丁酸梭菌对断奶仔猪血清生化指标、抗氧化能力和肠道菌群的影响

郑有秀，王超，姚静宜，卢建军*

（1.浙江大学动物科学学院，浙江省饲料与动物营养重点实验室/农业部（华东）动物营养与饲料重点实验室/浙江大学动物分子营养学教育部重点实验室，杭州310058；2.南京农业大学动物科技学院，南京210095）

断奶是养猪业生产中的必经环节。在断奶过程中，仔猪面临营养、生理、环境、微生物和免疫应激，易出现胃肠道功能紊乱[1]，采食量降低[2]，患病率和腹泻率提高[1]，小肠绒毛萎缩，影响营养物质的消化和吸收[3]。研究发现，益生菌具有刺激肠道有益菌的增殖，防止病原菌在肠道定殖，增强消化能力，降低肠道pH，改善肠道黏膜免疫的功能[4-5]，在调控肠道微生物区系，改善肠道健康，提高生产性能和保障动物福利等方面发挥重要作用[6]。有研究表明，在断奶仔猪饲粮中添加益生菌能有效缓解断奶应激和断奶后的生产性能下降[7]。因此，对益生菌的研究也逐渐受到研究人员和养殖从业者的关注。

丁酸梭菌，又名酪酸梭菌，是一种益生菌活菌制剂，革兰氏阳性厌氧菌，具有芽孢结构，抗逆性强，是人和动物肠道中的一种正常肠道菌，目前广泛应用于医疗与保健行业[8]。在临床上主要用于治疗溃疡性结肠炎、新生儿母乳性黄疸和婴幼儿病毒性腹泻，辅助治疗新生儿手足口病，同时对结肠有保护作用，能预防结直肠癌。在畜牧行业，欧盟在2003年批准丁酸梭菌作为饲料添加剂应用于肉鸡和断奶仔猪生产，我国农业部于2009年7月批准丁酸梭菌微生物饲料添加剂的生产及使用。近年来也相继出现丁酸梭菌作为一种新型饲料添加剂，用以提高畜禽的生产性能，调节畜禽健康的报道[9-11]，但其作用效果不一，且作用机制尚不明确，需要进一步探究。本课题组前期研究发现，断奶仔猪饲粮添加适量丁酸梭菌能提高饲料利用率，增强机体免疫功能，降低腹泻率，在一定程度上缓解肠道屏障损伤。本试验通过研究丁酸梭菌对断奶仔猪血清生化指标、抗氧化能力和肠道菌群的影响，探索丁酸梭菌调节机体健康的作用效果与机制，以期为丁酸梭菌在生产中的实际应用提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

丁酸梭菌由湖北绿雪生物产业有限公司提供，活度为2.0×108CFU/g。

1.2 试验动物

（25±1）日龄“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪。

1.3 试验饲粮

试验饲粮为参照美国国家研究委员会（National Research Council,NRC）（2012）的标准需要配制而成的粉状全价饲料，其基础饲粮配方及营养水平见表1。

1.4 饲养试验

选取（25±1）日龄的健康“杜×长×大”三元杂交断奶仔猪360头，按照体质量相近[（6.24±0.32）kg]、公母各半的原则随机分为5组，每组4个重复，每个重复18头。各试验组置于同一保育舍的不同保育栏，使不同组仔猪的饲养环境差别最小。对照组饲喂基础饲粮，试验组分别饲喂添加250、500、1 000和2 000 mg/kg丁酸梭菌的试验饲粮，试验期30 d。每天7:00、14:00和21:00喂料，喂料量以料槽中有少量剩余为宜，全期自由采食与饮水，预防免疫和饲养管理按常规方法进行。

表1 基础饲粮组成及营养水平（干物质基础）Table1 Composition and nutrient levels of basal diets(dry matter basis)

