丁俊仁,李旭廷,梁歌,李思聪,王斌,杨锐,詹素群
(1.四川省畜牧科学研究院,四川 成都 610066;2.动物遗传育种四川省重点实验室,四川 成都 610066)
新生仔猪腹泻发生率高,病死率高,因其病因复杂,在防治工作中开发新型中兽药制剂已成为研究热点。
参金止痢口服液是由党参、金银花、干姜、半夏、藿香、甘草、茯苓、陈皮、白术等经水醇提取法提取后,加工制成的,其具有芳香化湿、和胃止呕之功效,可用于脾胃不和与霍乱吐泻之证。参金止痢口服液防治新生仔猪腹泻的临床试验如下。
1.1 材料
1.1.1 试验动物 某猪场同批次新生仔猪(随机分为试验组和对照组)及昆明种小鼠,18~22g。
1.1.2 试验药物 参金止痢口服液(1 g含原生药1.2g);止痢散(含藿香、滑石和雄黄);四环素类抗生素注射液。
1.1.3 试剂 微生物培养基和药敏纸片,轮状病毒、传染性胃肠炎和流行性腹泻病毒检测试剂卡。
1.2 方法
1.2.1 参金口服液预防新生仔猪腹泻试验 选取新生仔猪752头,中药试验组345头,仔猪出生24h内灌服参金止痢口服液,2mL/次,1次/d,连用3d;抗生素对照组407头,仔猪出生24h内肌肉注射四环素类抗生素注射液。
注射后观察出生10 d内新生仔猪的腹泻情况。
1.2.2 参金口服液联合止痢散治疗新生仔猪腹泻试验 选择21日龄前腹泻仔猪142头,按日龄随机分为中药试验组和抗生素对照组,每组各71头。
中药试验组用参金止痢口服液100mL稀释止痢散50g后,每头灌服4mL,一天一次,连用3d;抗生素对照组肌肉注射四环素类抗生素注射液,一天一次,连续3d。
观察给药7d内仔猪腹泻情况并统计治疗有效率。
1.3 病原学诊断
1.3.1 细菌分离鉴定 采取腹泻病猪肛门内粪便,灭菌肉汤增菌培养24 h后,转普通琼脂平板和麦康凯培养基培养24h。
挑取单个培养菌落通过16sr DNA鉴定菌种,纯化菌株用于药敏试验。
1.3.2 腹泻病毒检测 轮状病毒、传染性胃肠炎和流行性腹泻病毒检测试剂卡按照说明检测腹泻病猪粪便。
1.4 疗效判定
1.4.1 预防效果 以预防保护率为标准,预防保护率=出生10d内无腹泻仔猪头数/仔猪总头数×100%
1.4.2 治疗效果 以粪便评分为判断标准,分痊愈、有效和无效。
痊愈:仔猪粪便成条索状或球状,表面无脓血、分泌物,软硬适中。
有效:仔猪粪便基本呈固体,成堆状分布,表面无脓血,可有少量分泌物,质软。
无效:仔猪粪便不成型,为稀便甚至水样,表面或可见脓血、大量肠液,或见仔猪死亡。
1.5 统计方法 采用SPSS 13.0软件进行统计学处理,各处理与仔猪腹泻发病率和治疗率的关系采用卡方检验统计学方法计算,P<0.05表示差异显著,P<0.01表示差异极显著。
2.1 预防效果 参金止痢口服液和四环素类抗生素注射液预防新生仔猪腹泻保护率分别为89.6%和69.0%,两者之间差异极显著(P<0.01),说明参金止痢口服液对新生仔猪腹泻有很好的预防作用。
2.2 治疗效果 参金止痢口服液联合止痢散治疗哺乳仔猪腹泻的总有效率为84.5%,高于抗生素对照组的49.3%(P<0.05),说明参金止痢口服液联合止痢散对哺乳仔猪腹泻有较好的治疗作用。
2.3 细菌分离鉴定结果 37℃培养12 h后,普通琼脂平板长出隆起、圆滑、半透明的菌落,麦康凯琼脂平板上的菌落呈红色。
单个菌落革兰氏染色呈阴性,为杆菌,通过16sr DNA鉴定腹泻病猪粪便分离纯化菌株为猪源大肠杆菌菌株。
2.4 细菌致病性及药敏试验结果 用分离到的大肠杆菌进行致病性试验,结果接种小鼠24h内死亡,而对照组正常。取死亡小鼠肝脏及小肠检测,结果均分离到了原接种菌,由此证明分离到的大肠杆菌具有致病性。
分离的大肠杆菌仅对丁胺卡那霉素敏感,抑菌圈直径为18.5 mm,对氟喹喏酮类、头孢类、四环素类、β-内酰胺类以及氨基糖苷类抗生素耐药。
2.5 腹泻病毒检测结果 轮状病毒、传染性胃肠炎和流行性腹泻病毒检测试剂卡检测结果显示,试验猪场未检出流行性腹泻病毒和传染性胃肠炎病毒,但轮状病毒检测呈阳性,表明该场存在轮状病毒感染。
参金止痢口服液组方源自半夏藿香汤,半夏藿香汤收载于明末著名温病学家吴又可编撰的《瘟疫论》中,其具有芳香化湿、和胃止呕之功效,用于脾胃不和与霍乱吐泻之证。
新生仔猪腹泻病因复杂,病毒和大肠杆菌是主要致病因素,低温和管理不善可加重腹泻的发生。对病猪临床治疗以清热解毒、化湿止痢、涩肠止泻为主,代表性组方有止痢散、乌梅散等。新生仔猪机体功能不健全,需加强保温,保持环境干燥才能存活,若过度清热解毒易耗伤正气,尤其是损伤脾胃阳气,劫夺津液,导致阴伤,因此选择具有芳香化湿、和胃止呕之功效的半夏藿香汤为基础方,并调减金银花用量,增加党参补中益气、和胃生津,调补泄泻所致的正气亏虚。
试验结果表明参金止痢口服液对新生仔猪腹泻的预防和治疗效果优于四环素类抗生素,其主要原因有两方面,一是本次导致仔猪腹泻的病菌不仅有大肠杆菌,还存在轮状病毒,且致病性大肠杆菌有高度耐药性。参金止痢口服液属纯中药制剂,组方中含有金银花等组分,对耐药大肠杆菌有一定抑制作用,可发挥一定的预防效果;二是致使新生仔猪腹泻死亡的原因为脱水、器官衰竭,中药的多组分、多靶点、多功能效应可提高治疗效果。在腹泻病猪的治疗中加入了中药止痢散,止痢散中滑石的主要成分为硅酸镁、氧化铝、氧化锌等,其有吸附和收敛作用,可保护肠黏膜,收涩肠液,加快粪便成型,止痢散中的雄黄量少但具有解毒杀虫,燥湿祛痰,抗炎、镇静之功效,止痢散中的藿香芳香化湿,解暑辟浊,和中止呕,可缓解病毒性腹泻引起的呕吐及减少体液流失。因此参金止痢口服液配合止痢散治疗仔猪腹泻的效果优于单用四环素类抗生素。
试验表明参金止痢口服液对新生仔猪腹泻有较好的预防效果,与止痢散合用可治疗临床细菌性腹泻、病毒性腹泻。