猪瘟DIVA疫苗研究现状

赵启祖/中国兽医药品监察所OIE国家猪瘟参考实验室

猪瘟DIVA疫苗研究现状

赵启祖/中国兽医药品监察所OIE国家猪瘟参考实验室

一、养猪业是中国畜牧业的脊柱产业

2012-2016年国家统计局公布，肉类总产量，猪肉占63.76%，是主要消费肉类产品；全国年均生猪出栏量达到46020.6万头；年均生猪出栏量达到70804.4万头；年均生猪总产量达到11.6825亿头，按照数据来看，中国的养猪量占据了世界养猪总量的一半以上。养猪业的发展直接影响了国家经济和民众生活水平的提高。

生猪养殖模式多样、生物安全水平不高，养殖成本过高，导致疫病防治成本居高不下。如今集约化、现代化、规模化、专业化养猪，已经逐渐成为发展趋势。1990年以前，我国90%猪场是散养猪场；到2002年，有500头以上的猪场大约占到10%；到2015年达到了44%；预估到2020年能够达到52%左右。据不完全统计，我国因病死亡猪的数量占饲养总数的8%～10%，其中有一定比例的死亡是由于猪瘟引起的。

二、猪瘟兔化弱毒疫苗

C株-猪瘟兔化弱毒疫苗，简称“C株”（C-strain）。20世纪60年代C株从中国被引入东欧和亚洲友邦，被称为“K”株或“LC”（lapinized Chinese strain）株。后传到西欧和拉美各国，Riems株就是C株的一个变种。猪瘟兔化弱毒疫苗性能好、安全、免疫效果好，是国际公认的安全有效的弱毒疫苗，对世界猪瘟的预防控制作出了重大贡献。

三、中国猪瘟疫苗的生产与使用

1.猪瘟兔化弱毒疫苗自上世纪50年代末大规模使用以来，是我国免疫覆盖率最高的疫苗，养猪人最认可的疫苗。

2.疫苗从最初的兔脾脏组织苗，逐渐发展乳兔组织苗、原代细胞培养苗（包括猪、羊和牛细胞）。

3.大规模化生产的牛睾丸原代细胞培养疫苗。

4.目前中国猪瘟疫苗的生产企业有44家，生产疫苗品种有10个，包括猪瘟活疫苗（兔源）、猪瘟活疫苗（乳兔源）、猪瘟活疫苗（细胞源）、猪瘟活疫苗（传代细胞）、猪瘟耐热保护剂活疫苗（活疫苗）、猪瘟耐热保护剂活疫苗（兔源）、猪瘟-猪丹毒-猪多杀性巴氏杆菌三联活疫苗（细胞源或兔源+G4T10株+EO630株）、高致病性繁殖与呼吸综合征-猪瘟二联活疫苗（TJM-F92株）、政府采购专用猪瘟活疫苗（脾淋源）、政府采购专用猪瘟活疫苗（细胞源）。

5.C株疫苗的优点。

（1）免疫最早4天即可产生可靠的保护。

（2）口服免疫也可以获得部分保护，攻毒也不形成持续感染。

（3）免疫持续期至少6～11月甚至终生。

（4）所有基因型均可交叉保护。

（5）肌肉注射没有胎盘传播的直接证据，但怀孕母猪所生仔猪是经口服免疫的。

（6）对猪和其他动物效力好，甚至对免疫动物，安全性也很好。

（7）对怀孕动物没有副作用，即使穿过胎盘，也对怀孕猪和仔猪没有影响。

（8）生产简单、价格低廉。不需要佐剂，还可以口服。

（9）可以采用核酸诊断鉴别。

综上，可以看到C株疫苗可以说是理想疫苗中的典范，但是其唯一的不足，就是不能用血清学方法进行免疫感染鉴别诊断。

四、猪瘟DIVA疫苗

标记疫苗必须与其相应的血清型诊断方法共同发挥作用。设计候选标记疫苗时，必须考虑如何开发有效的鉴别诊断技术。

“标记疫苗”并不是一个十分准确的概念，标记疫苗和传统疫苗的主要区别是免疫动物产生的抗体能够被区分，必须是疫苗和鉴别诊断方法配合使用，缺一不可。猪瘟DIVA安全、高效、产生免疫快、免疫力强。

猪瘟病毒感染后，可以测定到抗体有Erns、E2和NS3，其中E2是主要免疫原，是猪瘟标记疫苗研究的目标蛋白。

五、E2亚单位疫苗/E2 Subunit Vaccine

E2，囊膜糖蛋白，是E2亚单位疫苗的主要免疫原性蛋白，也是亚单位疫苗研究的靶蛋白。现在市面所出售的的E2亚单位疫苗主要有：Bayer公司的 BayovacR CSF marker（32μg/dose）、MSD Animal Health（Intervet公司）的PorcilisR Pesti（Alfort）、猪瘟病毒E2重组杆状病毒灭活疫苗（新疆天康）、猪瘟病毒E2重组杆状病毒灭活疫苗（WH-09株）、猪瘟基因工程亚单位疫苗（293T-E2）CHO细胞等。

E2亚单位疫苗具有临床保护、安全和预防病毒扩散等明显优势，但与此同时也有明显的缺点，例如只能在早期免疫使用、需要免疫2次，而且配套的监测Erns抗体的ELISA方法，其敏感性和特异性还有待提高。

六、活载体疫苗

活载体疫苗是20世纪90年代的研究重点，近年来我国学者开始进行此类疫苗的研究，但仍处于实验室研究和联苗的阶段。

七、BVDV为基础的标记疫苗

1.对家猪、野猪、牛、山羊、绵羊和家兔安全；病毒可以在扁桃体复制，数周内用PCR可以检测核酸。

2.尿液、粪便和精液无疫苗病毒排除，不具有传播性。

3.一次肌注一周内免疫保护，保护期六个月，可以口服免疫。

4.口服免疫可免疫母源抗体阳性或较小仔猪，免疫效果略差。

鉴于BVDV和BDV有一定的交叉，多次免疫后特异性问题，还有待进一步改进完善。

八、C株为基础的标记疫苗

以C株为基础研发DIVA疫苗及其配套ELISA的分子基础是猪瘟病毒特异的TAVSPTTLR表位。

九、理想的猪瘟疫苗

1.无短期或长期副反应。

2.对靶动物和非靶动物遗传稳定。

3.常规条件下生产工艺稳定简单。

4.成本低。

5.能快速产生免疫，且能做到终身免疫。

6.抵御不同毒株。

7.不形成带毒者。

8.预防水平和垂直传播。

9.具有敏感特异的鉴别诊断方法。