CD47在胃癌组织中的表达及意义

412000湖南省株洲市中心医院普外一科

胃癌是最常见的恶性肿瘤之一，约90%胃癌患者就诊时已是进展期，根治性手术后5年生存率仅为10%～49%[1]。随着对肿瘤免疫治疗的研究，肿瘤的发生发展与机体的免疫功能密切相关，肿瘤细胞能够被巨噬细胞吞噬，但在肿瘤免疫中，肿瘤细胞可逃避机体的免疫监视，得以发生发展[2]。CD47是一种广泛表达于细胞膜表面的蛋白质，使肿瘤细胞表达“别吃我”信号逃避免疫监视。本研究检测CD47在胃癌中的表达及与临床参数关系，以探讨其在胃癌发生发展的中的意义。

资料与方法

2013年6月-2015年5月选择因胃癌行胃癌根治术后的病理标本50例，同时选取癌旁正常组织(安全界外1 cm)病理标本作为对照。其中男28例，女22例；年龄45～81岁，平均(60.5±14.2)岁；其中胃窦癌36例，胃体癌14例，均为胃腺癌；其中高分化14例，中分化16例，低分化20例。根据美国癌症联合委员会公布的胃癌TNM分期，T1期3例，T2期12例，T3期19例，T4期16例。

检测方法：在胃癌组织及癌旁组织石蜡标本上取材、切片，免疫组化法检测切片中CD47蛋白的表达水平。CD47单克隆抗体是美国Abcam公司产品，配置CD47抗体浓度1∶300。按实验说明操作，切片脱蜡至水，浸于0.01 mol/L枸橼酸缓冲液中加热煮沸修复，冷却，滴入内源性过氧化物酶阻断剂，水洗，置入磷酸盐缓冲液浸泡，分别滴入CD47抗体，低温下过夜，再滴酶标羊抗鼠/兔IgG联合物，37℃温箱中孵育，经显色、复染、脱水、透明处理，封片、镜检。

判断标准：由两位高年资病理科医师双盲评分，在每张切片上随机选取10个(×400)视野范围下计数，据阳性细胞数、染色强度区分阳性等级。①阳性细胞数＞51%为3分，11%～50%为2分，1%～10%为1分，＜1%为0分；②染色强度：强阳性3分，中等阳性2分，弱阳性1分，阴性为0分。得分为①+②。3～6分为阳性，＜3分为阴性。

统计学方法：采用SPSS 17.0分析数据，计量资料采用(±s)表示，采用t检验；计数资料采用%表示，采用χ2检验。P＜0.05差异有统计学意义。

结 果

CD47在胃癌组织中阳性表达率达56.0%，癌旁组织中阳性表达率为28.0%，两者差异有统计学意义(P＜0.01)。研究分析CD47与患者年龄、性别、肿瘤大小、淋巴结转移、肿瘤分化程度、肿瘤浸润深度(T分期)的关系，结果显示CD47阳性表达与胃癌分化程度、淋巴结转移、肿瘤浸润深度相关。

讨 论

免疫系统通过识别并清除肿瘤细胞，对抑制肿瘤的发生发展有重要作用。巨噬细胞能维持细胞稳态、防御病原体及参与免疫应答等[3]，其直接杀伤肿瘤细胞，或通过呈递肿瘤相关抗原诱导机体免疫应答清除肿瘤细胞，在肿瘤免疫中发挥重要作用。随着肿瘤免疫治疗研究迅速进展，有望从根本上治愈肿瘤，胃癌的免疫治疗是一个治疗的热点。CD47在胃癌细胞的凋亡和免疫逃逸中扮演重要角色，本研究通过探索CD47在胃癌组织表达情况，探讨其与胃癌发生发展的关系。

CD47又称整合素相关蛋白[4]，广泛表达于细胞膜表面，是免疫球蛋白超家族的一员。CD47的配体为信号调节蛋白α链(SIRPα)，是一种跨膜蛋白，CD47与SIRPα的结合产生抑制抗性信号，下调巨噬细胞的吞噬作用，对免疫系统产生抑制作用，使肿瘤细胞逃避巨噬细胞的吞噬，表达“别吃我”信号。本研究检测CD47显示，胃癌组织中CD47表达明显高于癌旁组织，说明胃癌细胞较胃正常细胞高表达CD47，通过下调巨噬细胞对胃癌细胞吞噬，产生免疫逃逸。CD47表达与胃癌组织分化程度、浸润深度及淋巴结转移相关，研究发现CD47表达阳性，胃癌组织分化程度低、浸润程度深、淋巴结有转移，病期晚，预后差，说明CD47阳性表达与胃癌恶性程度呈正相关[5]，促进了胃癌的发生和发展。

CD47在胃癌组织中高表达，促使胃癌细胞免疫逃避，导致肿瘤浸润深、淋巴转移等不良预后。CD47成为胃癌潜在治疗靶点来消除胃癌细胞[6]，采用抗体或拮抗剂阻断CD47-SIRPα信号通路，恢复免疫细胞功能，清除肿瘤，成为胃癌免疫治疗的新策略。

综上所述，CD47在胃癌组织中的表达与胃癌发生、生长相关，是有潜在价值的肿瘤相关标志物，可能为胃癌治疗中使用针对性的免疫抑制剂提供潜在靶点。