1.5 样品采集与保存

试验结束当天禁食12 h，保障充足饮水。按照每组每个重复至少选择1头的原则，各组随机选取6头，总计30头仔猪，颈动脉放血致死，采集血液，静置，待血清析出后取上清液，3 500 r/min离心15 min，吸取上清液分装于1.5 mL的Eppendorf管中，置于-80℃冰箱中保存待测；分离肝并置于液氮中速冻，后转移至实验室-80℃冰箱保存待测；在无菌环境下剖开腹腔后用经乙醇消毒的棉线结扎盲肠一端，再用经乙醇消毒、灼烧灭菌的利剪从结扎处外缘剪下肠段，置于冰盒保存，立即送往实验室测定盲肠微生物菌群。

1.6 血清生化指标测定

按照血清生化指标测试盒内所附说明书操作，测定血清谷草转氨酶（glutamic oxaloacetic transaminase,GOT）、谷丙转氨酶（glutamic-pyruvic transaminase,GPT）、碱性磷酸酶（alkalinephosphatase,AKP）、总蛋白（total protein,TP）、白蛋白（albumin,ALB）和尿素氮（blood ureanitrogen,BUN）的含量。试剂盒均购于南京建成生物有限公司。

1.7 血清、肝抗氧化指标测定

按照抗氧化能力指标测试盒内所附说明书操作，测定血清和肝总抗氧化能力（total antioxidant capacity,T-AOC）、过氧化氢酶（catalase,CAT）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）和丙二醛（malonaldehyde,MDA）的含量。试剂盒均购于南京建成生物有限公司。

1.8 肠道菌群测定

1.8.1 稀释液的配制

采样当天进行肠道菌群的测定。在无菌操作台中，称取约0.5 g盲肠内容物，按m(内容物)∶V(无菌生理盐水)=1∶9稀释，充分振荡混匀，制备成1×10-1稀释液。吸取1×10-1稀释液500 μL，按照V(稀释液)∶V(无菌生理盐水)=1∶9进行10倍倍比稀释，获得1×10-2稀释液。采用同样的操作方法，依次获得1×10-3、1×10-4、1×10-5、1×10-6、1×10-7和1×10-8浓度的稀释液。

1.8.2 肠道菌选择培养与分离鉴定

吸取10μL适宜浓度梯度的稀释液，接种于选择性培养基上进行培养。培养基购于杭州百思生物技术有限公司，其配制与使用按照产品说明书操作。其中，肠道致病菌使用麦康凯培养基，37℃培养24 h后进行菌落计数，其中呈红色或粉红色的菌落记为大肠埃希菌；沙门菌使用HE培养基，37℃培养24 h后进行菌落计数；双歧杆菌使用TPY培养基，37℃厌氧培养48 h后进行菌落计数；乳酸杆菌使用MRS培养基，37℃厌氧培养48 h后进行菌落计数。

1.9 数据处理与分析

用Microsoft Excel 2003对试验数据进行初步整理，用SPSS 20.0统计软件进行单因素方差分析（one-way ANOVA），试验数据用“平均值±标准差”表示，各组间采用Turkey多重比较进行差异显著性检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果与分析

2.1 丁酸梭菌对断奶仔猪血清生化指标的影响

由表2可知，在断奶仔猪饲粮中添加丁酸梭菌有降低血清GOT和GPT含量的趋势，但未达到统计学上的显著水平（P＞0.05）。与对照组相比，试验组血清GOT含量分别降低了5.21%（P＞0.05）、7.66%（P＞0.05）、9.14%（P＞0.05）和 10.25%（P＞0.05）；GPT含量分别降低了 11.59%（P＞0.05）、18.90%（P＞0.05）、25.52%（P＞0.05）和25.49%（P＞0.05）。而血清碱性磷酸酶含量受饲粮因素的影响较小（P＞0.05）。

由表2可知，在断奶仔猪饲粮中添加丁酸梭菌能显著提高血清TP和ALB含量。与对照组相比，试验组血清TP含量分别提高了10.45%（P＞0.05）、17.64%（P＜0.05）、15.24%（P＜0.05）和17.54%（P＜0.05）；血清ALB含量分别提高了0.78%（P＞0.05）、3.80%（P＞0.05）、3.50%（P＞0.05）和5.52%（P＜0.05）。在本试验条件下，对照组BUN含量均低于对照组，但未达到统计学上的显著水平（P＞0.05）。

