禽流感诊断与防治

田戈

（济南市章丘区畜牧兽医局，济南 250200）

0 引言

禽流感病毒（AIV）属正黏病毒科流感病毒属。基因组由单股负链8节段RNA组成，分别编码血凝素（HA）、神经氨酸酶（NA）、膜基质蛋白（M1和M2）、核蛋白（N）、非结构蛋白（NS1和NS2）、聚合酶（PA、PB1和PB2）。其中H1和N1具有高度变异性，HA蛋白具有细胞融合功能，其HA1和HA2裂解位点存在多个碱性氨基酸，是决定H5、H7亚型禽流感病毒高致病性的关键分子基础；NA具有神经氨酶活性，对病毒装配后的释放与感染发挥重要作用，也是神经氨酸酶抑制剂类抗病毒药的主要靶蛋白；M2具有离子通道活性，对病毒侵入细胞后HA发挥融合功能至关重要，同时也是金刚烷胺类抗病毒药的主要靶蛋白；PA、PB1以及PB2与基因组RNA共同构成转录与复制的功能复合体；NS1功能与拮抗宿主细胞α、β干扰素有关[1]。典型的A型流感病毒粒子具有囊膜，直径约100 nm，但通常呈体积较大的多形性对脂溶性溶剂敏感，高温下迅速失活。A型流感病毒可通过不同亚型和不同毒株间病毒基因组节段重配，以鸡基因组RNA复制过程中发生的突变，导致流感病毒致病性、抗原性与生物学特征的变异。根据HA和NA抗原性的差异，A型流感病毒分为15个HA亚型和9个NA亚型。目前从禽类已经分离到15种不同的HA亚型和9种NA亚型，因此禽类尤其是水禽和迁徙鸟被认为是A型流感病毒的自然宿主。近代史上人类曾3次暴发流感，其病原H1N1、H1N2及H3N3亚型病毒均与禽源流感病毒有密切关系。国际动物卫生组织将禽流感列为A类动物疫病，我国将其列为一类动物疫病[2]。

1 流行特点

禽流感是一种严重危害家禽的病毒性传染性疾病，常发生于冬春季节，许多家禽和野禽都可以感染该种疾病。目前已经得知该种病毒会感染50多种禽类，患病鸡、带毒鸡、带毒的野禽是该种病毒的主要传染源。禽流感病毒主要经呼吸道结膜、消化道进行传播，患病鸡、带毒鸡的分泌物、排泄物、呼出的气体中均存在大量病毒。健康鸡通过与患病鸡接触，或者直接接触患病鸡污染的环境会导致病毒传播流行，病毒还可以经过种蛋进行垂直传播。另外，病毒可以通过饲养人员、饲养用具进行传播。在山东地区禽流感呈现间歇性、规律式的传播流行，主要病毒血清型为H9型，其次是H5型。

2 临床症状

不同血清型的禽流感病毒所造成的致病能力存在很大差异性，而且根据基准年龄、继发感染以及饲养管理条件等因素不同，发病率和死亡率也存在一定差异。通常低致病性禽流感所造成的死亡率较低，但会严重影响鸡的健康生长，导致鸡采食量下降，精神沉郁，呼吸障碍，产蛋率下降，畸形蛋率升高，出现腹泻症状，排出黄绿色粥样稀便。低致病性禽流感与其他细菌性病毒性疾病混合感染后，会使养殖场的死亡率进一步升高，临床症状加重，造成严重的经济损失。流感具有很强的传播性，发病时间短，死亡率较高，潜伏期通常在3 d内，发病后体温迅速升高到43 ℃以上，患病鸡表现为精神极度萎靡、结膜发绀、瘫痪、鸣叫，病死率100%。水禽对该种病毒不敏感，但会存在带毒情况。近年，随着禽流感病毒不断变异，鸭、鹅感染H5型致病性禽流感所造成的临床症状日趋加重，死亡率有所升高。

