血清癌胚抗原、糖类抗原199和肿瘤M2型丙酮酸激酶联合检测在结肠癌诊断中的价值

冯 妮，李晓琳

(云南中医学院第一附属医院肿瘤科，云南 昆明 650021)

结肠癌早期临床症状缺少差异性，很多患者开始治疗时已经是中晚期。生物标志物检测因其经济、可靠、便捷等优点被应用于恶性肿瘤的诊断。研究发现，多种肿瘤标志物联合检测在直肠癌筛查、诊断中具有较高的应用价值[1]。癌胚抗原(carcino-embryonic antigen，CEA)、糖类抗原199(carbohydrate antigen 199，CA199)、肿瘤M2型丙酮酸激酶(tumor M2 pyruvate kinase，TuM2-PK)是常见的肿瘤标志物，但目前联合检测CEA、CA199、TuM2-PK诊断结肠癌的研究较少。本研究通过观察比较结肠癌患者、良性结肠病患者、健康志愿者的血清CEA、CA199、TuM2-PK水平，旨在探讨CEA、CA199、TuM2-PK联合检测在结肠癌早期诊断中的价值。

1 资料与方法

1.1一般资料选择2014年2月至2016年11月在云南中医学院第一附属医院就诊的结肠癌患者137例作为观察组，所有患者均符合《结肠癌规范化诊疗指南(试行)》中结肠癌诊断标准[2]，并经X线检查和病理活组织检查确诊，其中男93例，女44例，年龄35～74(52.83±10.42)岁。选取同期就诊的结肠炎、肠息肉等良性结肠病患者87例为对照组，其中男52例，女35例，年龄30～71(50.41±13.27)岁。另选取同期在云南中医学院第一附属医院体检的健康志愿者75例为健康组，其中男41例，女34例，年龄31～69(50.87±12.51)岁。观察组和对照组患者均排除合并有重要脏器功能障碍、感染及其他癌症者；正常组志愿者的心、肝、肾功能及血生物化学指标均正常。所有受试者签署知情同意书，研究方案经医院伦理委员会审核批准。3组受试者的性别、年龄比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.23组受试者血清CA199、CEA、TuM2-PK水平检测所有受试者于清晨空腹抽取肘静脉血5 mL，应用Avanti J-26S型离心机(美国贝克曼库尔特公司)3 000 r·min-1离心 5 min，分离血清后在-20 ℃ 下保存，采用电化学发光法检测血清CA199、CEA水平，检测试剂盒购自英国Adcam公司，电化学发光仪由日本日立公司生产；采用定量酶联免疫吸附试验法测定血清TuM2-PK水平，试剂盒购自南京金益柏生物科技有限公司。在日常临床检验标准中，CEA正常上限为5 μg·L-1、CA199正常上限为37×103U·L-1、TuM2-PK正常上限为15×103U·L-1[3]，大于正常上限为阳性表达。

1.3受试者工作特征曲线(receiveroperatingcharacteristiccurve，ROC) 绘制CEA、CA199、TuM2-PK联合检测诊断结肠癌的ROC，以曲线下面积0.50为标准，曲线下面积>0.50时有诊断价值。根据ROC分析得出单一指标诊断结肠癌的敏感度、特异度并计算约登指数(1-敏感度-特异度)，采用并联实验法计算联合检测的灵敏度，采用串联实验法计算联合检测的特异度。

2 结果

2.13组受试者血清肿瘤标志物水平比较结果见表1。3组受试者血清CEA、CA199、TuM2-PK水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。观察组患者血清CEA、CA199、TuM2-PK水平均显著高于对照组和健康组，差异有统计学意义(P<0.05)；对照组与健康组受试者血清CEA、CA199、TuM2-PK水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。

表13组受试者血清CEA、CA199、TuM2-PK水平比较

注：与对照组和健康组比较aP<0.05。

2.23组受试者肿瘤标志物阳性表达率比较结果见表2。观察组患者血清TuM2-PK、CEA、CA199阳性表达率显著高于对照组和健康组，差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组与健康组受试者血清TuM2-PK、CEA、CA199阳性表达率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。

表23组受试者血清CEA、CA199、TuM2-PK阳性表达率比较

Tab.2ComparisonofthepositiveexpressionrateofserumCEA，CA199andTuM2-PKinthethreegroups

组别nCEA阳性/例(%)CA199阳性/例(%)TuM2-PK阳性/例(%)健康组7514(18.67)8(10.67)6(8.00)对照组8727(31.03)15(17.24)13(14.94)观察组13773(53.28)a69(50.36)a91(66.42)a

