高寒地区几种浆果资源成分分析比对

高智涛，张巍，郭兴，王洪刚

(黑龙江省伊春林业科学院，黑龙江 伊春 153000)

高寒地区几种浆果资源成分分析比对

高智涛，张巍，郭兴，王洪刚

(黑龙江省伊春林业科学院，黑龙江 伊春 153000)

对小兴安岭宽叶蓝靛果、野生蓝靛果、蓝鸟、蓓蕾、野生笃斯5种宽叶蓝靛果果肉、果皮中的总糖、黄酮、单宁、SOD含量进行检测。结果表明，野生笃斯果皮中总糖含量最高达1.72mg/g；蓓蕾果皮中黄酮含量最高达1.88mg/g；野生蓝靛果果皮中单宁含量最高0.144mg/g；蓓蕾果肉中SOD含量最高达1903.921U/g。

宽叶蓝靛果；总糖；单宁；黄酮；SOD

蓝靛果(LoniceracaeruleaL. var.edulisTurcz. ex Herd.)是忍冬科，忍冬属蓝果忍冬的变种。蓝靛果中含有丰富的功能性物质，但是每个品种蓝靛果以及果皮、果肉中功能性物质的含量都有不相同[1]。本实验针对4种蓝靛果、野生笃斯等5种浆果的果皮、果肉中总糖、黄酮[2]、单宁、SOD含量进行分析[3]，得出总糖、黄酮、单宁、SOD含量最高的浆果品种。

1 试验材料

1.1 果实

野生宽叶蓝靛果，种源地为带岭林业局大青山海拔1200m；野生蓝靛果，种源地为五营林业局海拔400m；野生笃斯越桔采自红星林业局，库斯特林场。蓝鸟、蓓蕾为人工栽培品种。

1.2 试剂

蒽酮；芦丁；无水乙醇；无水甲醇；无水葡萄糖；浓硫酸；钨酸钠；钼酸钠；磷酸；盐酸；硫酸锂；溴水；无水碳酸钠；一水合没食子酸。

1.3 仪器

水浴锅；离心机；紫外分光光度计；电炉；超声波破碎仪。

2 试验方法

2.1 试验材料采摘及处理

果实采摘后放入塑封袋中带回，并放入冰箱中冷冻储藏，分析时将果实自然解冻，分离果皮及果肉并称重。

2.2 成分分析方法

总糖采用硫酸蒽酮法；黄酮采用芦丁法；单宁采用比色法；SOD采用双抗体夹心法。

2.2.1 硫酸蒽酮法

样品处理：取果皮、肉2g准确称量，加水100mL，进行超声波破碎处理，时间6s，间隔4s，总时间30min，功率250W，最后定容至100mL，取0.1mL样品蒸馏水定容至1mL，加入硫酸蒽酮试剂4mL，封口，准确煮沸10min，用流水冷却，室温放置10min，于620nm处比色，纯水空白对照。

硫酸蒽酮试剂制备：取2g蒽酮溶于1L浓硫酸中。现用现配，放置在棕色瓶中。

2.2.2 芦丁法测定黄酮

样品处理：取果皮、肉2g准确称量，无水乙醇定容25mL，超声波破碎处理，时间6s，间隔4s，总时间20min，功率400W，超声完成静止30min，取上清液1.0mL，水浴挥去乙醇，加甲醇定容至25mL，于360nm处测定吸光度值。

芦丁标准曲线制备：取芦丁5.0mg加甲醇定容100mL既得浓度50μg/mL标准液。

2.2.3 单宁含量测定

样品处理：取果皮、肉2.0g准确称量，用80mL纯水洗入100mL容量瓶中，放入沸水浴中提取30min，冷却定容，吸取2.0mL样品提取液，8000r/min离心4min，取上清液备用。吸取1.0mL式样提取液加水5.0mL、1.0mL钨酸钠-钼酸钠混合液和3.0mL碳酸钠，静止显色2h。

