李文岗
摘要:目的:研究内蒙古西部地区的马铃薯晚疫病菌的交配型的分布情况,以及对3种常用杀菌剂的敏感性,找到防治病菌的办法。方法:选取2013-2016年三年间,内蒙古西部地区患有晚疫病的马铃薯80株,通过对对病株的杂交检测其交配型。结果:交配型为A1的有60株,占总数的75%;交配型为A2的有8株,占总数的10%;交配型为A1A2的有12株,占总数的15%。通过对对甲霜灵的敏感性检测,结果显示没有待测组没没有出现敏感植株,大部分马铃薯植株是高抗型植株;通过对霜霉威盐酸盐氟-吡菌胺敏感性的检测得出,患病植株大多数都是有较高的抗药性的。结论:烯酰吗啉和银法利对马铃薯晚疫病的治疗效果很好,通过实验的结果可知,马铃薯病株使用烯酰吗啉和银法利进行治疗,都取得了不错的效果,最重要的是交互抗性的情况不容易出现。
关键词:内蒙古西部地区 马铃薯晚疫病菌 晚疫病菌交配型 敏感性检测
众所周知,马铃薯在我国有很重要的地位,马铃薯被广泛种植在我国的各个地区。从古至今,粮食一直都是国家的民生大计。在我国,广阔的进行马铃薯的种植,我国的马铃薯种植面积是世界第二位。在全球范围内,马铃薯的以其广阔的种植区域,仅次于玉米,处于第二位。所以马铃薯是很重要的一种农作物。在我国的内蒙古地区,马铃薯通常种植在内蒙古的中部地区,一般分布在阴山沿麓等地方,是内蒙古地区重要的农作产物。但是由于致病疫霉菌引起的晚疫病严重影响了内蒙古地区的马铃薯产量,而且在农作物生产上没有研制出可以长期有效的抵抗这种病菌的马铃薯品种,所以在目前我国的马铃薯生产中,采取化学药剂的方法取得了很好的成果。
我国从上个世纪八十年代就研究出一种可以防治马铃薯晚疫病的PAFs药物,之后由于我国对于马铃薯的抗药性研究不够及时,所以缺少研究抗药性检测的资料与报告。在上个世纪九十年代初,我国引进国外最新的抗马铃薯晚疫病的药剂霜脲氰,开始在我国大部分地区使用,所以导致到目前为止我国大部分地区的使用这种药剂的时间在10年以上。
(一)一般资料
在上个世纪中期,在墨西哥首次爆发马铃薯晚疫病,之后未经发现并且传入美国,随后又通过美国传向欧洲,在全球引发了马铃薯危机。由于进行有性生殖对马铃薯来说是不可能的,所以在上个世纪六十年代之后很多国家相继出现两种不同的交配型,这些因素使晚疫病菌的遗传结构变得越来越复杂,对一般的化学药剂的抗性也在不断的增强,最后就造成了在全球不断爆发马铃薯危机。马铃薯晚疫病极具快速传递和破坏力,对马铃薯的产量有很大的影响,通过使用甲霜灵、精甲霜灵、嗯霜灵等杀菌剂对患有晚疫病菌的马铃薯植株进行治疗,而且通过使用发现对晚疫病菌的繁殖具有很强的控制能力,在对晚疫病菌的治疗和预防上的效果也很明显。所以在我国,才会大量的使用甲霜灵、精甲霜灵、嗯霜灵等杀菌剂去治疗马铃薯晚疫病。
内蒙古地区的马铃薯晚疫病菌的后代病菌具有多样性,但从整体层次来说,遗传多样性程度比国外的低。在自然界中,马铃薯一般情况下不可能自发主动的有性生殖,而这也造成了病菌群体遗传多样性程度较低。本次研究通过对内蒙古2013-2016年四年间患有马铃薯晚疫病植株的对比分析,对得到的晚疫病植株进行杂交,结果待测组没有出现A2交配型植株,这样的结果对晚疫病的交配型有研究价值。
(二)方法
将患有晚疫病的马铃薯植株切块后放入黑麦蔗糖琼脂培养基中进行培养,黑麦蔗糖琼脂是将60g黑麦加入400ml纯净水中,然后保持恒温在24度左右持续24小时,然后进行过滤后留下滤液,最后在滤液中加入10g琼脂小块和30g的蔗糖充分搅拌使其完全溶解,然后在无菌的环境中静置48小时即可。从内蒙古种植马铃薯各个不同地区随机选取80株感染了晚疫病菌的马铃薯植株,挑選具有代表特征的患病植株进行研究。首先将选取的植株进行分组研究,均放入准备好的培养基中进行培养。将A1配型植株与待测的患病植株进行杂交实验,如果杂交后代出现A2交配型,则证明待测植株是A2交配型;若A2与待测植株进行杂交结果出现A1交配型,则证明待测组为A1交配型;如果任意杂交均能出现A1A2交配型,则说明待测植株本身为A1A2交配型。严格进行实验,并对每个实验重复进行三次实验。
对于杀菌剂敏感程度的检测,主要是通过将三种不同的杀菌剂分别配制成培养液,将甲霜灵用高锰酸钾溶液配制成培养液,然后将培养液进行稀释,一般是按照1:9的培养液和水的比例进行稀释,然后充分搅拌融化,准备多组实验减少外界可能造成的误差,然后将患有晚疫病的马铃薯块茎放入培养液中进行培养观察,一般培养7-10天。通过观察实验组的菌落直径,并用统计学的方法进行统计菌落的直径。按照以上的办法,分别对三种不同的杀菌剂的效果进行研究分析,并统计结果。
(三)三种杀菌剂的抗性测试
通过采取随机抽取培养基上的菌落的方法,每次选取一个直径为6cm的菌落圈,不同浓度的甲霜灵药剂被分别加入,将没有加入药剂的一组和实验组对比,然后记录下在不同的浓度之下晚疫病菌的相对生长量。
(四)统计学分析
对数据的统计采用SPsSl7.O统计软件进行数据统计分析,数据用百分比图像来表示,用x2检验以及统计学显着性因素进行多元回归分析。
有一些菌株在含药的培养基上的生长速率,不会比对照组的生长速率快多少,可以看出甲霜灵会刺激晚疫病菌的生长,但所以的病株均对烯酰吗啉和银法利这两种杀菌剂的表现很敏感,最为关键的是未出现抗性。
使用甲霜灵、精甲霜灵、嗯霜灵等杀菌剂在农业上进行对马铃薯晚疫病的防治,通过使用发现杀菌剂可以有效的控制晚疫病菌的生长,对晚疫病菌的治疗效果很好。所以在我国,在农业上抵抗晚疫病菌一般使用甲霜灵、精甲霜灵、嗯霜灵等杀菌剂。
综上所述,通过使用银法利,发现防治效果非常明显,极大的提高了马铃薯的产量,而且银法利还对马铃薯的生长有帮助。目前我国,晚疫病菌对甲霜灵的抗药性很明显,所以使用烯酰吗啉等杀菌剂就成了唯一的办法。
[1]李本金,吕新,兰成忠,等.福建省致病疫霉交配型、甲霜灵敏感性及生理小种组成分析[J].植物保护学报,2014,(05).
[2]王文桥,马志强,张小风,等.致病疫霉抗药性、交配型和适合度[J].植物病理学报,2015,(03).
[3]袁善奎,刘西莉,刘亮,等.马铃薯晚疫病菌对烯酞吗琳的敏感性基线及其室内抗药突变体的研究[J].植物病理学报,2015,(06).
(作者单位:内蒙古自治区马铃薯繁育中心)