表2 丁酸梭菌对断奶仔猪血清生化指标的影响Table2 Effectsof Clostridiumbutyricum on serum biochemical indicesof weaned piglets

2.2 丁酸梭菌对断奶仔猪抗氧化能力的影响

由表3可知，在本试验条件下，在饲粮中添加丁酸梭菌能提高血清GSH-Px和SOD水平，降低MDA含量，但均未达到统计学上的显著水平（P＞0.05）。添加500 mg/kg丁酸梭菌组的肝T-AOC较对照组提高了13.04%（P＜0.05）。随着饲粮中丁酸梭菌添加量的增加，肝CAT含量呈增加的趋势，试验组肝CAT含量较对照组分别提高了1.86%（P＞0.05）、4.73%（P＞0.05）、7.63%（P＞0.05）和 6.50%（P＞0.05）。在饲粮中添加1 000 mg/kg丁酸梭菌组的血清CAT含量较对照组提高了65.87%（P＜0.05），但其他组间差异不显著。

2.3 丁酸梭菌对断奶仔猪肠道菌群的影响

试验结束后检测断奶仔猪盲肠微生物指标，结果如表4所示。与对照组相比，随着饲粮中丁酸梭菌添加量的增加，各试验组断奶仔猪盲肠乳酸杆菌和双歧杆菌数量均呈现先增后减的趋势，其中：在饲粮中添加500 mg/kg丁酸梭菌时，盲肠乳酸杆菌和双歧杆菌数量达到最高水平，但差异不显著（P＞0.05）；各试验组盲肠中的大肠埃希菌较对照组分别降低了15.15%（P＜0.05）、23.65%（P＜0.01）、23.18%（P＜0.01）和23.49%（P＜0.01）；盲肠沙门菌较对照组分别降低了 14.81%（P＜0.05）、17.99%（P＜0.01）、16.56%（P＜0.05）和14.17%（P＜0.05）。

表3 丁酸梭菌对断奶仔猪抗氧化能力的影响Table3 Effectsof Clostridiumbutyricum on antioxidant ability of weaned piglets

表4 丁酸梭菌对断奶仔猪盲肠菌群的影响Table4 Effects of Clostridium butyricum on cecal microbiota of weaned piglets lg(CFU/g)

3 讨论

3.1 丁酸梭菌添加剂对断奶仔猪血清生化指标的影响

血液是动物机体的重要组成成分，具有运输、缓冲、防御和维持内环境稳定的功能，其组分与机体的生理状态密切相关。血清生化指标包括血液中的酶和蛋白质等，在免疫调节、营养代谢和生长发育等方面发挥重要作用，能在一定程度上反映动物的生产性能和健康状况，现已应用于动物生产、营养调控、疾病诊断和动物遗传育种中[12]。

GOT和GPT是广泛存在于动物组织中的2种氨基转移酶，在非必需氨基酸的合成和代谢过程中发挥重要作用[13]。在正常范围内，血清GOT和GPT含量的升高有利于蛋白质的合成[14]，可影响生猪断奶质量、日增质量和日瘦肉量等生产性能指标[15]。GOT和GPT在肝中大量存在，当动物机体处于应激状态或细胞受损时，细胞膜通透性增加，细胞质和线粒体内的酶溢出细胞进入血液，会引发血液酶活性病理性升高。因此，GOT和GPT含量也可作为衡量肝损伤的重要指标[16]。本试验发现，随着饲粮中丁酸梭菌含量的增加，断奶仔猪的血清GOT和GPT含量均有降低的趋势，这说明在饲粮中添加丁酸梭菌有利于改善断奶对仔猪肝应激的影响，该结果与李莉等[17]的研究一致。AKP是一种能催化磷酸基团转移和磷酸单酯水解的非特异性磷酸水解酶，对动物生长具有重要意义，但是其与日增质量和日瘦肉量等生产性能指标的相关性（正相关/负相关）尚无一致的定论[15]，具体机制有待进一步探究。在本试验中断奶仔猪的血清AKP含量无显著差异，这与代兵[18]的研究结果相似。

