尿MCP—1、细胞免疫水平检测对狼疮性肾炎患者病情评估的价值及相关性研究

谢鸣部+王芳

[摘要] 目的 探讨尿单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、细胞免疫水平检测对狼疮性肾炎（LN）患者病情评估的价值及相关性。 方法 回顾性分析2011年9月～2016年9月60例就诊于我院肾内科的LN患者临床资料，依据系统性红斑狼疮疾病活动指数（SLE-DAI）将60例患者分为活动组（SLE-DAI评分≥10分，n=37）和稳定组（SLE-DAI评分<10分，n=23）；以同时期30例健康志愿者作为健康组。比较三组受试者尿MCP-1水平和外周血T细胞亚群（CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）检测结果差异；经Pearson线性相关分析法分析尿MCP-1、T细胞亚群水平与LN患者病情严重程度的相关性。 结果 三组受试者尿MCP-1、外周血CD8+检测结果显示：活动组>稳定组>健康组（P<0.05）；外周血CD4+、CD4+/CD8+檢测结果则显示：活动组<稳定组<健康组（P<0.05）；三组外周血CD3+检测差异无统计学意义（P>0.05）。Pearson线性相关分析结果显示：尿MCP-1水平、CD8+水平与SLE-DAI评分呈正相关，CD4+、CD4+/CD8+水平与SLE-DAI评分呈负相关（P<0.05），CD3+水平与SLE-DAI评分无明显相关性（P>0.05）。 结论 尿MCP-1和T细胞亚群水平与LN患者病情严重程度关系密切，可作为LN诊断和病情评估的敏感指标。

[关键词] 尿MCP-1；T细胞亚群；LN；相关性

[中图分类号] R446.1；R446.6 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2017）34-0004-03

The value of the detection of urinary MCP-1 and cellular immunity levels in evaluating the condition of patients with lupus nephritis and correlation study

XIE Mingbu WANG Fang

Department of Nephrology，Ningde Municipal Hospital Affiliated to Fujian Medical University，Ningde 352100，China

[Abstract] Objective To investigate the value of the detection of urinary monocyte chemoattractant protein-1（MCP-1）and cellular immunity in evaluating the condition of patients with lupus nephritis（LN） and the correlation. Methods The clinical data of 60 patients with LN treated in department of nephrology of our hospital from September 2011 to September 2016 were retrospectively analyzed. The patients were divided into active group（SLE-DAI score≥10 points， n=37） and stable group（SLE-DAI score<10 points， n=23）， according to SLE-DAI. And 30 healthy volunteers at the same period were chosen as the healthy group. The differences in the levels of urinary MCP-1 and peripheral blood T lymphocyte subsets（CD3+， CD4+， CD8+， CD4+/CD8+） were compared among three groups. Pearson's linear correlation analysis was used to analyze the correlation of urinary MCP-1 and T cell subsets levels with the severity of LN patients. Results The results of urine MCP-1 and CD8+ in peripheral blood in the three groups showed active group> stable group> healthy group（P<0.05）. The results of peripheral blood CD4+， CD4+/CD8+ detection showed active group0.05）. Pearson linear correlation analysis showed that there was a positive correlation between urinary MCP-1 level and CD8+ level with SLE-DAI score， and CD4+ and CD4+/CD8+ levels were negatively correlated with SLE-DAI score（P<0.05）.There was no significant correlation between CD3+ level and SLE-DAI score（P>0.05）. Conclusion The levels of urinary MCP-1 and T cell subsets are closely related to the severity of LN and may be used as a sensitive index for the diagnosis and assessment of LN.

[Key words] Urinary MCP-1； T cell subsets； LN； Correlation

狼疮性肾炎（LN）是指系统性红斑狼疮（SLE）患者合并肾脏免疫性损伤的一种疾病，常伴随蛋白尿、肾功能不全等临床症状，其肾脏损伤程度与患者治疗方案的选择和预后密切相关[1]。目前诊断LN的“金标准”仍为病理学活检，但多次侵入性操作给患者带来较大痛苦，作为一种评估肾脏损伤程度的检查方法并不十分理想[2]。因此，寻找合适的生物学或免疫学指标对LN病情进行准确评估具有重要的临床意义。本研究旨在探讨尿单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、T细胞亚群水平在LN诊断和病情评估中的应用价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性分析2011年9月～2016年9月于我院肾内科就诊的60例LN患者的临床资料。纳入标准[3]：年龄18～55岁；符合2009年美国风湿病学会（ACR）年会上SLE国际临床协作组提出的SLE分类新标准[4]；持续性蛋白尿﹥0.5 g/d或细胞管型尿；经病理学活检证实有肾脏损伤；患者知情同意。排除标准[5]：合并糖尿病、高血压或其他可引起肾脏损伤疾病者；临床资料不全者。依据系统性红斑狼疮疾病活动指数（SLE-DAI）[6]将60例患者分为活动组（SLE-DAI评分≥10分，n=37）和稳定组（SLE-DAI评分<10分，n=23）。活动组男7例，女30例，平均年龄（33.24±6.34）岁；稳定组中男4例，女19例，平均年龄（32.17±5.86）岁。以同时期30例健康志愿者作为健康组，其中男5例，女25例，平均年龄（33.82±6.63）岁；各项体检指标无异常，均签署知情同意书。三组受试者在性别（χ2=0.061，P>0.05）、年龄（F=0.448，P>0.05）等方面比较差异无统计学意义（P>0.05）。具有可比性。

