EMT相关标记分子和ILK在结直肠癌组织中的表达相关性及其与患者癌细胞侵袭转移CT征象的关系

白东 沈阳医学院附属中心医院普外三科 （辽宁 沈阳 110024）

结直肠癌已然成为我国最为之常见的一种恶性肿瘤，近些年来其发病病死率均居高不下，并且确诊时常常发现该病已经发生了癌细胞转移侵袭和扩散。因此研究结直肠癌的迁移侵袭的分子机制非常必要，有助于从基因分子水平了解这一个过程，进而采用基因或免疫干预的方法控制结直肠癌的发展。ILK以及上皮细胞-间充质转化（EMT）相关标记分子是多种癌细胞转移侵袭过程中重要的分子[1]，本研究旨在对整合素连接激酶以及上皮细胞-间充质转化相关标记分子在结直肠癌组织中的表达相关性进行研究，并拟通过统计学方法探究其与癌细胞侵袭转移CT征象的关系。

1.实验及材料

1.1 材料及来源

本研究中的80例结直肠癌患者的癌症肿瘤组织及与之相配对的癌旁组织标本均由天津市肿瘤医院（中国天津）友情提供，所有组织样品均较为新鲜且均未接受任何癌症治疗处理。PBS磷酸缓冲液由Hyclone公司提供，显微镜螺旋CT由美国GE Hispeed Advantage购买。

2.试验方法

2.1 CT检测

对本研究中的80例结直肠癌患者行螺旋CT检查，检查方法参照文献[2]执行。

2.2 结直肠癌组织之中ILK和EMT相关标记分子蛋白表达情况的检测

制作癌组织切片，以已知确定的结直肠癌组织切片作为阳性对照并以PBS切片作为阴性对照组进行相关分子蛋白表达情况的判定。本研究中相关分子在肿瘤组织及其旁组织中表达的阳性和阴性判定标准均将严格按照以下方法加以执行。所有的组织切片的读取均由三名有经验的病理学医生盲法判断，所有切片均任意选取5个视野进行读取判定。阳性分级按照表1中的标准执行。

表1. ILK以及EMT相关标记分子蛋白表达阳性与阴性判定标准

表2. 结直肠癌螺旋CT征象

表3. 80例直肠癌组织中ILK以及EMT相关标记分子阳性和阴性表达的例数

3.结果

3.1 结直肠癌螺旋CT征象

由表2可知，结直肠癌浆膜侵犯病例数为44例，淋巴转移侵犯为32例。

3.2 结直肠癌组织之中整合素连接激酶和EMT相关标记分子蛋白阳性与阴性表达情况

由表3中结果分析可知上皮细胞钙粘蛋白在癌组织之中的阳性表达频率明显较低而另外三个分子的阳性表达概率情况则正好与之相反。

3.3 结直肠癌组织之中相关分子蛋白阳性与阴性表达情况的相关性Spearman分析

整合素连接激酶在结直肠癌组织中的表达水平与上皮细胞钙粘蛋白的表达情况呈显著的负相关（r=-0.286），其与Vimentin、Snail癌组织中的表达水平呈明显的正相关关系。

3.4 结直肠癌之中相关分子与患者CT检测结果相关性

由表5可知整合素连接激酶、Vimentin、Snail1在结直肠癌组织中的表达与浆膜侵犯和淋巴转移呈正相关关系，而上皮细胞钙黏蛋白的表达则与癌细胞的转移线侵袭呈明显的负相关。

表4. 结直肠癌组织中ILK以及EMT相关标记分子蛋白表达相关性分析

表5. 结直肠癌之中相关分子与患者CT检测结果相关性

4.讨论

ILK是近年来发现的一种参与诸多信号转导通路的激酶，其在肿瘤细胞中的高度表达对细胞的增殖和侵袭迁移具有重要意义。EMT是特定情况之下机体的上皮细胞向间质细胞分化一种生理表现，但在肿瘤细胞中这一作用将削弱胞间连接对癌细胞束缚；从而加剧肿瘤细胞的迁移进而引发癌细胞的扩散[3]。

本研究探讨了整合素连接激酶和上皮细胞钙粘蛋白等等相关分子在癌组织之中的表达相关性。据结果推测结直肠癌组织中的这四个相关分子的异常表达可能与结直肠癌细胞在内环境中的发展进程具有较为密切关系。其表达相关性分析结果提示ILK与EMT相关标记分子的表达可能存在特定的信号关系进而影响结直肠癌的发生发展。为此本研究还对这四个分子表达与癌细胞侵袭转移情况关系进行了探讨，结果表明上皮细胞钙黏蛋白与癌细胞的侵袭转移呈负相关，而ILK等分子在结直肠癌细胞中的表达与癌细胞的侵袭转移呈正相关。多项研究表明ILK的表达下调将会抑制癌细胞侵袭扩散，这可能通过通过ILK/Akt/GSK3β通路进而干预EMT相关蛋白的表达达到；而上皮细胞钙粘蛋白分子表达水平的上调以及Vimentin、Snail1表达水平的下调都将增强机体内胞间连接对癌细胞的束缚并减弱其侵袭能力。而这些研究也进一步验证了本研究的结果，但其主要是基于膀胱癌和上皮间质转移的研究，对结直肠癌此方面的研究还较为缺乏。

根据本研究结果推测可知，由于结直肠癌细胞中ILK分子的表达上调引起EMT相关标志分子发生一系列的变化；从而促进了结直肠癌的侵袭转移能力的提高，但还有待进一步深入的分子机制和动物实验加以验证研究。

[1]张凤梅,李胜水,李秀清,等.ILK和MMP-9在胃癌及其侵袭、转移中的表达及意义[J].胃肠病学和肝病学杂志,2015,24(1):95-98.

[2]鲁家贤,董生根,张伟良,等.结直肠癌的CT诊断及其侵袭性征象的病理对照分析[C]//浙江省医学会放射学学术年会,2014.

[3]庄翔,朱军,吕梦欣,等.特异性ILK siRNA对膀胱癌EJ细胞EMT及移植瘤生长的影响[J].基础医学与临床,2016,36(2):191-198.