血清TP、ALB和BUN的含量反映了机体蛋白质的吸收和代谢状况[19]。血清TP是各种蛋白的复杂混合物，由ALB和球蛋白组成。血清TP含量代表了饲粮中能够被畜禽利用的蛋白质营养水平以及畜禽对蛋白质的消化和吸收程度[20]，血清ALB是衡量动物蛋白质需要的敏感标志[21]。BUN是蛋白质分解代谢的最终产物，血清BUN的含量直接反映了机体的营养状况和蛋白质代谢水平[22]，血清BUN含量越低，表明机体的BUN沉积量越多，即能够有效地将尿素氮转化合成机体蛋白质，促进动物机体生长[23]。本试验结果显示，在饲粮中添加500 mg/kg丁酸梭菌即可显著提高断奶仔猪血清TP含量，添加2 000 mg/kg丁酸梭菌时血清ALB含量显著提高。随着饲粮中丁酸梭菌含量的增加，血清BUN含量有下降的趋势，这与金三俊等[23]的研究结果相似。前期研究发现，与对照组相比，添加250 mg/kg丁酸梭菌组的平均日增质量差异不显著，其平均日采食量却显著降低，料质量比降低了12.78%（P＞0.05）。本试验结果显示，丁酸梭菌可提高断奶仔猪血清TP水平，提示丁酸梭菌可能是通过增强机体蛋白质代谢来提高生长性能。笔者分析，其作用机制有二：一方面，丁酸梭菌可抑制肠道有害微生物的增殖，以减少其对营养物质的消耗，提高蛋白质的利用率；另一方面，丁酸梭菌能产生多种消化酶和益生物质，提高蛋白质利用率，使血清中蛋白质含量维持在较高水平。

3.2 丁酸梭菌添加剂对断奶仔猪抗氧化性能的影响

活性氧（reactive oxygen,ROS）是一类氧的单电子还原产物，主要包括超氧化物（）、羟基自由基（—OH）和过氧化氢（H2O2）[24]。氧自由基是动物的新陈代谢产物，在正常情况下可被抗氧化系统清除，而在特殊情况下，机体产生过量的自由基则会引起氧化损伤。在断奶过程中，消化吸收功能降低、肠道菌群失调和神经内分泌异常变化等可能是早期断奶动物氧化应激产生的主要原因[25]，此时机体产生的自由基超过自身抗氧化的清除能力，导致氧化损伤加剧，免疫性能和抗氧化能力下降[26-27]。SOD和GSH-Px是反映抗氧化能力的重要指标[28]。SOD可催化高活性的超氧阴离子（）转化成低活性的H2O2，减少对机体的损伤；GSH-Px的主要作用是清除脂质过氧化物，能在CAT含量很低时代替CAT清除H2O2。由此可见，各种抗氧化酶之间具有协同作用，进而避免生物膜发生自由基连锁反应，防止膜脂质过氧化，保护细胞免受氧化损伤。MDA是脂质过氧化的产物，可作为交联剂使细胞发生交联而失去活性，导致细胞变性和坏死[29]，其水平能反映机体受氧自由基介导的脂质过氧化程度。罗振等[28]研究发现，在饲粮中添加由乳酸杆菌、枯草芽孢杆菌、丁酸梭菌和酵母菌等发酵产生的微生物源性抗氧化剂能显著提高仔猪血清SOD和GSH-Px活性，显著降低MDA含量，本试验结果也佐证了这一结论。在本试验饲粮中添加丁酸梭菌能提高血清SOD和GSH-Px水平，降低MDA含量，但未达到显著水平。笔者分析，罗振等[28]用微生物源性抗氧化剂中包含的B族维生素在提高仔猪抗氧化能力方面发挥了一定作用，而在本试验中，丁酸梭菌代谢所产生的B族维生素水平低于微生物源性抗氧化剂提供的水平，因此，在饲粮中添加丁酸梭菌的仔猪抗氧化能力虽有提高的趋势，但未达到显著水平。CAT也属于生物体内重要的活性氧防御系统，具有清除机体活性自由基的能力[30]。本试验结果显示，试验组血清和肝CAT水平均高于对照组，在饲粮中添加1 000 mg/kg丁酸梭菌时血清CAT含量达到差异显著水平，提示在饲粮中添加丁酸梭菌可提高断奶仔猪清除H2O2的能力。T-AOC是机体抗氧化系统的综合性评价指标。前人研究发现，在饲粮中添加丁酸梭菌能显著提高动物机体T-AOC水平或有提高T-AOC水平的趋势[18,31-32]，本文的研究结果与其一致。

