坤泰胶囊联合克罗米芬治疗排卵障碍性不孕症疗效观察

时建荣，张瑞琪，穆艳丽

(济源市中医院妇科，河南 济源 459000)

不孕症是指婚后夫妇有正常的性生活，且未采取避孕措施，同居2 a而未受孕。排卵障碍是导致女性不孕的主要原因，包括持续性无排卵和有排卵但黄体功能不足2种类型[1]。目前，排卵障碍性不孕症的临床治疗措施主要包括促排卵、加强黄体功能和超声监测排卵等。促排卵治疗以增加优势卵泡数和促进卵子排出为主要目的。坤泰胶囊作为一种纯中药制剂，具有滋阴养血、补肾益肝、交通心肾等功效[2]。研究显示，坤泰胶囊可以改善卵巢功能和内源性调节性激素水平[3]。本研究旨在探讨坤泰胶囊联合克罗米芬治疗排卵障碍性不孕症的疗效及作用机制。

1 资料与方法

1.1一般资料选择2016年5月至2017年5月济源市中医院收治的排卵障碍性不孕症患者100例，均符合排卵障碍性不孕症诊断标准[4]，并排除因免疫因素、生殖系统器质性病变及男方因素导致的不孕患者。根据治疗方法将患者分为观察组和对照组，每组50例。对照组患者年龄26～38岁(32.5±4.6)岁，不孕时间3～15(4.6±1.7)a；观察组患者年龄25～36(33.7±4.2)岁，不孕时间4～13(4.7±1.9)a；2组患者的年龄及不孕时间比较差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。本研究通过医院伦理委员会审核批准，所有患者均签订知情同意书。

1.2治疗方法2组患者从月经第5天开始给予克罗米芬(广州康和药业有限公司，国药准字H44021970)100 mg，口服，每日1次，连用5 d。观察组患者从月经第5天开始同时给予坤泰胶囊(贵阳新天药业股份有限公司，国药准字Z20000083)4粒，口服，每日3次；至超声检查显示卵泡成熟后停止用药。

1.3观察指标

1.3.1卵泡大小和数量、排卵率及子宫内膜厚度和类型分别于治疗前3 d、药物治疗第10天通过超声测定卵泡大小和数量、子宫内膜厚度和类型，同时观察卵泡是否消失，计算排卵率，排卵率=排卵人数/总人数×100%。

1.3.2子宫内膜组织中白血病抑制因子(leukemiainhibitoryfactor，LIF)、表皮生长因子(epidermalgrowthfactor，EGF)和胰岛素样生长因子-1(insulin-likegrowthfactor-1，IGF-1)蛋白表达检测分别于治疗前3 d、药物治疗第10天采集患者子宫内膜组织，固定、脱水、透明、浸蜡、包埋，制备石蜡标本。采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶法检测子宫内膜组织中EGF、IGF-1及LIF蛋白表达。石蜡标本进行脱蜡、抗原热修复，加入正常兔血清封闭内源性生物素后进行磷酸盐缓冲液清洗，滴加生物素标记的二抗(北京中杉金桥生物技术有限公司)，二氨基联苯胺(diaminobenzidine，DAB)显色，苏木精(北京中杉金桥生物技术有限公司)复染，梯度乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封片，显微镜(日本Olympus 公司)下观察。结果判定：LIF、EGF和IGF-1蛋白阳性表达为细胞质内出现棕黄色颗粒。每张切片随意挑选5个高倍视野(400倍)，应用全自动图像分析系统(上海山富科学仪器有限公司)进行分析处理，测定子宫内膜组织中LIF、EGF和IGF-1蛋白表达的吸光度值，取均值。

2 结果

2.12组患者成熟卵泡数、子宫内膜厚度、子宫内膜类型及排卵率比较治疗前2组患者成熟卵泡数及子宫内膜厚度比较差异均无统计学意义(t=0.345、0.287，P>0.05)；与治疗前比较，治疗后2组患者成熟卵泡数和子宫内膜厚度显著增加，差异有统计学意义(t=3.564、4.006，P<0.05)；治疗后观察组患者成熟卵泡数和子宫内膜厚度显著大于对照组，差异有统计学意义(t=4.352、4.576，P<0.05)；见表1。治疗前，对照组患者子宫内膜A、B、C型分别为11、15、24例，观察组患者子宫内膜A、B、C型分别为12、13、25例；治疗后，对照组患者子宫内膜A、B、C型分别为16、21、13例，观察组患者子宫内膜A、B、C型分别为26、17、7例；治疗前2组患者子宫内膜类型比较差异无统计学意义(χ2=1.212，P>0.05)；治疗后2组患者子宫内膜类型显著优于治疗前(χ2=6.643、7.221，P<0.05)，且观察组患者子宫内膜类型显著优于对照组(χ2=5.763，P<0.05)。治疗前对照组和观察组患者排卵率分别为30.0%(15/50)、28.0%(14/50)，治疗后分别为44.0%(22/50)、76.0%(38/50)；治疗前2组患者排卵率比较差异无统计学意义(χ2=0.225，P>0.05)；治疗后2组患者排卵率显著高于治疗前(χ2=17.231、14.456，P<0.05)，且观察组患者治疗后排卵率显著高于对照组(χ2=8.125，P<0.05)。

表12组患者成熟卵泡数及子宫内膜厚度比较

组别n成熟卵泡数/个内膜厚度/mm对照组50 治疗前1．6±0．86．8±1．7 治疗后2．2±0．5a8．1±1．2a观察组50 治疗前1．5±1．16．7±1．9 治疗后4．1±1．1ab10．8±0．9ab

