阳性血培养标本直接VITEK 2 Compact快速鉴定及药敏试验的评价

张袁露 陈娟 李步任

血流感染是临床常见的严重感染性疾病，具有起病急、病死率高的特点［1］。血培养为诊断血流感染的“金标准”［2-3］，快速准确的血培养结果可以更好地帮助指导临床科学合理用药，及时治愈患者［4］，对提高患者生存率及预后的价值很高［5］。上海地区推出了阳性血培养直接质谱快速检测规范［6］，实现了血培养结果的“三级报告”［7］，其中第二级报告是利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（matrixassisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry，MALDI-TOF-MS）进行直接鉴定的结果。本研究旨在利用梅里埃VITEK 2 Compact全自动微生物分析系统对阳性血培养标本进行快速鉴定和药敏试验，评估方法的可行性［2，6］。

1 材料与方法

1.1 标本来源 选取本院2017年5月—8月124份阳性血培养标本，其中革兰阳性（G+）球菌46株，革

兰阴性（G-）杆菌78株。所有标本均为非重复标本。

1.2 仪器与试剂 ① 梅里埃VITEK 2 Compact全

自动微生物分析系统； ② BD Bactec 9120血培养仪，需氧培养瓶； ③ 分离胶采血管 ； ④ 其他。

1.3 方法

1.3.1 常规方法 按照VITEK 2 Compact操作说明书标准，将阳性血培养标本转种至相应的培养基，置温箱培养。选取相应的鉴定药敏卡片，在培养所得菌落中，G-杆菌用GN鉴定卡（GN-AST32）、G+球菌用GP鉴定卡（GP-AST67）作为快速鉴定及药敏试验的比对方法。

1.3.2 快速鉴定及药敏试验方法 用10 mL无菌注射器抽取阳性血培养瓶内的血液标本，一部分用于涂片并进行革兰染色，观察细菌形态及染色结果；另一部分注满分离胶采血管，以3 500 r/min离心10 min。弃上清液，吸取中间白色菌膜层，配置0.5麦氏浊度菌液待用。根据涂片染色结果，剔除染色发现多种细菌的标本，选取相应的鉴定药敏卡片，G-杆菌用GN鉴定卡（GN-AST32），G+球菌用GP鉴定卡（GP-AST67），对配置的菌液进行快速鉴定及药敏试验。

1.3.3 两种方法的对比 以常规方法作为参照标准，评估VITEK 2 Compact快速鉴定及药敏试验结果的准确性。

2 结果

2.1 鉴定结果

2.1.1 G-杆菌 78株G-杆菌中，利用快速鉴定方法鉴定出细菌菌名的有75株，其中大肠埃希菌25株，肺炎克雷伯菌22株，铜绿假单胞菌18株，鲍曼不动杆菌7株，阴沟肠杆菌2株，黏质沙雷菌1株，且准确率为100%；3株未鉴定出菌名。利用常规方法鉴定出另外3株细菌分别为洋葱伯克霍尔德菌2株，嗜麦芽窄食单胞菌1株。

2.1.2 G+球菌 46株G+球菌中，利用快速鉴定方法鉴定出细菌菌名的有40株，其中金黄色葡萄球菌15株，表皮葡萄球菌16株，肠球菌6株，肺炎链球菌2株，溶血葡萄球菌1株，且准确率为100%；6株未鉴定出菌名。利用常规方法鉴定出另外6株细菌均为链球菌。

2.2 快速药敏试验结果 根据药敏结果将结果分为敏感，耐药，中介。符合：结果完全一致；严重错误：耐药做成敏感；重大错误：敏感做成耐药；微小错误：中介做成敏感或耐药，耐药或敏感做成中介。75株G-杆菌的药敏结果见表1，40株G+球菌的药敏结果见表2。

表1 75株G-杆菌快速药敏试验结果符合率

3 讨论

124份血培养报阳标本中，鉴定出细菌菌名的标本有115份，准确率为100%；其余9份标本未鉴定出菌名，均为生长较缓慢的细菌［8］。说明快速鉴定和药敏试验方法并不适用于生长缓慢的细菌［9］。对于涂片染色镜检发现2种及以上细菌的标本，此方法也并不适用［10］。

此方法出结果的时间大概为8 h左右，比常规方法［11］缩短了 24 h 左右，且结果可信度很高［12］，可在临床使用。由于此方法并没有标准的操作规范［6］，因此适合在危急病患中作为初级报告，不影响最终的正式报告，能够及早给临床抗菌药物的使用提供依据［13］。

表2 40株G+球菌快速药敏试验结果符合率

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