3.3 丁酸梭菌添加剂对断奶仔猪肠道菌群的影响

初生仔猪胃肠道为无菌环境，其后通过接触源自外界以及母体的各种微生物，逐渐形成一个复杂的微生态环境，在营养物质代谢、阻止病原菌入侵和调节机体免疫等方面发挥重要作用[33-34]。丁酸梭菌是一种肠道正常菌，体内和体外试验均证明，丁酸梭菌能促进有益菌繁殖，抑制有害菌增殖，减小有害菌产生的毒素对肠道微生态平衡的破坏作用[35-37]。刘婷婷等[38]报道称，丁酸梭菌均具有一定的促进双歧杆菌和乳酸菌生长、抑制大肠埃希菌生长的作用；王腾浩[39]研究发现，丁酸梭菌ZJU F1可以提高盲肠内容物中乳杆菌属的比例，使菌群结构分布更加优化，本试验也得到与之相似的结果。

我们前期研究发现，试验组仔猪腹泻率显著低于对照组。本试验结果则显示，在饲粮中添加丁酸梭菌能显著降低大肠埃希菌和沙门菌的数量，提示丁酸梭菌可通过抑制有害菌的增殖，调节肠道健康，降低腹泻率。丁酸梭菌抑制有害菌增殖的原因可能有：丁酸梭菌产生的短链脂肪酸能降低肠道pH，抑制肠道耐酸性较差的有害菌附着和繁殖；丁酸梭菌能够定殖于肠道，占据定殖位点，抑制有害菌定殖；外源性丁酸梭菌竞争性利用营养物质，在一定程度上对有害菌的增殖有抑制作用。丁酸梭菌有增加盲肠乳酸菌、双歧杆菌的趋势，但与对照组间差异不显著，这可能是因为丁酸梭菌代谢产生短链脂肪酸，为耐酸菌种提供酸性环境，有利于乳酸菌、双歧杆菌等耐酸菌的生长，但也与其竞争营养物质，限制其进一步增殖。

4 结论

4.1 饲粮中添加500 mg/kg丁酸梭菌可提高断奶仔猪血清的总蛋白含量，促进蛋白质代谢；也可提高肝的总抗氧化能力，缓解氧化应激。

4.2 在饲粮中添加250 mg/kg丁酸梭菌即可有效抑制有害菌的增殖，调节机体健康。

4.3 综合各项指标，在25～55日龄断奶仔猪饲粮中丁酸梭菌添加量以500 mg/kg为宜。

参考文献(References):

[1] LALLÈS J P.Nutrition and gut health of the young pig around weaning:What news?Archiva Zootechnica,2008,11(1):5-15.

[2] LALLÈS J P,BOUDRY G,FAVIER C,et al.Gut function and dysfunction in young pigs:Physiology.Animal Research,2004,53(4):301-316.

[3]MONTAGNE L,BOUDRY G,FAVIER C,et al.Main intestinal markers associated with the changes in gut architecture and function in piglets after weaning.British Journal of Nutrition,2007,97(1):45-57.

