气相色谱法测定果汁中毒死蜱的残留量

韩 华 邰 亮 李红梅 杨抗震

1（宝应县产品质量监督检验所，江苏宝应225800）2（宝应县有机食品质量监督检验中心，江苏宝应225800）

3（国家有机食品质量监督检验中心（江苏），江苏宝应225800）

果汁是一种营养丰富、有利于人体健康的水果制品，但是在水果生长过程中，为了保证其产量和品质，农药被广泛使用，因而果汁也不可避免地有农药残留，果汁中农药残留的安全问题不容忽视。毒死蜱是世界上应用最广泛的有机磷杀虫剂之一，具有高效、低毒等特性，对害虫具有触杀、胃毒和熏蒸作用，作为农用杀虫剂被广泛应用于果树病虫害防治中，但是由于果农大量使用或使用方法不当，造成水果及其制品中的残留问题也日渐突出。

为了有效控制毒死蜱农药残留安全问题，进一步提高果汁的质量安全，开展果汁中毒死蜱残留的检测显得十分重要，而国家标准中关于农药残留的分析检测方法尚未细化到果汁，因此，本试验通过对试验条件的选择和优化，建立了一种可快速准确测定果汁中毒死蜱残留量的GC-FPD分析方法，并将建立的方法应用于能力验证，取得了满意的结果。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试样

果汁，能力验证样品，由中国检验检疫科学研究院测试评价中心（CNAS认可的能力验证提供者）提供。

1.1.2 仪器

7890A气相色谱仪，配火焰光度检测器（FPD）、化学工作站，美国Agilent公司；RV10 digtial旋转蒸发仪，德国IKA仪器公司；KQ-500DE超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司；MS digtal旋涡混合器，德国IKA仪器公司；实验室常用玻璃器皿等。

1.1.3 试剂

乙腈，色谱纯，上海安谱实验科技股份有限公司；氯化钠，分析纯，使用前于140℃烘烤4 h；丙酮，分析纯，重蒸，永华化学科技（江苏）有限公司；毒死蜱标准溶液，质量浓度为100 mg/L，o2si smart solutions提供；实验室用水为Milli-Q超纯水。

1.2 试验方法

1.2.1 样品处理

称取10.0 g左右（精确至0.000 1 g）摇匀后的果汁样品，置于100 mL比色管中，加入40 mL乙腈，摇匀后放入超声波清洗器中超声提取20 min，滤纸过滤，在滤液中加入7 g氯化钠，用旋涡混合器剧烈震荡1 min后，室温下静置30 min，使乙腈相和水相分层，吸取乙腈相10 mL，用旋转蒸发仪浓缩至近干，丙酮定容到2.0 mL，经孔径0.25 μm滤膜过滤后待测。

1.2.2 气相色谱分析条件

HP-5毛细管气相色谱柱，30 m×0.32 mm×0.25 μm（膜厚）；进样口温度200℃；检测器温度230℃；柱温，采用程序升温，初始温度80℃（保持2 min），以25℃/min的升温速率升温至230℃（保持10 min）。

载气为高纯氮，流速1.0 mL/min；燃气为氢气，流速75 mL/min；助燃气为空气，流速100 mL/min。

进样方式为不分流进样，进样体积1.0 μL，以保留时间定性，峰面积定量。

1.2.3 标准溶液的配制

将100 mg/L毒死蜱标准溶液用丙酮稀释成10 μg/mL的毒死蜱工作标准溶液，贮存于冰箱中，试验时根据实际需要稀释成相应的标准梯度溶液。

2 结果与讨论

2.1 样品前处理

提取溶剂方面，通过参考国家农业部标准NY/T 761—2008和徐陆妹、王丹等的文献，选择了乙腈作为提取溶剂。乙腈极性较强，可与水互溶，试验中，果汁样品经乙腈溶解，超声提取一定时间后加入适量的氯化钠，通过盐析作用将水脱去，这样既可以解决因果汁含水量较高造成提取难的问题，又能有效地减少杂质对检测的干扰，试验结果表明，乙腈的提取效果较好，同时获得了较高的回收率。

