中药材GAP体系下白芨组织培养与栽植技术

潘正伟

（大理农林职业技术学院，云南 大理 671003）

1 白芨形态特征与作用

白芨［Bletilla striata（Thunb.）Reichb.f.］是兰科白芨属多年生草本植物，株高33～50 cm。肉质块茎，乳白色，具1～3叉呈菱角状；根系为须根，常并生；总状花序，常有花2～7朵，花为淡紫红色，不整齐；蒴果呈柱状，外具纵棱，两端微尖；种子极小，多数。花期5—7月，果期8—9月。白芨有2种生态类型，一种花白色稍黄，叶条状披针形，为狭叶白芨。另一种为紫花白芨，紫花白芨又有大种白芨、小种白芨之分，其中以大种白芨块茎产量较高［1］。

白芨是一种重要的传统中药，主要分布在云南、贵州等省区。此外，安徽、江西等省区也有少量分布。几乎遍布于云南省海拔1 600～2 600 m的林下、沟谷岩缝中、潮湿山坡与岩石上，喜温暖，耐阴性强。药用假鳞茎，10月茎叶黄枯时采收。性微寒，味苦，用于治疗肺伤咳血、外伤出血、溃疡疼痛等。《本草纲目》载：“气味苦辛，无毒。主治痈疮恶疮败疽，伤阴死肌，胃中邪气，贼风鬼击，痱缓不收。除白癣疥虫。结热不消，阴下痿，面上皯疱，令人肌滑。止惊邪血邪血疬，痢疾风痹，赤眼症结，温热疟疾，发背瘰疬，肠风痒痿，扑损，刀箭疮，汤火疮，生肌止痛。止肺血。附方：跌打骨折：酒调白芨末二钱服，其功不减自然铜、古铢钱也”。江西省、湖南省与云南省近15家中药厂用白芨假鳞茎制白芨片、粉、糖浆与冲剂。白芨现已列入濒危野生保护植物，也是云南省地道药材及《中华人民共和国药典》2005年版收载药物。

2 白芨培育现状

目前，白芨繁殖方式主要有2种：种子繁殖、分株繁殖。野生白芨种子非常细小，千粒重仅为0.005 6 g，缺乏营养，常规播种育苗出苗率低，生长缓慢。有的采用分株繁殖，分株繁殖虽然速度快、繁殖系数高，但是繁殖原材料耗费较多，难以适应大规模生产的需要。

自新世纪以来，国家把传统的种植、养殖业与现代化生产质量管理规范（Good Agricultural Practice，GAP）相结合，加速了我国传统中药现代化生产管理。2002年7月我国正式颁布《中药材生产质量管理规范》（GAP），2003年9月颁布《认证管理办法》（试行）和《中药材GAP认证检查评定标准》（试行）。此规范即大家平时所说的中药材GAP（GAP for Traditional Chinese Medicine）。自提出中药材GAP技术概念以来，国内众多中药材生产基地、相关专业高职院校、科研院所和制药企业就踏上了探索实施中药材GAP之路。从2003年11月1日起国家食品药品监督管理局已正式受理中药材GAP认证申请。中药材GAP技术不仅能继承发扬传统的种植、养殖技术和经验，而且可使按规范生产出的中药材达到“优质、高产、稳定、可控”的要求，使中药材走出国门，缩小与国外发达国家之间的差距。因此，白芨开展GAP技术栽培生产具有重大意义。而白芨组织培养是白芨GAP栽培种植的前提，所以白芨组织培养是目前及将来最佳的一种繁殖方式［2］。

3 白芨组织培养技术

3.1 外植体的选择

外植体选择健康白芨种子。

3.2 培养基及培养条件

①无菌萌发的培养基为Kundson和MS培养基；②愈伤组织诱导培养基为MS+2，4-D 1.1 mg/L+KT 0.12 mg/L；③分化培养基为MS+KT 2.04 mg/L；④生根培养基为MS+IBA 2.05 mg/L+NAA 1.84 mg/L。分化形成苗后连续光照。培养基均添加蔗糖22 g、琼脂8 g［3］。

3.3 培养方法

首先，种子采集于成熟而未开裂的蒴果，外果皮常规消毒，在无菌状态下取出种子，接种于Kundson培养基上，30 d后可直接形成幼苗。

其次，种子萌发后，在②号愈伤组织诱导培养基上快速形成白色或淡绿色的愈伤组织。

然后，丛生芽体的分化将上述愈伤组织转入分化培养基③上，12～16 d后出现大量丛生芽体，光照后丛生芽转变为绿色，并可不断增殖。

再次，生根培养将丛生芽体切割后转接到④号生根培养基上，可长出粗壮根系，如将愈伤组织转入MS基本培养基中也可以分化出芽体和根系，但是生长速度缓慢，一粒种子经过上述多次转移培养，可获得大量植株，每株3～5枚叶片。

最后，试管苗移栽。白芨组培苗在培养瓶中长至4～6 cm，可出瓶练苗。为使试管苗适应新的自然环境，要将试管苗放在温室内炼苗4～6 d，以提高小苗的抗病能力。白芨练苗苗床pH值呈弱酸性，一般要求为5.8～6.8。移栽基质可以使用天然腐殖质，或35%珍珠岩+蛭石35%+泥炭15%+无菌壤土15%，只要管理到位，成活率可达90%。栽苗前，可用高锰酸钾1 000倍液喷洒消毒［4］。