[4] CHOCT M.Managing gut health through nutrition.British Poultry Science,2009,50(1):9-15.

[5]DE LANGE C F M,PLUSKE J,GONG J,et al.Strategic use of feed ingredients and feed additives to stimulate gut health and development in young pigs.Livestock Science,2010,134(1):124-134.

[6]TUOHY K M,ROUZAUD G C M,BRÜCK W M,et al.Modulation of the human gut microflora towards improved health using prebiotics-assessment of efficacy.Current Pharmaceutical Design,2005,11(1):75-90.

[7]PATIL A K，KUMAR S,VERMA A K,et al.Probiotics as feed additives in weaned pigs:A review.Livestock Research International,2015,3(2):31-39.

[8] 熊祖明,袁杰利.酪酸梭菌的研究与应用进展.中国微生态学杂志,2011,23(12):1143-1145.

XIONG Z M,YUAN J L.Progress on the studies and application of Clostridium butyricum.Chinese Journal of Microecology,2011,23(12):1143-1145.(in Chinese with English abstract)

[9] ZHANGL,CAOGT,ZENGX F,et al.Effects of Clostridium butyricum on growth performance,immune function,and cecal microflorain broiler chickenschallenged with Escherichia coli K88.Poultry Science,2014,93(1):46-53.

[10]肖雪梅,黄晶.丁酸钠、丁酸梭菌在断奶仔猪生产中的应用.黑龙江畜牧兽医,2013(5):70-72.

XIAO X M,HUANG J.Application of sodium butyrate and Clostridium butyricum in the production of weaned piglets.Heilongjiang Animal Science and Veterinary Medicine,2013(5):70-72.(in Chinese)

[11]杜云平,周庆丰,郑泽铭,等.日粮中添加丁酸梭菌对肉鸡生产性能的影响.广东饲料,2009(11):22-23.

DU Y P,ZHOU Q F,ZHENG Z M,et al.Effects of dietary supplement of Clostridium butyricum on growth performance of broiler.Guangdong Feed,2009(11):22-23.(in Chinese)

[12]周玉香,吕玉玲,王洁,等.血液生化指标在动物生产与营养调控研究中的应用概况.畜牧与饲料科学,2012,33(5/6):72-73.

ZHOU Y X,LÜY L,WANG J,et al.Application survey of blood biochemical indices in the studies of animal production and nutritional regulation.Animal Husbandry and Feed Science,2012,33(5/6):72-73.(in Chinese with English abstract)

[13]THORNTON SA,CORZO A,PHARR G T,et al.Valine requirements for immune and growth responses in broilers from 3 to 6 weeks of age.British Poultry Science,2006,47(2):190-199.

[14]吴伟,王一凡,李晓翠,等.低聚果糖、芽孢杆菌制剂对断奶仔猪生长性能及免疫功能的影响.中国畜牧兽医,2013,39(6):109-112.

WU W,WANG Y F,LI X C,et al.Effect of fructooligosaccharides(FOS),Bacillus preparation on growth performance,immune function in weaning piglets.China Animal Husbandry&Veterinary Medicine,2013,39(6):109-112.(in Chinesewith English abstract)

[15]杨华,傅衍,陈安国.猪血液生化指标与生产性能的关系.国外畜牧科技,2001,28(1):34-37.

YANG H,FU Y,CHEN A G.Relationship between blood biochemical indices and production performance in pigs.Animal Science Abroad,2001,28(1):34-37.(in Chinese with English abstract)

[16]RAMASWAMY M,THANGAVEL P,PANNEER SELVAM N.Glutamic oxaloacetic transaminase(GOT)and glutamic pyruvic transaminase(GPT)enzyme activities in different tissues of Sarotherodon mossambicus(Peters)exposed to a carbamate pesticide,carbaryl.Pest Management Science,2015,55(12):1217-1221.