1.2 检测方法

（1）尿MCP-1水平检测：留取所有受试者随机尿液30 mL，常规离心分离取上清液，于-70℃条件下放置保存待检，采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定MCP-1水平，试剂盒由上海瓦兰生物科技有限公司提供。（2）T细胞亚群水平检测：采集所有受试者清晨空腹肘静脉血3 mL，使用美国BD Biosciences FACSVerse智能掌控型流式细胞分析仪测定CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平。

1.3 统计学方法

用统计学软件SPSS19.0进行数据分析，计量资料以（x±s）表示，采用t检验，计数资料以（%）表示，采用χ2检验；相关性分析采用Pearson线性相关分析法，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组受试者尿MCP-1水平比较

活动组和稳定组患者的尿MCP-1水平明显高于健康组（t=27.673、11.273，P<0.05），且活动组高于稳定组（t=16.419，P<0.05），见表1。

2.2 三组受试者外周血T细胞亚群水平比较

活动组患者CD3+水平低于稳定组和健康组（t=4.233、5.270，P<0.05），稳定组和健康组比较无显著差异（t=0.721，P>0.05）；活动组、稳定组患者CD4+水平均低于健康组（t=5.661、2.721，P<0.05），且活动组低于稳定组（t=2.355，P<0.05）；活动组、稳定组患者CD8+水平均高于健康组（t=7.264、4.166，P<0.05），且活动组高于稳定组（t=2.662，P<0.05）；活动组、稳定组患者CD4+/CD8+水平均低于健康组（t=8.932、4.124，P<0.05），且活动组低于稳定组（t=3.986，P<0.05）。见表2。

2.3尿MCP-1水平、外周血T细胞亚群与LN患者SLE-DAI评分的相关性分析

经Pearson相关性分析，尿MCP-1水平、CD8+水平与SLE-DAI评分呈正相关，CD4+、CD4+/CD8+水平与SLE-DAI评分呈负相关（P<0.05），CD3+水平与SLE-DAI评分无明显相关性（P>0.05）。见表3。

3 讨论

SLE是一种多发于青年女性，与遗传、食物、紫外线照射等因素相关的自身免疫性疾病，目前病因尚不明确。LN的发生可能与免疫复合物在肾脏沉积或活性物质作用于肾脏有关。病理检查作为一种有创检查，虽对LN诊断和疾病进展有准确的评估，但同时对患者造成痛苦。因此，寻找灵敏的生物学、免疫学指标代替病理检查具有重要意义[7]。

MCP-1是一种主要作用于单核细胞、淋巴细胞的小分子蛋白质，尤其可诱导单核细胞中溶酶体酶的释放和超氧离子的产生，通过促进其定向迁移和功能活化对LN患者的肾脏造成一定损伤[8]。本研究对所有受试者的尿MCP-1水平进行了测定，以健康志愿者作为参照物，发现处于活动期的LN患者尿MCP-1水平高于稳定期患者，且两组患者均高于健康者，与高玉琴等[9]研究结果基本一致。该学者认为，LN患者由于肾脏损伤可导致尿MCP-1水平上升，且这一变化早于病理组织改变，因而尿MCP-1的检测对LN的病情进展评判有积极意义。也有研究发现[10]，尿MCP-1水平异常上升会加重单核细胞对肾脏的损伤，形成恶性循环，进而促进疾病进展，不利于病情转归。为进一步了解尿MCP-1水平与疾病严重程度的联系，本研究就尿MCP-1水平与SLE-DAI评分的相关性展开分析。研究结果显示，尿MCP-1水平与SLE-DAI评分呈正相关，进一步证实了尿MCP-1水平可较为准确地反映LN患者的病情严重程度，与以往的研究报道一致[11]。