注：与治疗前比较aP<0.05；与对照组比较bP<0.05。

2.22组患者子宫内膜组织中LIF、EGF及IGF-1表达比较结果见表2。治疗前2组患者子宫内膜组织中LIF、EGF及IGF-1蛋白表达比较差异均无统计学意义(t=0.023、0.978、0.053，P>0.05)；治疗后2组患者子宫内膜组织中LIF、EGF及IGF-1蛋白表达显著高于治疗前(t=3.784、4.675、4.273，P<0.05)，且观察组患者子宫内膜组织中LIF、EGF及IGF-1蛋白表达显著高于对照组(t=4.009、4.287、5.009，P<0.05)。

表22组患者子宫内膜组织中LIF、EGF及IGF-1表达比较

组别nLIFEGFIGF⁃1对照组50 治疗前62．45±0．6987．02±11．2789．21±11．22 治疗后70．53±1．87a111．12±10．62a101．47±5．67a观察组50 治疗前63．51±0．7884．12±12．3587．39±15．36 治疗后92．03±1．91ab137．93±1．67ab120．29±4．61ab

注：与治疗前比较aP<0.05；与对照组比较bP<0.05。

3 讨论

不孕症是妇科常见病，引起女性不孕的原因比较复杂，主要与排卵障碍、慢性炎症、子宫内膜异位症及免疫因素等有关[5]。排卵障碍是导致不孕症的主要原因之一，近年来，排卵障碍性不孕症发病率呈上升趋势，已经成为影响女性生殖健康的重要问题。女性排卵障碍的原因有很多，内分泌紊乱、卵巢病变、饮食行为、体质量、月经周期变化及全身性疾病等均可引起排卵障碍[6]。在自然妊娠或辅助生育技术中，胚胎质量和子宫内膜容受性是妊娠成功的关键因素。通过超声检测子宫内膜厚度来评价子宫内膜容受性是目前最常用的方法。影响子宫内膜容受性的因素众多，包括子宫内膜厚度、子宫内膜类型等。子宫内膜厚度是预测妊娠结局的重要因子，适当厚度的子宫内膜是胚胎种植的必备条件，而子宫内膜过薄可导致胚胎种植率明显降低。子宫内膜类型包括A型、B型和C型，A型子宫内膜更适于受孕，其次为B型和C型[7]。

目前，对于排卵性障碍性不孕症患者主要采用药物促排卵治疗。克罗米芬是治疗排卵障碍性不孕症的首选药物，该药对雌激素有弱的激动与强的拮抗双重作用，刺激排卵可能是在下丘脑部位，首先拮抗占优势，通过竞争性占据下丘脑雌激素受体，干扰内源性雌激素的负反馈，促使黄体生成激素与促卵泡生成激素分泌增加，继之刺激卵泡生长，卵泡成熟后，雌激素释放量增加，通过正反馈激发排卵前促性腺激素的释放达峰值，促使排卵，进而增加受孕率。但是，研究发现，克罗米芬具有抗雌激素作用，一方面能够使宫颈黏液减少、变稠，造成精子通过宫颈时受到障碍；此外，还可能导致子宫内膜变薄而出现受精卵着床障碍[8-9]。坤泰胶囊作为一种促排卵的中药，由于其能够避免克罗米芬治疗过程中产生的不良反应，而越来越多地应用于治疗排卵障碍性不孕症[10]。坤泰胶囊是一种纯中药制剂，由熟黄连、地黄、黄芩、茯苓、白芍、阿胶六味中药制成，有滋阴养血、补肾益肝、交通心肾之功效，在协助生殖方面具有明显的优势。现代药理学研究表明，坤泰胶囊具有类雌激素作用，能够有效地调节患者的雌激素水平，改善卵巢功能，促进子宫内膜增生，增加胚胎着床成功率[11]。坤泰胶囊的促排卵效果与克罗米芬相比仍然存在一定的差距，但是二者联合应用不仅提高克罗米芬的促排卵作用，还能够降低克罗米芬对子宫内膜和宫颈黏液的不良影响。本研究结果显示，克罗米芬联合坤泰胶囊治疗排卵障碍性不孕症在改善成熟卵泡数、子宫内膜厚度、子宫内膜类型及排卵率方面均优于单独使用克罗米芬治疗。

研究显示，雌孕激素可以通过多种生长因子、细胞因子、黏附分子等调节子宫内膜的生长发育[12]。EGF可以通过内分泌、自分泌和旁分泌的方式作用于靶器官，调节人类和动物的组织器官的生长发育，其可以启动细胞分裂、增殖和分化，促使一些离子交换，促进细胞外基质形成等[13-14]。人类子宫内膜正常的周期变化中存在完善的IGF系统，通过直接或间接方式、自分泌或者旁分泌方式调节子宫内膜的增殖、生长、分化和凋亡。LIF是一类具有多种生物学功能的白细胞介素家族中的一个多性能细胞因子，在不同的组织中发挥着不同的生物学活性[15]。研究显示，LIF基因在促子宫内膜发育成熟囊胚着床后的生长发育过程中起重要作用[16]。本研究结果显示，克罗米芬联合坤泰胶囊能够显著提高LIF、EGF和IGF-1 蛋白表达，在促进子宫内膜增厚过程中起到了一定的作用。

综上所述，坤泰胶囊联合克罗米芬能够显著改善排卵障碍性不孕症患者的子宫内膜容受性，促进卵子发育，提高排卵率。

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