[17]李莉,刘浩,李兴华,等.不同丁酸梭状芽孢杆菌添加水平对断奶仔猪血清生化指标的影响.动物医学进展,2013,34(9):81-84.

LI L,LIU H,LI X H,et al.Effect of different adding levels Clostridium butyricum on serum biochemical indexes of weaned piglets.Progress in Veterinary Medicine,2013,34(9):81-84.(in Chinesewith English abstract)

[18]代兵.断奶仔猪肠道健康的营养调节剂的应用.南京:南京农业大学,2011:67-90.

DAIB.Nutritional regulatory technology for intestinal health in weaning piglets in China.Nanjing:Nanjing Agricultural University,2011:67-90.(in Chinesewith English abstract)

[19]ZHOU H,WANG C Z,YE J Z,et al.Effects of dietary supplementation of fermented Ginkgo biloba L.residues on growth performance,nutrient digestibility,serum biochemical parameters and immune function in weaned piglets.Animal Science Journal,2015,86(8):790-799.

[20]张庆坤,张宏福,秦加华,等.不同日龄断奶对仔猪血清五种酶活性影响的研究.黑龙江畜牧兽医,2007(4):38-40.

ZHANG Q K,ZHANG H F,QIN J H,et al.Effects of different weaning ages on five serum enzyme activities in piglets.Heilongjiang Animal Science and Veterinary Medicine,2007(4):38-40.(in Chinese)

[21]YOUNGV R,MARCHINIJS,CORTIELLA J.Assessment of protein nutritional status.The Journal of Nutrition,1990,120(Suppl.11):1496-1502.

[22]刁慧,郑萍,余冰,等.苯甲酸对断奶仔猪生长性能、血清生化指标、养分消化率和空肠食糜消化酶活性的影响.动物营养学报,2013,25(4):768-777.

DIAO H,ZHENG P,YU B,et al.Effect of benzoic acid on growth performance,serum biochemical parameters,nutrient digestibility and digestive enzyme activities of jejunal digesta in weaned piglets.Chinese Journal of Animal Nutrition,2013,25(4):768-777.(in Chinesewith English abstract)

[23]金三俊,董佳琦,任红立,等.复合微生态制剂对断奶仔猪生长性能、血清生化和免疫指标及粪便中挥发性脂肪酸含量的影响.动物营养学报,2017,29(12):4477-4484.

JIN S J,DONG J Q,REN H L,et al.Effect of compound probiotics on performance,serum biochemical and immune indices and volatile fatty acid contents in feces of weaned piglets.Chinese Journal of Animal Nutrition,2017,29(12):4477-4484.(in Chinesewith English abstract)

[24]LIU Y,FISKUM G,SCHUBERT D.Generation of reactive oxygen species by the mitochondrial electron transport chain.Journal of Neurochemistry,2002,80(5):780-787.

[25]阳坦,孙志洪,李晓敏.在早期断奶过程中氧化应激的产生机制及其影响.动物营养学报,2013,25(4):705-714.

YANG T,SUN Z H,LI X M.Generation mechanism of oxidative stress during early weaning and its impacts.Chinese Journal of Animal Nutrition,2013,25(4):705-714.(in Chinese with English abstract)

[26]ZHU L H,ZHAO K L,CHEN X L,et al.Impact of weaning and an antioxidant blend on intestinal barrier function and antioxidant status in pigs.Journal of Animal Science,2012,90(8):2581-2589.

[27]YIN J,WU M M,XIAO H,et al.Development of an antioxidant system after early weaning in piglets.Journal of Animal Science,2014,92(2):612-620.

[28]罗振,罗文丽,赵森,等.微生物源性抗氧化剂对断奶仔猪生长性能和抗氧化能力的影响.饲料工业,2017,38(3):15-17.

LUO Z,LUO W L,ZHAO S,et al.The effects of microderived antioxidants on the growth performance and antioxidant capacity of weaned piglets.Feed Industry,2017,38(3):15-17.(in Chinese with English abstract)

[29]JURÁNEK I,BEZEK S.Controversy of free radical hypothesis:Reactive oxygen species-cause or consequence of tissue injury?General Physiology and Biophysics,2005,24(3):263-278.