3 病理变化

H9亚型为低致病性禽流感，通常造成的死亡率较低，大多数病死鸡主要表现为气管、鼻窦气囊、结膜轻度或中度充血出血，出现炎症病变。发病严重时，病死鸡卵巢出现退行性变化，病变部位会波及到输卵管。将病死鸡解剖后，可以发现鼻窦内存在浆液性、纤维素性、粘液性以及干酪状渗出物。病死鸡气管粘膜轻度充血水肿，气道壁变厚粗糙，且在其囊壁表面附着纤维素性或干酪样渗出物。病死鸡还会出现腹膜炎、卵黄性腹膜炎，将输卵管打开后，可以发现内部存在少量的渗出物。

高致病性禽流感感染会导致剧烈死亡，最急性病死鸡主要表现为无明显病理学变化，各个脏器正常。发病时间较长的病死鸡，脏器病变较为严重，表现为头部肿大，鸡冠、肉髯肿大为原来1～2倍。皮下组织存在淡黄色的胶样浸润，皮下组织出血明显。将胸腔腹腔打开后，可以发现脂肪表面存在紫红色的出血病斑。心包内存在大量积液，心外膜存在点状或条状出血坏死，心肌柔软。肌胃角质层下出血明显，腺胃和肌胃交界处能看到带状或环状的出血。病死鸡肠道充血出血，主要表现为十二指肠、盲肠、扁桃体、泄殖腔充血出血，肝脏、脾脏、肾脏充血肿大，在脏器表面还能发现白色的坏死组织。呼吸道表面存在大量炎性分泌物，胸腺萎缩，在表面有不同程度的点状斑块状出血。法氏囊萎缩明显，外观呈现黄色，充血出血。产蛋鸡卵泡充血出血，卵黄液稀薄，有的病死鸡因卵黄破裂出现卵黄性腹膜炎，将胸腔打开后，发现内部充满稀薄的卵黄。输卵管打开后，表面水肿充血，内部存在浆液性、粘液性或干酪样物质。

4 诊断

禽流感亚型众多且基因突变、重组、重排，使其变异极快，导致毒株的变异性也千差万别，早期快速诊断和血清学检测无疑是预防、控制禽流感的前提条件。我国动物流感研究中心（ARIC）在近年相继建立了禽流感琼脂扩散（AGP）、血凝抑制试验（HI）、神经氨酸酶抑制试验（NI）、间接酶联免疫吸附试验（ELISA）等血清学诊断技术及分子诊断技术（RIPCR），满足了我国禽流感流行病学监测及现地诊断与防治的迫切要求。

4.1 临床诊断

禽流感的临床症状和剖检变化因禽的日龄、种类和发病感染情况不同而异。高致病性AIV感染主要表现为暴发型，发病率和病死率较高，均可达到100%。低致病性AIV感染基本无特征性的临床症状，病死率为5%～15%。本病仅根据临床症状和剖检变化很难做出准确的诊断，必须依靠病原的分离与鉴定。

4.2 病毒的分离培养

AIV在鸡胚中生长良好，将疑似病料经适当处理接种其中，分离培养病毒。若检测出有凝血活性，可进一步确定分型；若为阴性，则认为病毒分离阴性。

4.3 毒力的测定

目前，常用的方法是静脉接种致病指数（IVPI）和脑内接种致死指数（ICPI）的测定。若IVPI＞1.2，可判定为高致病性毒株；ICPI＜0.5为缓发型毒株，ICPI＞1.5为高致病力毒株。

5 防治

禽流感发病急，死亡快，一旦发生损失较大，应重视对该病的预防，因此要加强饲养管理。管理人员进出养殖场时，应该更换消毒服装。进出养殖场的车辆进行定期消毒。养殖场内部消毒剂可以选择使用二氯异氰尿酸钠或二氧化氯，轮换交替消毒，避免产生耐药性。及时将养殖场内部的粪便、污染的垫料清理出养殖场，集中无害化处理。另外，应该制定严格的检疫制度，科学引种，引种的鸡必须进行严格的检疫，确保健康后才能进入养殖场。同时，还要严格控制养殖环境，控制养殖密度，强化鸡舍通风换气，防寒保暖，降低多种不良因素的影响，提高鸡群抵抗能力[3]。

6 结束语

禽流感一年四季均可能发病，其高致病性、烈性传染性危害严重，会带来较大的经济损失。因此，要加强对该病的防控，强化饲养管理，制定严格的检疫制度，保证良好的养殖环境，降低禽流感的发病率。