2013—2016年宁海县畜禽重大传染病免疫状况监测分析

王宗沛，汪审岳，姜俊保，卢　磊

(1.浙江省宁海县畜牧兽医局，浙江 宁波 315600； 2.宁波市振宁牧业有限公司，浙江 宁波 315600)

群体抗体水平监测是动物防疫工作的一个重要环节。通过检测畜禽体内的抗体水平，可及时评估重大动物疫病的免疫效果，防止重大动物疫病的发生与流行[1]。浙江省宁海县猪、牛、羊年出栏量分别为20.21万、0.15万、1.48万头，鸡、鸭年出栏量分别为171.89万、80.37万羽，是宁波市的畜牧业重点县。为监测该县畜禽(猪、牛、羊、鸡、鸭等)重大传染病的免疫效果，2013—2016年宁海县畜牧兽医局对当地饲养的畜禽，定期进行口蹄疫(foot and mouth disease，FMD)、猪瘟(classical swine fever，CSF)、猪繁殖与呼吸综合征(猪蓝耳病，porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS)、禽流感(avian influenza，AI)和新城疫(Newcastle disease，ND)等的抗体检测。现将各年份的检测结果进行比较、分析，以期为当地畜禽重大疫病的防控决策提供科学依据，并供同行参考。

1　材料与方法

1.1　被检血清与保存

从浙江省宁海县各畜禽养殖场(户)采集家畜和家禽血液，在采样场点的选择上兼顾种畜禽场、规模场和散养户。血液采集过程中严格实行无菌操作，杜绝污染，血清分离后置于-20 ℃冷冻保存。2013—2016年共收集4 086份猪血清、686份牛血清、1 065份羊血清、5 226份鸡血清、662份鸭血清。

1.2　强制免疫项目和检测项目

宁海县畜牧兽医局按照我国《中华人民共和国动物防疫法》、《国家中长期动物疫病防治规划(2012—2020年)》[2]和各年度的国家动物疫病强制免疫计划[3-5]要求，对当地养殖的畜禽，针对口蹄疫、猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、高致病性禽流感等4种动物疫病实行强制免疫，对鸡新城疫进行预防免疫。具体免疫项目和检测项目见表1。

1.3　检测依据及试剂来源

各抗体的检测及判定标准依照有关国家标准：O型口蹄疫病毒(FMDV)，检测依据GB/T 18935—2003[6]，检测方法为ELISA，试剂购自北京金诺百特科技有限公司；A型口蹄疫病毒，检测依据GB/T 18935—2003[6]，检测方法为酶联免疫吸附试验(ELISA)，试剂购自兰州畜医研究所；亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒，检测依据GB/T 18935—2003[6]，检测方法为ELISA，试剂购自兰州畜医研究所；猪瘟病毒(CSFV)，检测依据GB/T 16551—2008[7]，检测方法为正向间接血凝试验，试剂购自兰州畜医研究所；猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)，检测依据GB/T 18090—2008[8]，检测方法为ELISA，试剂购自北京爱德士元亨生物科技有限公司；H5N1亚型禽流感病毒，检测依据GB/T 18936—2003[9]，检测方法为血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验，试剂购自哈尔滨维科生物技术开发公司；H7亚型(H7N9)禽流感病毒，检测依据GB/T 18936—2003[9]，检测方法为血凝和血凝抑制试验，试剂购自哈尔滨维科生物技术开发公司；鸡新城疫病毒(NDV)，检测依据GB/T 16550—2008[10]，检测方法为血凝和血凝抑制试验，试剂购自青岛易邦生物工程有限公司。

表1畜禽强制免疫和检测项目

Table1Compulsory immunization and testing program for livestock and poultry

被检动物Animal强制免疫项目Compulsoryimmunization检测抗体项目Testedantibody猪SwineO型口蹄疫、猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征FMD-O,CSF,PRRSO型口蹄疫病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒FMDV-O,CSFV,PRRSV牛BovineO型、A型及亚Ⅰ型口蹄疫FMDtypesO,A,andAsiaⅠO型、A型及亚Ⅰ型口蹄疫病毒FMDVtypesO,A,andAsiaⅠ羊GoatO型及亚Ⅰ口蹄疫FMDtypesO,andAsiaⅠO型及亚Ⅰ口蹄疫病毒FMDVtypesO,andAsiaⅠ鸡ChickenH5N1亚型禽流感H5N1AIH5N1亚型禽流感病毒、H7N9亚型禽流感病毒、新城疫病毒H5N1,H7N9,NDV鸭DuckH5N1亚型禽流感H5N1AIH5N1亚型禽流感病毒、H7N9亚型禽流感病毒H5N1,H7N9

