前哨淋巴结活检及微转移检测对乳腺癌的临床诊疗价值

乳腺癌中主要发生在女性，男性很少[1]。目前治疗乳腺癌主要是以前哨淋巴结活检(sentinel lymph node biopsy，SLNB)代替腋窝淋巴结清扫(axillary lymph node dissection，ALND)来进行治疗。前哨淋巴结(sentinel lymph node，SLN)是原发肿瘤所必经的第一批特殊的淋巴结，最能反映淋巴结的转移现象。淋巴结的微转移检测不准确，是淋巴结阴性肿瘤患者术后复发的原因之一，前哨淋巴结活检是结合了淋巴结的微转移对患者进行检测，明确了肿瘤的分期，为患者的治疗提供了准确信息[2]。随着医学的不断发展和各个专家的研究，用放射性胶体和γ-探测仪定位乳腺癌前哨淋巴结和带放射性标记的血清白蛋白定位前哨淋巴结，成功率高达95%，但国内相关应用比较少，因此需进一步研究。本实验将对乳腺癌前哨淋巴结活检及微转移检测对乳腺癌的临床诊疗价值做出分析。

1 资料与方法

1.1 研究对象

选取2015年5月至2017年6月间，于本院确诊并接受治疗的乳腺癌患者共133例，患者均为女性，年龄29～71岁，病程时间2～6年，活检病理诊断为浸润性导管癌或单纯性导管原位癌。

1.2 纳入与排除标准

纳入标准：临床无腋淋巴结转移，无远处转移，肿块经粗针穿刺或活检病理诊断为浸润性导管癌，无腋部手术史的患者；自愿加入本次研究的患者。

排除标准：存在术前放化疗史以及切取SLN后没有进行监测的患者；不愿加入本次研究的患者。

1.3 研究方法

参与本次研究的133例患者，先行前哨淋巴结定位活检术，然后行腋窝淋巴结清扫术[3-4]。每例患者淋巴结切除6～25枚，共计1995枚。每例检出前哨淋巴结1～5枚，共399枚；每例检出非前哨淋巴结5～20枚，共1596枚。将每例患者切除的淋巴结1867枚行常规单层切片HE染色，并每枚隔100 μm的深度连续切片进行卡纳琳免疫组化染色法。用微波修复抗原法将其置入微波炉加热10～15 min，取出后自然冷却。PBS每次间隔3～5 min进行冲洗；依次滴加AE1/AE3-抗工作液、第二代生物标记二抗工作液、第二代辣根酶标记链酶卵白素工作液，每次滴加工作液后进行PBS冲洗3次，放置室温进行孵育。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 乳腺癌患者淋巴结切除情况

参与本次研究的133例乳腺癌患者中，人均切除淋巴结(32.3±14.7)枚，共1995枚。每例检出前哨淋巴结1～5枚，平均3枚，共399枚；每例检出非前哨淋巴结5～20枚，平均(12.5±2.4)枚，共1596枚。

2.2 前哨淋巴结内转移灶情况

研究中发现，单一层面切片的HE染色，前哨淋巴结发现45枚(8例)(17.7%)、非前哨淋巴结41枚(14例)(34.1%)发现转移。对365枚前哨淋巴结行多层切片HE染色及免疫组化染色检测，发现单层切片常规HE染色前哨淋巴结均有微小转移，余下HE染色阴性的前哨淋巴结有微小转移灶，直径均小于2 mm，累计有96枚前哨淋巴结内有转移灶。

对常规单一层面切片HE染色的患者，非前哨淋巴结行多层切片HE染色检测，发现有微小转移灶；对多层切片HE染色的患者进行多层连续切片及免疫组化，发现淋巴结存在微转移；对前哨淋巴结无微转移患者的非前哨淋巴结行多层连续切片及免疫组化研究，尚未发现淋巴结有微转移灶。

2.3 前哨淋巴结癌转移检出情况

多层切片HE染色及免疫组化染色法对早期乳腺癌前哨淋巴结的阳性检出率为41.37%(151/365)，单一层面切片HE染色法阳性检出率为27.67%(101/365)，差异有统计学意义(χ2=3.952，P=0.031)。

3 讨论

乳腺癌是妇女最常见的恶性肿瘤之一，是导致女性死亡的首要原因，我国以每年新增3%～4%的发病率逐年上升[5]。单纯的DCIS术后没有1例发生前哨淋巴结转移，而术前此类诊断为浸润性导管癌的病例中有出现前哨淋巴结转移，因此乳腺导管原位癌是否需行前哨淋巴结活检亟待明确[6-8]。因此，能够在术前术中做出正确的前哨淋巴结活检技术受到广泛的关注。

前哨淋巴结是肿瘤细胞经淋巴管转移的第一站淋巴结，前哨淋巴结的存在为乳腺癌前哨淋巴结活检技术奠定了基础。本次研究说明了前哨淋巴结活检可以准确反映腋窝淋巴结的转移情况[9-10]，并且更安全、可靠、行之有效。多层切片结合免疫组化检测比常规单一层面的HE染色更容易发现淋巴结的癌转移情况，并且有助于微小转移灶的检出。对常规HE染色阴性者采用多层切片及免疫组化AE1/AE3法发现有前哨淋巴结转移的现象[11-12]。对乳腺癌前哨淋巴结进行免疫组化染色、HE检查、多层面切片均发现有微小转移，本次研究对常规HE染色患者行多层面切片也均发现有微转移。癌转移是细胞蛋白在淋巴结中的表达，采用不同方法进行比较发现AE1/AE3是免疫组化最适合的抗体。资料表明，常规的病理检测和治疗，在术后复发率高达35%，且前哨淋巴结有癌转移现象，因此，乳腺癌前哨淋巴结活检亟待去证明使用，减少患者不必要的痛苦和负担。通过本次研究发现连续切片及免疫组化染色AE1/AE3法与普通HE染色方法相比，对前哨淋巴结癌转移检出率明显提高，连续切片及免疫组化染色AE1/AE3法可提高肿瘤分期的精确性，还提高了前哨淋巴结对腋淋巴结有无转移的敏感率[13-14]。

综上所述，前哨淋巴结活检及微转移的检测可以用来指导是否对乳腺癌患者进行常规腋淋巴结清扫，对其进行连续切片及免疫组化染色检测比普通HE染色检出率明显提高。