4 白芨组培苗GAP栽培技术要点

4.1 净苗

出瓶取苗要操作规范，否则根部受损将严重影响成活率。开瓶后向瓶内注入1/3清水，摇晃使白芨苗与营养液分开后，将瓶内苗和营养液一起倒入洗苗盆内，用清水冲洗干净苗根部的营养液。若清洗不干净，用小刷轻刷后用清水冲洗干净，将洗干净的苗根部进行消毒。不能用手直接搓揉苗根部。如果苗根部有部分交缠，不可强行分开，以免拉扯造成伤口感染，整体栽种即可。

4.2 消毒

苗根部用600～1 200倍甲基托布津或多菌灵液浸泡根部10～15 min，阴干，植入消毒腐熟的腐殖质中。

4.3 栽种

苗床要求为高墒，防止生理积水。栽苗时，根部覆盖厚度以盖住球茎为宜，覆土太厚将严重影响根部生长及有氧呼吸。栽种完毕后，浇足定根水，打开遮阳网，调节空气湿度至85%～90%，适当通风，并使环境温度维持在22～26℃。并每隔两三天喷施一次，当移栽小苗新叶展开、苗根伸长后，每月用叶面肥稀释液喷施追肥，促进生长发育［5］。

4.4 湿度控制

白芨属于阴生植物，空气湿度要求为85%～90%，刚栽种的幼苗需要足够的叶面水，基质要求半湿半干但不能形成积水，空气湿度的控制可利用雾化水加强或者减少。白芨喜湿润、怕积水，积水过多过久会使根茎因为无氧呼吸使根腐烂而死。因此，基质的透气性和保湿性决定着幼苗的成活率。

4.5 温度控制

通常白芨生长的最适合温度为25～30℃，所以要通过大棚的通风口大小来提供，调节合适的温度。夏季高温可用喷雾降温。白芨驯化3～5个月后，春季外界气温逐渐回升，有利于组培苗适应自然环境，最宜移栽。但由于各地土质营养成分含量不同，气温也存在差异，因此，温度管理和每年的长势均存在很大的差异。

4.6 光照

大棚需盖上透光率为75%的遮阴网。冬季气温下降后，可根据情况去掉遮阳网，具体根据当地实际温度来决定。

4.7 中后期病虫害防治

4.7.1 常见病害的防治。白芨病害主要有叶斑灰霉病、黑斑病、根腐病等。①为防治叶斑灰霉病，建议清除病株残体，发病早期摘除下部病叶；及时采取药剂防治，可以轮换使用以下药剂：50%多菌灵可湿性粉剂600～800倍液、75%百菌清可湿性粉剂500～700倍液、65%代森锌可湿性粉剂500～600倍液喷施。②白芨较易发生黑斑病，病菌以菌丝体或分生孢子盘在枯枝或土壤中越冬。翌年5月中下旬开始侵染发病，7—9月为发病盛期。孢子借风、雨或昆虫传播、扩大再侵染。为有效防治白芨黑斑病，一般可以用50%多菌灵500～600倍液或70%甲基托布津可湿性粉剂800～1 000倍液浸种，也可在栽苗时浸苗基部10～15 min。③雨水过多是根腐病流行的主要条件，降雨早而多的年份，发病早而重。低洼积水、通风不良、光照不足、肥水不当等条件有利于发病。根腐病的防治以预防为主，发病后无根治的方法。一般可用50%多菌灵600～800倍液或50%百菌清600～800倍液喷施，苗床加强通风排水。

4.7.2 常见虫害的防治。白芨虫害主要为地下害虫，可食害假鳞茎、幼芽、根茎，造成缺苗死苗，地下害虫主要有蝼蛄、蛴螬、金针虫和地老虎。①蛴螬即金龟子的幼虫，取食作物的幼根、茎的地下部分，常将根部咬伤或咬断，使幼苗枯萎死亡。可在蛴螬发生严重区块，栽种前采取拌肥、闷种等措施，用50%辛硫磷乳剂1 000倍液将种苗闷2～5 h后栽种，来防治蛴螬危害。②金针虫即叩甲的幼虫，咬食块茎，将幼根茎食成小孔，致使死苗、缺苗或引起块茎腐烂。可在金针虫发生严重区块，与防治蛴螬相似，用拌肥、闷种等措施进行处理。③蝼蛄在地下咬食刚播下的种子或发芽的种子，并取食嫩茎、根。危害特点是将白芨地下茎咬成乱麻状，同时蝼蛄在地表层活动，形成隧道，使幼苗根与土壤分离，造成幼苗凋枯死亡。在蝼蛄发生严重区块，以毒饵引诱捕杀为主进行防治。④地老虎幼虫食性很杂，白天潜伏土中，夜晚出土危害，可将茎基部咬断，常造成白芨缺苗断条。在地老虎发生严重区块，以深翻灭卵、除草杀虫和药剂防治相结合的办法进行防治。还可用90%敌百虫800倍液或75%辛硫磷1 200～1 600倍液灌根。

5 结语

发展白芨GAP生产体系，要从白芨组织培养操作开始，并加强田间栽培管理，才有利于不断提升白芨种植技术，促进白芨栽培事业不断发展壮大。一方面，能保证白芨的质量，实现安全、有效、稳定，做到质量可控；另一方面，可扩大生产规模化，在产量上能满足制药企业对白芨原料需求的同时，保证市场价格相对稳定，保证种植户和商家的利益平衡，为白芨生产持续发展保驾护航。