提取方法方面，试验中使用超声法代替匀浆法对样品进行提取，不仅操作简单，提取效率高，还可以避免交叉污染。

2.2 色谱条件

色谱柱的选择，由于毒死蜱极性较弱，根据气相色谱分析中色谱柱的“极性相似性”选择原理，本试验选用了弱极性的HP-5色谱柱；进样口温度采用了毒死蜱的沸点温度，程序升温选择了低初始柱温80℃开始，同时对载气流速、检测器温度、柱程序升温条件进行多次试验筛选后，最终确定了1.2.2色谱分析条件。毒死蜱标准溶液（200 ng/mL）色谱图见图1，含毒死蜱农残的果汁色谱图见图2。由图1、图2可知，在该条件下，毒死蜱的响应值较高，峰形较为对称，基线平稳，并且样品中杂质峰较少。

图1 毒死蜱标准溶液色谱图（200 ng/mL）

图2 含毒死蜱农药残留的果汁的色谱图

2.3 方法的线性范围和检出限

将10 μg/mL毒死蜱标准工作溶液用丙酮逐级稀释成 25 ng/mL、50 ng/mL、100 ng/mL、200 ng/mL、400 ng/mL的标准溶液，按照1.2.2色谱分析条件进行测定，以峰面积为纵坐标，质量浓度（ng/mL）为横坐标，绘制标准曲线，见图3。试验证明，毒死蜱在25 ng/mL～400 ng/mL之间线性关系良好，线性方程为y=2.537 44 x+2.213 59，相关系数为0.999 91，以信噪比等于3为标准，测得毒死蜱的检出限为0.012 mg/kg。

图3 毒死蜱的标准曲线

2.4 方法精密度

在空白果汁样品中以100 ng/mL的添加水平加入毒死蜱标准溶液，按照1.2.2色谱分析条件，重复测定6次，记录各测定次数的测定值，分别计算测定值的平均值和相对标准偏差，测定结果如表1所示。由表1可知，测定结果的RSD为1.75%，说明精密度良好，准确度较高。

表1 精密度试验结果（n=6）

2.5 加标回收率

在空白果汁样品中以50 ng/mL、100 ng/mL、200 ng/mL3个添加水平加入毒死蜱标准溶液，按照本方法规定的提取和检测条件测定其回收率，每个水平平行测定6次，测定结果如表2所示。由表2可知，添加在果汁样品中毒死蜱农药的回收率在91.3%～94.1%之间，RSD为2.66%～3.38%。

表2 回收率试验（n=6）

2.6 样品适用性

采用本研究检测方法对能力验证样品（果汁1，果汁2）中毒死蜱残留量进行检测，测定结果见表3。能力验证试验取得了满意的结果（|Z|≤2），说明该方法有着较好的准确性和实用性，适合果汁中毒死蜱农药残留的检测。

表3 果汁中毒死蜱残留量的测定结果

3 结论

本试验建立了测定果汁中毒死蜱残留量的GC-FPD方法。样品经乙腈超声提取后，旋转蒸发浓缩，选择HP-5毛细管气相色谱柱，用带火焰光度检测器的气相色谱仪定量测定。通过试验确证，该方法线性范围较宽，检测灵敏度、准确度及精密度较好，检出限较低，符合农药残留检测方法的要求，能够满足实际应用的需要。

［1］SIBEL，GULO.Simultaneous determination of various pesticides in fruit juices by HPLC-DAD ［J］.Food Control，2005（16）：87-92.

［2］贾慧娴，孙剑宁，张亮，等.毒死蜱在蔬菜、水果和土壤中残留动态的研究现状［J］.中国糖料，2008（2）：70-72.

［3］张雪莲，张耀海，焦必宁，等.分散液液微萃取-气相色谱联用检测果汁中有机磷类农药残留［J］.高校化学工程学报，2013，27（6）：974-979.

［4］中华人民共和国农业部.NY/T 761—2008蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定［S］.北京：中国农业出版社，2008.

［5］徐陆妹，楼冰冰.蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药的检测方法研究［J］. 中国卫生检验杂志，2007，17（5）：852-853.

［6］王丹.毛细管气相色谱测定浓缩果汁中甲胺磷的残留量［J］.化学工程与装备，2010（3）：146-147.