高效液相色谱串联质谱仪检测玉米中噻虫嗪及噻虫胺的残留量

河南省农药检定站 王青霞 马丽娜 郝小磊 吕颖贤 马南方

高效液相色谱串联质谱仪检测玉米中噻虫嗪及噻虫胺的残留量

河南省农药检定站 王青霞 马丽娜 郝小磊 吕颖贤 马南方

噻虫嗪是一种全新结构的第2代烟碱类高效低毒杀虫剂，对害虫具有胃毒、触杀及内吸活性，用于叶面喷雾及土壤灌根处理。其施药后迅速被内吸，并传导到植株各部位，对刺吸式害虫如蚜虫、飞虱、叶蝉、粉虱等有良好的防效。本文研究了玉米中噻虫嗪及噻虫胺的残留量检测方法，该方法简单、快速、准确度和灵敏度高，符合残留分析的要求。

一、试验部分

（一）仪器与材料

1.仪器。1200液相色谱-6410三重四极杆质谱联用仪，低速离心机，振荡器，电子天平。

2.试剂。乙腈：色谱纯。

3.标准品。噻虫嗪纯度99.0%，由沈阳化工研究院提供；噻虫胺100 μg/mL，由农业部环境保护科研监测所提供。

（二）实验步骤

1.提取。用50 mL的离心管称取10g样品加25 mL乙腈振荡30 min，加入 3 gNaCl，震荡 10 min后以3000转/min离心3 min，最终取上清液乙腈相4 mL于烧杯中，浓缩1 mL于离心试管中。

2.净化。将1 mL浓缩液加入0.2 gPSA和0.05 g石墨化碳黑涡旋，过0.22 μm有机系滤膜，待测。

（三）仪器条件

1.液相色谱条件

色谱柱：ZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱（100 mm×3 mm，1.8 μm）。

柱温：30 ℃。

流速：0.4 mL/ min。

进样量：5 μL。

梯度洗脱条件见表1。

表1 梯度洗脱条件

2.质谱条件

离子源：电喷雾离子源ESI。

扫描方式：正离子源。

毛细管电压：3.5 KV。

锥孔电压：35 V。

离子源温度：110 ℃。

脱溶剂温度：450 ℃。

脱溶剂气流量：600 L/h。

锥孔气流量：90 L/h。

检测方式：多重反应监测（MRM）见表2。

表2 多重反应监测（MRM）

二、结果与讨论

（一）标准曲线

图1 噻虫嗪标准曲线

图2 噻虫胺标准曲线

将 10 μg/mL的噻虫嗪、噻虫胺标准溶液用乙腈稀释配得0.01μg/mL、0.05 μg/mL、0.1 μg/mL、0.5 μg/mL、1 μg/mL 系 列标准溶液，在上述液相色谱/质谱条件下进行测定，以噻虫嗪、噻虫胺标准溶液浓度与监测离子峰面积作标准曲线。噻虫嗪线性方程为：y=214 601x+3 377.1，相关系数为：r= 0.999；噻虫胺线性方程为：y=157 094x+94.383，相关系数为：r= 0.999 9；其中，y为噻虫嗪、噻虫胺峰面积，x为标准溶液浓度见图1和图2。

（二）最低检出量

噻虫嗪、噻虫胺的最低检出量均为 2.0×10-3ng。

（三）最低检测浓度

根据添加回收率实验，在上述色谱条件下噻虫嗪、噻虫胺在玉米中的最低检出浓度均为0.02 mg/kg。

（四）相对保留时间

噻虫嗪保留时间约为2.2 min、噻虫胺保留时间约为2.3 min。

（五）添加回收率与相对标准偏差

取对照区的玉米粒样品，按上述方法做添加回收率试验。添加浓度 为 0.02 mg/kg、0.04 mg/kg 和0.4mg/kg，每个浓度做5个平行试验。试验结果表明平均回收率在76.3%～112.0%，变异系数0.4%～1.7%，结果见表3和表4。

表3 玉米中噻虫嗪的添加回收率和相对标准偏差

表4 玉米中噻虫胺的添加回收率和相对标准偏差

（六）液相色谱条件优化

分别用乙腈加0.1%甲酸水、乙腈加0.2%甲酸水、甲醇加0.1%甲酸水、甲醇加0.2%甲酸水作为流动相。结果表明，以乙腈加0.1%甲酸水作为流动相时，噻虫嗪和噻虫胺均有较强的离子丰度，并且分离度高、对称性好，因此本方法选用乙腈加0.1%甲酸水作为流动相。

（七）质谱条件优化

根据噻虫嗪和噻虫胺的分子量和结构分析，分别对两种物质进行质谱参数优化，最终分别找到合适的锥孔电压和碰撞电压，编辑成两种物质的方法，连接高效液相色谱仪，并设置梯度洗脱程序。结果表明，在1.3的分析条件下，噻虫嗪和噻虫胺均可得到离子丰度强、峰形良好的色谱峰。

三、实验谱图

试验谱图见图3、图4、图5。

图3 噻虫嗪、噻虫胺标样

图4 玉米添加

图5 玉米空白

四、结论

进样量均为5 μL。

本文对噻虫嗪及噻虫胺检测的前处理、流动相条件及质谱条件进行优化，建立了利用高效液相色谱串联质谱联用仪检测玉米中噻虫嗪及噻虫胺的残留分析方法。该方法简便、重现性好、灵敏度高，可以作为检测玉米中噻虫嗪及噻虫胺残留量较为理想的方法。