李明远断病手迹（八十四）鉴定由灰霉病引起的万寿菊田间死株

年的11月，都是保护地灰霉病开始发生的时候。一般说来，灰霉病比较好认。一旦发生，可根据症状立即采取相应的措施进行防治，一般都会有一定的效果。

万寿菊灰霉病也一样。如果发现花朵上有些花瓣腐烂，长出灰色的霉层，一般都是霉病引起（图1）。但是，看得多了，就会觉得事情不那么简单，在条件不合适的时候，看不到灰霉，所以要弄明白是什么病还真的需要下点功夫。

时间回溯到2016年8月2日，我们到北京市延庆区的四海镇看制种棚里万寿菊的长势，发现里面有些死株。主管这项工作的黄博士问我是什么病？我仔细地观察了一番，只见到病株茎、叶干枯，说不上来是什么病？再仔细观察，发病轻的病株先是叶片枯死，病斑通过叶柄扩展到茎上，在茎上形成纵向的暗色条斑；病叶多时，茎上的病斑会连成片，使植株枯死（图2）。

因为没有霉层，要鉴定它只好用组织分离的方法来取得病原。我们担心病株在棚里会有腐生菌附着在上面，特意采了一些轻病株，还到棚外以蓝天为背景拍下了轻病株的表现（图3）。

病菌分离工作比较容易，是用PDA培养基采用组织分离法进行。一周后得到3个灰色的菌落。由于当时事情较多，我就将它转到试管斜面上，放在2℃的冷藏箱中保存起来。半年过去，我想起了这件没能完成的工作，找出此前保存的试管斜面，将它转到PDA平板上。待菌落形成后，采用常规的技术，观察它的侵染性及子实体的形态。

侵染性的试验是采用离体叶的方法进行。即采下万寿菊的叶片，先用自来水洗净，再用消毒水洗3次，将其分放在直径9 cm的一次性培养皿里。每个分离物3皿，对照3皿，共12皿。每个皿底垫有3张消毒滤纸并倒有少量的无菌水将滤纸浸湿。再将得到的3个病菌的分离物，分别贴在3皿叶片下端的伤口处，而在对照叶片下部的伤口上，仅放1块蘸有无菌水的消毒脱脂棉。然后一起将这12皿置于23℃的光照培养箱中培养。

6天后观察发现，使用2号、3号、4号3个分离物接种的叶片均发病，而对照安然无恙。说明这3个分离物对万寿菊的叶片都有侵染力。挑出病叶上的病原在显微镜下观察，都是典型的灰霉病菌（图4）。

接着又观察了病菌对万寿菊茎部的侵染性。即采下万寿菊的枝条，在三角瓶里用自来水诱发出根，在茎的中部用一束大头针刺上7个微孔，将带有PDA培养基的菌块贴在微孔上，再敷上一块经过消毒的蘸有无菌水的脱脂棉，用石蜡膜缠上。与此同时还用刺微孔、不加病菌的处理做对照。同时放在室温下（23℃左右）培养，第5天各接种病菌的万寿菊即发病，其表现为茎折倒（图5?图6），揭开石蜡膜及接种物，看到接种孔附近组织变为浅灰褐色、腐烂。将其放在培养皿中保湿，也见到了长出的灰霉菌，而未接病菌的对照安然无恙。进一步证明了我们从病株上分离的病菌具有侵染力。

我们还对病原菌进行了观察。结果表明在显微镜下分生孢子梗为淡褐色至褐色，长324～2850 μm，直径较粗，为2.71～4.17 μm，且下端与末梢的宽度差距不大，分枝3～7次（图7），分枝的末端略膨大，上密生小梗。分生孢子一般透明，略带淡灰褐色，雨滴形，密列在孢梗的小枝梗顶端（图8），孢子大小：（11.16～19.73）μm×（6.99～8.55）μm（图9）。孢子易脱落，可浮在液滴的表面滚动。与文献核对，确为灰霉菌[Btrytis cinerea Pers.又名：Botrytis state of Sclerotinia fuckeliana （de Bary ）Fuckle][1-2]。

这一结果说明这次在田间见到的病株也是万寿菊灰霉病。笔者认为，这种无灰霉症状的出现，和万寿菊所处的条件有关。一是此时天气较热，并不适合灰霉病的发生。再就是这个大棚在此期间一直是敞开的，相对湿度一直上不去，不利灰霉的产生。这次试验说明，灰霉病不仅可以侵染万寿菊的花蕾，还可以侵染植株。而在某些条件下并不出現灰色霉层，却引起植株的枯死。

时间过了近1年，我才将鉴定的结果告诉了黄博，告诉他制种棚里的病株是万寿菊灰霉病。他问这种灰霉病如何防治？我认为万寿菊发生的这种灰霉病不难防治。只要做好以下3点，还是可控的。①要随时彻底清除病残株，集中起来销毁。制种棚里灰霉病原少了，就不容易发病。②注意控制棚里的湿度。即在大雨前及时放下棚膜，避免雨水倒灌入棚内；浇水后注意放风排湿，中耕土壤，不给灰霉菌造成发生的条件。③必要时还要用药预防。即在发病的初期使用对灰霉病有效的农药喷洒植株。鉴于这种病株多从茎基部侵染，防治的时候除喷洒整株外，在根颈部应多喷些农药。可用的药剂较多，如50%异菌脲1000倍液，或40%嘧霉胺悬浮剂1500倍液，或50%啶酰菌胺水分散粒剂2000倍液等。每7～10天1次，连续用药2～3次。

参考文献

[1] 李明远，李固本，裘季燕.北京蔬菜病情志[M].北京：北京科学技术出版社，1987：87-88.

[2] 张中义.中国科学院孢子植物志编辑委员会[M].北京：科学出版社，2006：1-89.

[引用信息]李明远.李明远断病手迹（八十四）鉴定由灰霉病引起的万寿菊田间死株[J].农业工程技术，2017，37（31）：36-38.