钨酸钠-钼酸钠混合液配置：50.0g钨酸钠，12.5g钼酸钠，用350mL纯水溶解到1000mL回流瓶中，加入25mL磷酸，50mL盐酸混匀，小火回流2h，在加入75g硫酸锂，25mL蒸馏水(滴入3～5滴溴水)，继续沸腾15min至溴水完全挥发，冷却后，转入500mL容量瓶定容，过滤置棕色瓶中保存，使用时稀释1倍，室温可保存半年。

碳酸钠溶液制备：称取37.5g无水碳酸钠溶于250mL温水中混匀冷却，稀释至500mL，过滤到储液瓶中备用。

没食子酸标准液：准确称取0.1100g一水合没食子酸，溶解并定容至100mL，此溶液为没食子酸浓度为1000mg/L，在冰箱中2～3℃可保存5天。

2.2.4 超氧化物歧化酶(SOD)测定

样品前处理：取果皮、肉1g精确称量，研磨，放入离心管中，定容10mL，4000r/min离心10min，取上清液备用。

加样：分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同)、待测样品孔。在待测样品孔中先加样品稀释液 40μL，然后再加待测样品10μL(样品最终稀释度为 5 倍)。

加酶：每孔加入酶标试剂 100μL，空白孔除外。

配液：将 20 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 20 倍稀释后备用。

洗涤：小心弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30s后弃去，如此重复 5 次，拍干。

显色：每孔先加入显色剂 A50μL，再加入显色剂 B50μL，轻轻震荡混匀，37℃避光显色 15 min。

终止：每孔加终止液 50μL，终止反应(此时蓝色立转黄色)。

测定：以空白孔调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。测定应在加终止液后 15 min以内进行。

3 结果分析

3.1 总糖含量

以葡糖糖标准液的浓度(C)为横坐标，吸光度值(A)为纵坐标，绘制标准曲线(图1)，得出回归方程。

图1 蓝靛果总糖测量标准曲线

Abs = K1×(C) + K0

K0=0.0091 K1=0.00673 R2=0.9995

图2 5种浆果果皮果肉总糖含量

将测定的蓝靛果吸光度值带入回归方程，经过计算得出5种蓝靛果的果皮中总糖含量(图2)依次为笃斯1.72mg/g>蓓蕾0.8mg/g>蓝鸟0.65mg/g>野生蓝靛果0.06mg/g>宽叶蓝靛果0.54mg/g；5种蓝靛果果肉中总糖含量依次为笃斯0.9mg/g>蓓蕾0.7mg/g>蓝鸟0.6mg/g>宽叶蓝靛果0.4mg/g>野生0.11mg/g。

3.2 黄酮含量

以芦丁标准液的浓度(C)为横坐标，吸光度值(A)为纵坐标，绘制标准曲线(图3)，得出回归方程。

图3 蓝靛果黄酮含量测量标准曲线

Abs = K1×(C) + K0

K0=0.09933 K1=0.2988 R2=0.9998

图4 5种浆果果皮果肉黄酮含量

将测定的蓝靛果吸光度值带入回归方程，经过计算得出5种蓝靛果的果皮中黄酮含量(图4)依次为蓓蕾1.88mg/g>野生蓝靛果1.46mg/g>宽叶蓝靛果1.36mg/g>蓝鸟1.35mg/g>笃斯1.29mg/g；5种蓝靛果果肉中黄酮含量依次为野生蓝靛果1.05mg/g>笃斯0.8mg/g>宽叶蓝靛果0.79mg/g>蓓蕾0.689mg/g>蓝鸟0.53mg/g。