LN是一种与免疫功能损伤有关的疾病，主要表现为外周血CD4+、CD8+水平的异常变化，导致T细胞亚群比例失衡，进而加重免疫功能缺失[12]。本研究中，与健康者比较，LN患者CD4+降低，CD8+升高，CD4+/CD8+水平则降低，且活动组患者改变幅度大于稳定组，表明T细胞亚群水平与LN疾病活动度关系密切。吴君荣等[13]学者的研究指出，SLE是一种自身免疫性疾病，疾病导致的免疫细胞异常可能引起肾脏损伤，而肾炎的发生也可加重免疫功能失调，进而加重病情。本研究还探讨了T细胞亚群水平与SLE-DAI评分的相关性，结果发现CD8+水平与SLE-DAI评分呈正相关，而CD4+、CD4+/CD8+水平则与之呈负相关，说明T细胞亚群确实与LN患者的病情严重程度紧密相关。据相关文献报道[14]，LN患者的细胞免疫功能随病情加重而发生改变，CD4+细胞作为T细胞免疫的重要组成部分明显下降，导致CD8+细胞活性降低，進而引起其数量上升。因而，T细胞亚群水平与LN患者病情严重程度紧密联系，临床上可将其作为敏感的免疫学检测指标，在LN的诊断和病情评估中发挥重要作用[15]。endprint

綜上所述，尿MCP-1和T细胞亚群水平与LN病情严重程度关系密切，且检测便利，可作为评估LN疾病活动度的重要生物学和免疫学指标。

[参考文献]

[1] 钟正霞，罗茜，裘志成，等. 尿足细胞B7-1分子的检测在原发性肾病综合征患者中的价值[J].中外医学研究，2015，13（3）：65-66.

[2] 商蒙蒙，刘聪聪，李杰，等.声触诊组织定量技术在狼疮性肾炎诊断中的应用研究[J].中国超声医学杂志，2015， 31（7）：619-621.

[3] 谭德敏，向阳，谭千林，等.狼疮性肾炎患者外周血树突状细胞功能的研究[J].中国免疫学杂志，2016，32（4）：570-572.

[4] 郭桂梅，何威逊.系统性红斑狼疮诊断标准及治疗进展[J].中华实用儿科临床杂志，2015，30（13）：978-982.

[5] 王超，杨翠，汤水福，等.汤水福辨治狼疮性肾炎的临床经验[J].广州中医药大学学报，2017，34（4）：592-594.

[6] 郑晗晗，江学良.美沙拉嗪栓每日1次与每日2次给药治疗轻中度活动期溃疡性直肠炎的临床疗效比较[J].中国全科医学，2016，19（11）：1267-1271.

[7] 李海英，左灿，王艳兰，等.血清胱抑素C及同型半胱氨酸和视黄醇结合蛋白联合检测在狼疮性肾炎诊断中的意义[J].广东医学，2014，35（6）：864-866.

[8] 邝建玉，瞿志军，赵蔚，等.RANTES、MCP-1和SDF-1β在正常人体和AIDS患者体内含量的对比研究[J].中国感染控制杂志，2017，16（9）：841-844.

[9] 高玉琴，邓之奎，李元媛，等.MCP-1在狼疮性肾炎患者血浆及尿中的检测水平及意义[J].临床和实验医学杂志，2014，13（19）：1600-1603.

[10] 徐瑞，卢文，钱浩，等.TLR9、Mcp-1在狼疮肾炎患者肾组织中的表达及临床意义[J].安徽医科大学学报，2017，52（6）：863-868.

[11] 宋欣颖，马冰，王晓明，等.单核细胞趋化蛋白-1启动子-2518A/G位点基因多态性与狼疮性肾炎关联性的Meta分析[J].中国全科医学，2014，17（10）：1172-1175， 1179.

[12] 刘抗寒，刘芳，梁玉梅，等.外周血CD4+T 细胞组蛋白乙酰化在狼疮性肾炎中的作用[J].重庆医学，2015，44（30）：4193-4195.

[13] 吴君荣，秦雪，邓燕，等.狼疮性肾炎患者免疫功能指标的检测[J].临床检验杂志，2013，31（12）：911-912.

[14] 孙吉平，赵菲，张文静，等.淋巴细胞表型和细胞因子表达谱与Ⅳ型狼疮性肾炎患者免疫学发病机制[J].中南大学学报（医学版），2014，39（5）：458-464.

[15] 陈昊，冯辉.调节性T细胞在免疫性肾病中的作用及临床应用研究进展[J].免疫学杂志，2017，33（2）：179-184.

（收稿日期：2017-10-05）endprint