1.4　统计与分析

所得数据采用SAS 8.0软件中GLM过程进行方差分析，检验误差为5%水平，数据用平均值±标准差表示。

2　结果与分析

2.1　家畜抗体检测结果

2013—2016年，宁海县猪O型口蹄疫、猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体年均阳性率分别为76.27%、75.84%和79.88%，各年差别不大，且均大于70%(图1)，高于农业部规定标准[3-5]，免疫效果较好。对牛O型、A型及亚Ⅰ型口蹄疫抗体进行检测，年均阳性率分别为93.44%、92.83%和95.19%，其中2014年口蹄疫抗体的阳性率略低于其他年份(图2-A)。2013-2016年：羊O型口蹄疫抗体阳性率分别为54.58%、45.00%、80.00%和81.91%，年均阳性率为65.37%；亚Ⅰ型口蹄疫抗体阳性率分别为60.00%、45.00%、81.25%和83.81%，年均阳性率为67.52%(图2-B)。

图1　猪O型口蹄疫、猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征抗体检出情况Fig.1　Test result of FMD-O， CSF and PRRS in swine

图2　牛(A)和羊(B)口蹄疫抗体检出情况Fig.2　Test result of FMD in bovine (A) and goat (B)

2.2　家禽抗体检测结果

2013—2016年，检测鸡的H7N9亚型、H5N1亚型禽流感和新城疫病毒抗体；2013—2015年，检测鸭的H7N9亚型和H5N1亚型禽流感病毒抗体。检测结果显示，鸡和鸭的H7N9亚型禽流感抗体阳性率为0。鸡的H5N1亚型禽流感抗体年均阳性率98.67%，各年份均在96%以上，免疫合格率高。鸡新城疫抗体4年平均阳性率为62.86%，2013年的抗体阳性率较高(71.24%)，其余各年份的抗体阳性率较低，其中2016年仅为58.25%(图3)。2013—2015年，鸭的H5N1亚型禽流感抗体分别为86.81%、100%、100%(图4)，年均阳性率为95.60%。

2.3　不同种间免疫效果差异

O型口蹄疫为家畜的强制性免疫项目，其抗体为每年必检项目。2013—2016年，宁海县的O型口蹄疫病毒抗体检测结果显示，牛的O型口蹄疫抗体的年均阳性率为93.44%，免疫效果显著(P<0.05)优于羊(图5)。

2.4　季节对抗体检出结果的影响

从2013—2016年监测数据可以看出，新城疫抗体受季节影响较大，各月份检测的抗体阳性率差异大(图6)，幅度在50%～75%之间，夏季(6—8月)抗体季平均阳性率最低(54.64%)。其余所检抗体检测结果受季节影响小，阳性率变化较小，如家禽的H5N1亚型禽流感抗体阳性率在95%～100%间(图7)。

图3　鸡禽流感和新城疫抗体检出情况Fig.3　Test result of AI and ND in chicken

图4　鸭H5N1亚型禽流感抗体检出情况Fig.4　Test result of H5N1 in duck

柱上无相同小写字母的表示差异显著(P<0.05)。Bars marked without the same letters indicated significant difference at P<0.05.图5　家畜O型口蹄疫病毒抗体检出情况比较Fig.5　Comparison of detection of FMDV-O antibodies in domestic animals