3.3 单宁含量

以没食子酸浓标准液浓度(C)为横坐标，吸光度值(A)为纵坐标，绘制标准曲线图3，得出回归方程。

图5 蓝靛果单宁含量测量标准曲线

Abs = K1×(C) + K0

K0=-0.16649 K1=0.1432 R2=0.9995

图6 5种浆果果皮果肉单宁含量

将测定的蓝靛果吸光度值带入回归方程，经过计算得出5种蓝靛果的果皮中单宁含量(图6)依次为野生蓝靛果0.144mg/g>蓓蕾0.141mg/g>笃斯0.139mg/g>蓝鸟0.127mg/g>0.119 mg/g>宽叶蓝靛果0.119mg/g；5种蓝靛果果肉中单宁含量依次为野生蓝靛果0.110mg/g>笃斯0.105mg/g>蓓蕾0.084mg/g>宽叶蓝靛果0.071mg/g>蓝鸟0.067mg/g。

3.4 SOD含量

以标准物的浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，绘制标准曲线图4，得出归回方程。

y=127.79x-2.9408

R2=0.9901

根据样品的 OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与 OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的 OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度，经过计算得出5种蓝靛果果皮中SOD含量(图8)依次为笃斯1348.053U/g>蓓蕾1296.939 U/g>宽叶蓝靛果1284.160 U/g>蓝靛果1162.764 U/g>蓝鸟964.696 U/g。5种蓝靛果果肉中SOD含量依次为蓓蕾1903.921U/g>蓝鸟1756.968U/g>宽叶蓝靛果1750.578 U/g>笃斯1622.793 U/g>蓝靛果1526.953 U/g。

图7蓝靛果SOD含量测定标准曲线

图8 5种浆果果皮果肉SOD含量

4 结论

大多数果实的果皮跟果肉中营养物质的含量都不相同，通过此次分析可以明显看出蓝靛果果实中果皮、果肉的总糖、黄酮、单宁、SOD含量分布差异较大。5种浆果果皮中总糖含量最高为笃斯1.72mg/g，果肉中总糖含量最高为笃斯0.9mg/g；5种浆果果皮中黄酮含量最高为蓓蕾1.88mg/g,果肉中黄酮含量最高为野生蓝靛果1.05mg/g；5种浆果果皮中单宁含量最高为野生蓝靛果0.144mg/g，5种浆果果肉中单宁含量最高为野生蓝靛果0.11mg/g；5种浆果果皮中SOD含量最高为笃斯1348.053U/g，5种浆果果肉中SOD含量最高为蓓蕾1903.921 U/g。

[1]王华，徐蓉，李娜.集中小浆果生物活性物质研究进展[J].北方园艺,2011(8)：198-203.

[2]颜承云，谷继伟.蓝靛果忍冬果实黄酮类成分总含量的动态分析[J].中国野生植物资源,2004(4)：51-52.

[3]高畅，程大海.蓝莓果渣提取物总酚含量及抗氧化活性研究[J].植物研究,2010(2).

AnalysisandComparisonofSeveralKindsofBerryResourcesinAlpineRegion

Gao Zhitao，Zhang Wei，Guo Xing，Wang Honggang

(Heilongjiang Academy of Forestry,Yichun,Heilongjiang 153000)

The small Xingan mountain broad leaf of Lonicera edulis,wild,blue bird,bud,wild uliginosum five broad leaf and fruit peel of indigo fruit total sugar,flavonoids,tannin and SOD content were detected. The results showed that wild Benedict total sugar content in peel was up to 1.72mg/g; bud peel flavonoids content up to 1.88mg/g; the highest 0.14405mg/g tannin content in the pericarp of local wild fruit bud; SOD content of up to 1903.921 U/g.

The broad leaf of Lonicera edulis;Total sugar;Tannin;Flavone; Superoxide dismutase

2017-08-30

黑龙江省森工总局科技支撑项目(sgzjy2014024)

高智涛(1983-)，男，工程师，从事食用菌、森林食品等方面研究，E-mail：gaozhitao2484@163.com。

DOI.:10.13268/j.cnki.fbsic.2017.06.009

S759.83

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