注：与对照组和健康组比较aP<0.05。

2.3CEA、CA199、TuM2-PK单独及联合检测对结肠癌的敏感度和特异度结果见表3。CEA、CA199和TuM2-PK联合检测的灵敏度、约登指数均高于单一指标和2项指标联合检测，差异有统计学意义(P<0.05)；CEA、CA199和TuM2-PK联合检测的特异性高于单一指标及CEA和CA199联合检测。差异有统计学意义(P<0.05)。

表33种肿瘤标志物单独及联合检测的敏感度、特异度及约登指数

Tab.3Sensitivity，specificityandYoudenindexofsingleandcombineddetectionofthethreekindsoftumormarkers

敏感度/%特异度/%约登指数CEA53.28a74.69a0.28aCA19950.36a85.80a0.36aTuM2-PK66.42a88.27a0.55aCEA+CA19962.77a87.04a0.50aCEA+TuM2-PK76.64a91.360.68aCA199+TuM2-PK72.99a90.740.64aCEA+CA199+TuM2-PK87.5995.060.83

注：与CEA+CA199+TmM2-PK比较aP<0.05。

2.4CEA、CA199、TuM2-PK联合检测的ROC曲线分析结果见表4。CEA、CA199、TuM2-PK中任2项联合检测与3项联合检测对结肠癌均有诊断价值，ROC曲线下面积均≥0.70，其中CEA、CA199和TuM2-PK联合检测的曲线下面积最大。

表4CEA、CA199、TuM2-PK联合检测的ROC曲线分析

Tab.4AnalysisofROCcurvesforthecombineddetectionofCEA，CA199andTuM2-PK

检测指标曲线下面积标准误P曲线下面积的95%可信区间下限上限CEA+CA1990.700.0320.0050.570.73CEA+TuM2-PK0.810.0640.0000.750.86CA199+TuM2-PK0.760.0560.0030.690.78CEA+CA199+TuM2-PK0.870.0520.0000.810.96

3 讨论

结肠癌是一类严重危害人类健康的常见恶性肿瘤，尽早进行诊断和治疗对提高治疗效果和改善预后具有重要的意义。肿瘤标志物表达水平在肿瘤发展过程中会发生变化，检测其水平有助于肿瘤的诊断、分类、治疗及预后判断，并且其检测过程便捷、有效，已经越来越多地应用于肿瘤的临床诊断[4]。

TuM2-PK在肿瘤中多呈高表达，并以二聚体形式存在于肿瘤中，具有很高的特异性。肿瘤细胞本身会产生TuM2-PK，而TuM2-PK在结肠癌细胞增殖和转移时释放入血液，使其血清水平显著升高[5-6]。CEA是一种胚胎性肿瘤抗原，在正常的胃肠道组织中均有表达，但其表达水平在胃肠道恶性肿瘤中会显著升高，癌细胞所产生的CEA伴随着肿瘤细胞的极性紊乱释放到血液中，使其血清水平增加[7-8]。CA199是一种糖抗原类肿瘤标志物，主要由消化道肿瘤细胞所产生，是消化道恶性肿瘤的常用检测标志物，且在结肠癌中的表达显著升高[9]。研究显示，CA199在诊断结肠癌过程中具有较好的特异性[10]。因此，本研究通过比较结肠癌患者、良性结肠病患者以及健康者的血清CEA、CA199、TuM2-PK水平，探讨这3项肿瘤标志物单独与联合检测在结肠癌早期诊断中的价值。

本研究结果显示，结肠癌患者血清CEA、CA199、TuM2-PK水平及表达阳性率均显著高于良性结肠病患者及健康者，与宋培栋等[10]的研究结果基本一致，进一步提示CEA、CA199、TuM2-PK可作为结肠癌重要的诊断指标。本研究分析发现，CEA、CA199和TuM2-PK联合检测的灵敏度和约登指数均优于单一指标和2项指标联合检测，与曾龙飞等[11]的研究结果基本一致，而且ROC曲线分析结果显示，CEA、CA199和TuM2-PK联合检测的曲线下面积最大，提示这3项指标联合检测诊断结肠癌的效果好，诊断价值高。因此，使用CEA、CA199、TuM2-PK联合诊断，对于尽早发现结肠癌，及时进行干预治疗，从而提高治疗效果和患者生存质量具有很好的临床价值。

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