图6　鸡新城疫抗体不同月份的检出情况Fig.6　Detection of chicken ND antibody in different months

图7　家禽H5N1亚型禽流感抗体不同月份的检出情况Fig.7　Detection of poultry H5N1 in different months

3　讨论

我国将口蹄疫、猪瘟、高致病性禽流感、鸡新城疫等列为一类动物疫病，猪繁殖与呼吸综合征等列为二类动物疫病[11]。这些疾病的爆发给畜禽业造成巨大的经济损失，同时严重地危害人类的健康和生命安全。对畜禽进行预防接种是我国采取的防治主要传染性疾病的重要措施之一，并通过检测血清免疫抗体来反映群体的免疫效果和抵抗力。宁海县对口蹄疫、猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、高致病性禽流感等4种动物疫病实行强制免疫，应免畜禽免疫密度要达到100%，将鸡新城疫列为常规预防免疫。目前常用的血清学方法有3种：血凝和血凝抑制试验、琼脂扩散试验(AGP)、酶联免疫吸附试验。本文依照有关国家标准进行抗体的检测和判定。抗体检测结果表明，宁海县养殖场(户)畜禽重大传染病整体免疫效果良好，牛、猪、鸡等动物免疫抗体阳性率全年保持在70%以上，羊口蹄疫和鸡新城疫免疫不合格，待改进。

按照畜禽群体免疫合格率应达到70%以上的要求，宁海县羊口蹄疫和鸡新城疫抗体阳性率达不到标准，值得引起相关部门和有关养殖单位重视。口蹄疫是由口蹄疫病毒引起偶蹄兽的一种急性、发热性、高度接触性传染病，多发生于牛、羊、猪等偶蹄类动物，具有较大的危害性[12-13]。宁海县羊多为农户山区散养，农户防疫意识较弱，免疫操作不规范，这是当地2013—2014年口蹄疫抗体检测不合格的主要原因。发现问题后，宁海县畜牧兽医局及时改进，指导和督促养殖户进行规范免疫，2015—2016年取得明显成效，O型和亚Ⅰ型口蹄疫抗体阳性率均大于80%。鸡新城疫虽然没有列入国家强制免疫计划，但鸡新城疫是一种热性、败血性的急性传染病，是危害养鸡业最严重的疫病之一，而且人感染后会引起结膜炎等症状。胡北侠等[14]调查显示，新城疫能感染人，养禽场工作人员新城疫病毒抗体阳性率为33.3%。宁海县是养鸡业大县，为保证鸡群及其接触人群的健康和禽业的可持续发展，将鸡新城疫列为当地常规预防免疫。但新城疫抗体水平低，阳性率<70%，与其他地区报道[15]的情况相似。经分析，主要原因是新城疫免疫在农户中只进行了饮水免疫，未进行注射免疫，免疫质量低下，抗体效果很差。此外，新城疫抗体水平受季节影响明显，夏季抗体季平均阳性率最低。其主要原因是夏季温度高，养殖场保存条件较差，加之饮水免疫自身的不足，疫苗免疫效果受影响。为了有效防控新城疫的发生，建议有条件的养殖场，特别是祖代场和父母代场，采取滴鼻+弱毒苗肌注的免疫方式。

宁海县畜牧兽医局按照《中华人民共和国动物防疫法》，认真贯彻《国家中长期动物疫病防治规划(2012—2020年)》和各年度的国家动物疫病强制免疫计划要求，结合宁海县实际，制定免疫实施方案，重点抓好高致病性禽流感、口蹄疫、高致病性猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟等强制免疫，全面落实免疫措施。同时，要求免疫时应规范操作，做好各项消毒工作，防止人为传播疫情，并加强疫苗的运输和保存以保证免疫效果。此外，还定期组织免疫效果监测与评价工作，对被抽检的养殖场和农户存栏的家禽和家畜群体抗体合格率未达到规定要求的，限期进行加强免疫。畜禽多数疾病的发生与饲养管理有密切关系，在进行抗体监测的同时，建议养殖场和农户加强饲养管理，注意环境卫生，并做好隔离、封锁和消毒工作。

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[4]中华人民共和国农业部. 农业部关于印发《2016年国家动物疫病强制免疫计划》的通知[EB/OL]. (2016-04-15) [2017-09-12]. http://www.moa.gov.cn/govpublic/SYJ/201604/t20160415_5096008.htm.

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[9]全国动物检疫标准化技术委员会. 高致病性禽流感诊断技术：GB/T 18936—2003[S]. 北京：中国标准出版社，2003.

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