[30]方锐,左建军,凌宝明,等.日粮中添加过氧化氢酶对断奶仔猪生长性能、肠道形态及抗氧化性能的影响.中国饲料,2017(1):23-27.

FANGR,ZUOJJ,LINGBM,et al.Effectsof catalaseenzyme(CAT)on growth performance,intestinal morphology,and antioxidantcapacity of weaned piglets.China Feed,2017(1):23-27.(in Chinesewith English abstract)

[31]贾聪慧,杨彩梅,曾新福,等.丁酸梭菌对肉鸡生长性能、抗氧化能力、免疫功能和血清生化指标的影响.动物营养学报,2016,28(3):908-915.

JIA C H,YANG C M,ZENG X F,et al.Effects of Clostridium butyricum on growth performance,antioxidant capacity, immune function and serum biochemical parameters of broilers.Chinese Journal of Animal Nutrition,2016,28(3):908-915.(in Chinesewith English abstract)

[32]邓斐月.丁酸梭菌与谷氨酰胺对断奶仔猪生长性能的影响及其机制研究.杭州:浙江大学,2010:29-39.

DENGFY.Effectsof Clostridiumbutyricum and glutamineon the growth performance of weanling piglets and the mechanism.Hangzhou:Zhejiang University,2010:29-39.(in Chinesewith English abstract)

[33]孙笑非,潘宝海,孙冬岩.肠道菌群在机体健康中的作用及其抗生素影响.饲料研究,2013(8):48-50.

SUN X F,PAN B H,SUN DY.Therole of intestinal florain body health and its effect on antibiotics.Feed Research,2013(8):48-50.（in Chinese）

[34]夏耀耀,任文凯,黄瑞林,等.仔猪肠道微生物研究进展.中国实验动物学报,2017,25(6):681-688.

XIA Y Y,REN W K,HUANG R L,et al.Current understanding of the intestinal microbiota of piglets.Acta Laboratorium Animalis Scientia Sinica,2017,25(6):681-688.(in Chinese with English abstact)

[35]曹广添,刘婷婷,周琳,等.丁酸梭菌对致病菌和有益菌的体外作用效果研究.中国饲料,2012(4):16-19.

CAO G T,LIU T T,ZHOU L,et al.Effects of Clostridium butyricum on pathogen and beneficial bacteria in vitro.China Feed,2012(4):16-19.(in Chinese with English abstract)

[36]YANG C M,CAO G T,FERKET P R,et al.Effects of probiotic,Clostridium butyricum,on growth performance,immune function,and cecal microflora in broiler chickens.Poultry Science,2012,91(9):2121-2129.

[37]TAKAHASHIM,TAGUCHIH,YAMAGUCHIH,et al.The effect of probiotic treatment with Clostridium butyricum on enterohemorrhagic Escherichia coli O157:H7 infection in mice.FEMSImmunology&Medical Microbiology,2004,41(3):219-226.

[38]刘婷婷,张帅,邓斐月,等.谷氨酰胺与丁酸梭菌对断奶仔猪生长性能、免疫功能、小肠形态和肠道菌群的影响.动物营养学报,2011,23(6):998-1005.

LIUTT,ZHANGS,DENGFY,et al.Effectsof glutamine and Clostridium butyricum on the growth performance,immune function,small intestinal morphology and microflora in weanling piglets.Chinese Journal of Animal Nutrition,2011,23(6):998-1005.(in Chinese with English abstract)

[39]王腾浩.新型丁酸梭菌筛选及其对断奶仔猪生长性能和肠道功能影响的研究.杭州:浙江大学,2015:87-97.

WANG T H.Screening of a novel Clostridium butyricum and its administration on growth performance and gut function in weaning piglets.Hangzhou:Zhejiang University,2015:87-97.(in Chinese with English abstract)