浅析血液标本放置时间对检验结果的影响

郜玮

（内蒙古血液中心，内蒙古 呼和浩特 010010）

0　引言

近年来，随着血液标本检验设备的不断更新，以往的手工检测、半自动分析仪检测慢慢改进为全自动分析仪检测，其检测结果较原来的检测设备更为精准[1]。近年来，关于血液标本放置时间会不会影响检测的报道也多种多样，而我中心为保障献血者和受血者的权益，使每一袋血都有溯源性，需要长时间存放血液标本，那么血液标本放置时间对标本再次检验的结果究竟有多大影响[2]？大量医学专家表示，标本的时间可作为影响检验结果的重要因素。为了保证检验质量，医院引进先进的检验设备与技术，将传统、落后的检验设备及检验模式更换掉，逐渐提高检验工作的效率及检验结果质量。本研究以中心2012年1月至2015年1月收集的50例HBV双试剂阳性血液标本予以研究，现报道如下。

1　资料与方法

1.1　一般资料

选取本中心于2012年1月至2015年1月50份酶联免疫法（ELISA）双试剂HBV阳性标本为研究对象。

1.2　方法

1.2.1仪器及试剂准备

仪器：瑞士AusBio公司的STAR-8ch全自动加样仪和FAME24/30全自动酶免疫分析仪；试剂：上海科华生物工程股份有限公司提供的乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂盒及英科新创科技有限公司提供的乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂盒。

1.2.2具体操作方法

将经过正常检测流程后的HBV双试剂阳性标本挑出，分离血清。再分别将标本置于零下25～30℃冰箱保存一周、一年、三年。严格按照试剂盒的具体说明书施行ELISA检测。

1.3　观察指标

观察50例血液样本在72h内存放于零下25～30℃一周、一年及三年后分别经ELISA检测的阳性率结果。

1.4　统计学方法

数据采用SPSS 19.0进行分析，计数资料用率表示行卡方检验，检验标准α＜0.05。

2　结果

50例血清样本放置于零下25～30℃保存后的结果显示，一周、一年、三年各时间段的检出时间均无明显差异（P＞0.05），其阳性率均高，无统计学意义。见表1。

表1　50例血清放置时间及阳性变化情况

3　讨论

乙型肝炎病毒（HBV）是导致慢性乙型肝炎发生及病情发展的重要因素。乙型肝炎病属于一种DNA病毒，归于嗜肝DNA病毒科[3]。据目前资料显示，HBV仅对人、猩猩存在易感性，导致人和猩猩患乙型病毒性肝炎疾病[4]。该病毒是由丹娜于1965年发现，直径为42nm，主要由外壳和核心组成，呈完整的颗粒状，因此也被称为丹娜颗粒[5]。此病毒的传播路径主要包括血液传播、医源性传播、母婴传播、性传播等多种传播途径，对人们的健康造成了较大的影响。目前，我国的乙肝病毒感染率已经到达60%～70%，其中乙肝表面抗原携带率占全国人口的7.18%，也就是说全国大约有9300万人已经携带乙肝病毒，其中有大约2000万人为慢性乙型肝炎患者[6]。该病属于一种传染性疾病而非遗传病，尽管如此，很早之前就有了乙型肝炎病毒疫苗，对该病毒进行了有效控制。同时，我国的医学专家们仍然没有停止对该病毒的研究，不断地推陈出新，研制出了更为先进的病毒检测技术及治疗药物，大大提高了该病的治愈率[7]。

乙肝病毒基因的检查方法包括：PCR酶联免疫吸附法、PCR酶联化学发光法、竞争PCR法、荧光PCR法以及荧光标记物法等方法。其检测方法多种多样，且检测仪器和设备均来自不同的国家，其标准曲线和标准荧光均有所不同，导致其得出的数值均存在左右漂浮、偏差较大的特点，因此其检测范围也有所不同。针对该病毒基因检查，实验室主要通过ELISA检测进行诊断[8]。本研究便是以ELISA检测为主，探究不同时间段检测乙型肝炎病毒对检验结构是否存在影响。酶联免疫法（ELISA）是将已经知晓的抗原体、抗体吸附于固相载体表面，并使酶标记的抗原抗体同时反应于固相载体表面上的技术。本技术可对大分子抗原、特异性抗体有检测作用，且检测速度快、灵敏性强、操作简便、载体易于标准化。在施行该检测技术的过程中必须使用三种试剂，包括免疫吸附剂、标记物以及显色剂。在测量时，需要先将抗体与固相载体结合，注意保留其免疫活性，然后将抗原同酶结合成标记物，该标记物同样保持原来的免疫活性和酶活性，待标记物同固相载体上的抗体结合反应后，再添加相应底物及显色剂。最后可用肉眼、电子显微镜及光学显微镜进行观察，再通过酶标仪予以测定。尤其是进行HBV-DNA检测，其检测过程中该技术所具备的特异性可将乙肝病毒基因组中的270bp基因片段进行扩增，扩至2n的指数，并在数小时内进行特定的分子片段扩增，可扩至1×107～1×108倍，其HBV检出率较高，是一种较强的检测手段。

目前，由于医疗技术水平的快速提升，检测技术的不断进步，其血液标本的保存技术也有了突破性改变。大多数医疗机构已经建立了较为完整的血液标本保存管理制度，由专门的工作人员进行血液标本采集，并予以实验室妥善处理后，置于温度适宜的冰箱内进行短期保存或长期保存，需要时，可及时进行采用或者进行监测。血液标本对存放环境的要求十分严格，需要由专业人员营造一个无菌且密封的环境，将采集的血液标本存放至专门的位置，避免外界污染。当出现血液无法及时检测时，医护人员应严格按相关血液标本存放制度进行存放，注意将其放置为无菌的冰箱（4℃）内，存放时间小于72h。对部分缺乏稳定性项目重复检查，确保准确检验结果。本研究表明，50例血清样本放置于室温保存后的结果显示，一周、一年、三年各时间段的阳性检出情况均无明显差异（P＞0.05），其阳性率均高，无统计学意义，充分说明了血液标本放置时间对检验结果影响不大。

[1] 李晓恒.血液标本放置时间对生化检验结果的影响[J].吉林医学,2011,32(3):529.

[2] 赵晓红.血液标本存放时间对生化检验结果的影响研究[J].中国保健营养旬刊,2013,23(7):2127.

[3] 韦淑凤,王海勇.血液标本存放时间对生化检验结果影响的分析[J].医学美学美容旬刊,2014,10(7):443.

[4] 朱红英.血液标本存放时间对生化检验结果造成影响的分析[J].中国当代医药,2013,20(25):101-102.

[5] 黎莉.血液标本采集相关因素对生化检验结果的影响[J].临床合理用药杂志,2014,7(10):17-18.

[6] 古贤清.相关因素对300例血液采集标本生化检验结果的影响分析[J].广东微量元素科学,2015,22(4):56-58.

[7] 郭慧霞.血液标本采集对生化检验结果的影响差异分析[J].临床医学研究与实践,2017,2(1):83-84.

[8] 唐美琴.生化检验中血液标本采集对结果的影响分析[J].吉林医学,2013,34(33):6914.