J].Clinical Microbiology Reviews， 2010， 23(3): 616—687

[21] Foster T J， Geoghegan J A， Ganesh V K，et al. Adhesion，invasion and evasion: the many functions of the surface proteins of Staphylococcus aureus [J].Nature Reviews Microbiology， 2014， 12(1): 49—62

[22] Medway W， Schryver H F. Respiratory problems in captive small cetaceans [J].Journal of the American Veterinary Medical Association， 1973， 163(6): 571—573

[23] Buck J D， Spotte S. Microbiology of captive whitebeaked dolphins (Lagenorhynchus albirostris) with comments on epizootics [J].Zoo Biology， 1986， 5(4):321—329

[24] Corbellini L G， Pescador C A， Frantz F J，et al. Staphylococcus spp. abortion: skin lesions caused byStaphylococcus aureusinfection in an aborted bovine-fetus [J].Veterinary Research Communications， 2006， 30(7): 717—721

[25] Jin H Y， Zhao F X. Bacterial infection in an irrawaddy dolphin (Orcaella brevirostris) [J].Journal of Zoo andWildlife Medicine， 2013， 44(1): 156—158

[26] Venn-Watson S， Daniels R， Smith C. Thirty year retrospective evaluation of pneumonia in a bottlenose dolphinTursiops truncatuspopulation [J].Diseases of Aquatic Organisms， 2012， 99(3): 237—342

[27] Han N N， Liu W J， Geng W G，et al. Isolation， identification of a pathogenicMorganella morganiifrom ornamental koi (Cyprinus carpio koi) [J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine， 2013， 35(9): 729—732[韩娜娜， 刘万建， 耿伟光， 等. 锦鲤摩氏摩根氏菌的分离鉴定与药敏性研究. 中国预防兽医学报， 2013， 35(9):729—732]

[28] Li R W， Zeng L B， Zhang H，et al. Isolation and identification ofMorganella morganiifrom diseased giant salamanders [J].Animal Husbandry & Veterinary Medicine，2014， 44(3): 28—32 [李瑞伟， 曾令兵， 张辉， 等. 患病大鲵摩氏摩根菌的分离与鉴定. 畜牧与兽医， 2014， 44(3):28—32]

[29] Lan Y， Hu X C， Lü A J， Ai-Jun，et al. Isolation， Identification and antibiotic sensitivity test ofMorganella mor-ganiifromMauremys mutica[J].Acta Hydrobiologica Sinica， 2014， 44(3): 1173—1178 [兰云， 胡秀彩， 吕爱军，等. 黄喉拟水龟摩氏摩根菌的分离鉴定及药敏试验. 水生生物学报， 2014， 44(3): 1173—1178]

[30] Thurman G D， Downes S J， Fothergill M B，et al. Diagnosis and successful treatment of subacute erysipelas in a captive dolphin [J].Journal of the South African Veterinary Association， 1983， 54(3): 193—200

[31] Liu Z G， Dong J H， Li L，et al. Treatment of acute infection withPesudomonas aeruginosaonTursiops truncatus[J].Journal of Fishery Sciences of China， 2000，7(2): 123—125 [刘振国， 董金海， 李鲁， 等. 宽吻海豚急性铜绿假单胞菌感染的治疗研究. 中国水产科学， 2000，7(2): 123—125]

[32] Cassle S E， Jensen E D， Smith CR，et al. Diagnosis and successful treatment of a lung abscess associated with Brucella species infection in a bottlenose dolphin (Tursiops truncatus) [J].Journal of Zoo & Wildlife Medicine Official Publication of the American Association of Zoo Veterinarians， 2013， 44(2): 495—499