王守星++路东涛++赵桂勇++崔玉红
摘要 鸡样品采集技术是做好疫病防控工作的一项基本技能,包括鸡血液采集、喉拭子和泄殖腔拭子采集、粪便和环境污染物采集。尤其是从事疫病监测和疫病诊断的技术人员,必须熟练掌握该技术。为提高基层防疫队伍基本技能,使其尽快准确掌握样品采集规范操作技术,本文从事前准备、采集操作要领和注意事项等方面进行详细阐述,以供参考。
关键词 鸡;样品采集;操作技术
中图分类号 S831 文献标识码 B 文章编号 1007-5739(2017)23-0230-02
在进行鸡的疫病监测和诊断时,经常需要采集鸡的血液、喉拭子、泄殖腔拭子、粪便和环境污染物等,熟练掌握鸡样品采集操作技术,对快速准确地诊断鸡病、做好鸡病预警预报工作、及时扑灭疫情具有重要意义。为使从事动物疫病防控工作的初学者尽快掌握本项技术,提高工作效率,做到样品采集快速准确、应激损失降到最低、安全防护科学到位,现将鸡样品采集的规范操作技术阐述如下。
1 样品采集前的准备工作
一是监测人员准备好防护用品,例如穿戴好隔离衣、防护帽、胶靴或鞋套、乳胶手套、口罩和护目镜等。二是备齐样品采集器械和用品,例如5 mL一次性注射器、1.5 mL离心管、灭菌试管、pH值为7.4的磷酸缓冲液、酒精棉球、碘酊棉球、消毒剂、保温箱或泡沫箱、热水袋、冰袋、自封袋、胶布、封口膜、封条、皮筋、无菌棉签、剪刀、笔、记号笔和采样单等[1]。三是组织好抓鸡人员,准备好高度适宜的采血台或桌椅。
2 鸡翅静脉采血技术
2.1 采血操作
一是鸡的保定。抓鸡人员一手抓住鸡的2个翅膀,一手抓住鸡的2条腿,侧放于采血台(桌椅)上,鸡腹部朝向采血人员,鸡头在采血人员的左侧。二是采血部位用酒精消毒。调整注射器,使注射器内留出空隙,安装针头且使针头的斜面和注射器的刻度保持在同一面上。三是采血人员左手食指拨开覆盖在翅静脉上的羽毛,左手拇指压住翅静脉的近心端,左手心握住干棉球以备止血,右手持注射器,针头斜面朝上,从翅静脉近心端向远心端水平刺入,有回血时左手拇指压住针头基部,稍用力缓缓地吸血,达到2 mL时迅速拔出针头,左手拇指用干棉球按压止血,稍许把鸡放回原处。四是采好的血吸入少量空气,留有空隙以便血清析出,编号后针头斜向上,用皮筋捆绑和采样单一起放入有热水袋的保温箱(泡沫箱)内。五是将采血场地清扫干净并消毒。
2.2 注意事项
一是不注意个人防护,采血人员有时被鸡的粪便、羽毛和血等污染或抓伤。二是采血台或桌椅高度不合适,鸡的保定不合适,影响规范操作。三是注射器没有调整出空隙,不利于回血。四是刺入血管时,针头斜面不是向上的,导致针头紧贴血管壁,吸血困难。五是刺入血管方向不是逆血流方向,导致吸血不畅[2]。六是吸血时用力过大,血管局部严重收缩,导致吸血不畅。七是刺入血管时用力过大容易刺穿血管,刺入血管后没有用左手拇指按压固定针头,针头容易滑出,或采血完成后没有及时按压止血,以致形成大血包,影响采血工作进展。八是天冷时保温箱内未放置热水袋,血清析出时间延长,析出血清量少,采完血后不吸入少量空气,不留空隙,不利于血清析出。九是采血完成后手出汗,摘下手套立即用凉水洗手,易导致指关节疼痛。
3 鸡心脏采血技术
3.1 雏鸡心脏采血
采血人员左手抓鸡,右手持5 mL一次性注射器,平行颈椎从胸腔前口刺入,回抽见有回血时,缓慢回抽至需要的血量即可。
3.2 成年鸡心脏采血
一是侧卧保定采血。抓住鸡的2个翅膀及2条腿,右侧卧保定,在触及心搏动明显处,或胸骨脊前端至背部下凹处连线的中间消毒,垂直或稍向前方刺入2~3 cm,回抽见有回血时,缓慢回抽至需要的血量即可。二是仰卧保定采血。胸骨朝上,用手指压离嗉囊,露出胸前口,右手持5 mL一次性注射器,沿锁骨俯角刺入,顺着体中线方向水平穿行,直到刺入心脏,缓慢回抽至需要的血量即可[3]。
3.3 注意事项
一是心脏正确定位是采血成功的关键,切忌将针头刺入肺脏。二是抽血时顺应心脏的跳动频率,缓缓吸取,切忌抽血过快。
4 鸡喉拭子和泄殖腔拭子采集技術
抓鸡人员左手抓住鸡的2个翅膀,右手抓住鸡的2条腿,采样人员手持无菌棉签,一根棉签插入鸡喉头内转3圈,一根棉签插入泄殖腔内转3圈,然后插入1.5 mL离心管内,剪去露出的部分,盖紧离心管盖,做好标记。
5 鸡粪便样品采集技术
采集时,用灭菌棉签从泄殖腔或直肠黏膜上蘸取粪便,并立即投入灭菌的试管内密封,或在试管内加入少量pH值为7.4的磷酸缓冲液后封闭。若粪便样品用于细菌检测,应在鸡使用抗生素之前从泄殖腔或直肠采集新鲜粪便。若粪便样品用于寄生虫检测,应从鸡泄殖腔或直肠采集较多量的新鲜粪便,以保持虫体或虫体节片及虫卵的固有形态[4]。
6 环境污染物样品采集技术
在鸡舍内外,采集料渣、污水、粪便等若干份,放入无菌试管内,密封并做好标记。
7 样品保存
样品保存分为冷藏和冷冻2种,具体视情况而定。24 h内能及时检测的样品可冷藏保存,不能在24 h内及时检测的样品应在-20 ℃保存。若粪便样品用于寄生虫检测,则以冷藏不冻结状态保存为宜。
8 参考文献
[1] 王朝阳.智能生态养鸡系统关键技术研究[D].太原:中北大学,2016.
[2] 林雨鑫,孙明明,戴国俊,等.鸡抗球虫病的研究进展[J].中国畜牧兽医,2014,41(8):210-214.
[3] 王丽凤,张家超,马晨,等.鸡肠道微生物研究进展[J].动物营养学报,2013,25(3):494-502.
[4] 王洪进,张青禅,赵冬敏,等.我国近10年鸡白血病流行病学报道与研究分析[J].中国兽医学报,2011,31(2):292-296.