高效液相色谱法测定氨咖黄敏胶囊中对乙酰氨基酚含量

张蕾

摘 要：本文采用高校液相测定了氨咖黄敏胶囊中对乙酰氨基酚的含量，固定相为：安捷伦Cl8（4.6mm×250mm，5um），乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氢钾（磷酸调节至pH3.0）（5：10：85）为流动相，检测波长为249nm，流速1.0mL·min-1，柱温：30℃。对乙酰氨基酚在10～60μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。对乙酰氨基酚的平均回收率为99.3%，RSD为0.66%（n=6）；此方法简便、准确、重现性好，可用于氨咖黄敏胶囊中对乙酰氨基酚的含量测定。

关键词：氨咖黄敏胶囊；对乙酰氨基酚；含量

氨咖黄敏胶囊为常用感冒药。氨咖黄敏胶囊为复方制剂，由对乙酰氨基酚、咖啡因、马来酸氯苯那敏、人工牛黄、淀粉、糊精、糖粉组成。氨咖黄敏胶囊用于感冒引起的鼻塞、头痛、咽喉痛、发热等。对乙酰氨基酚是非那西丁在体内的代谢产生，其抑制中枢神经系统前列腺素合成的作用与阿司匹林相似，但抑制外周前列腺素合成作用弱，故解热镇痛作用强，抗风湿作用弱。本文采用高校液相测定了氨咖黄敏胶囊中对乙酰氨基酚的含量。

1 仪器与试药

HH-601超级恒温水浴（江苏金坛市亿通电子有限公司）；PH-620高精度实验室酸度计（上海禾工科学仪器有限公司）；优普杜伯特UP-DBT-IV实验室洗瓶机（西安优普仪器设备有限公司）；QTSXR10260数控型超声波清洗器（天津市瑞普电子仪器公司）；PTX-FA110万分之一天平（上海鑫仓电子科技有限公司）；屹谱仪器U-1810准双光束紫外可见分光光度计（屹谱仪器制造（上海）有限公司）；Kertone实验室超纯水机（科尔顿（中国）有限公司）；LC3000高效液相色谱仪（山东滕州市滕海分析仪器有限公司）。对乙酰氨基酚对照品由中国药品生物制品检定所提供。乙腈（启东市名成化工有限公司）、乙醇（南京维之诚化学试剂有限公司）、磷酸（武汉市伟琪博星生物科技有限公司）、甲醇（武汉市伟琪博星生物科技有限公司）、冰醋酸（济南英出化工科技有限公司）、磷酸二氢钾（启东市名成化工有限公司）、三乙胺（南京维之诚化学试剂有限公司）。

2 含量测定

2.1 色谱条件：依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[1-5]。色谱柱为安捷伦Cl8规格为（4.6mm×250mm，5um）；乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氢钾（磷酸调节至pH3.0）（5：10：85）为流动相；检测波长为249nm。理论板数按对乙酰氨基酚峰计算应不得低于2000。

2.2 供试品溶液的制备

取氨咖黄敏胶囊内容物，精密称取，加流动相超声处理10分钟，放冷，滤过，滤液置50ml量瓶中，用流动相分次洗涤容器和残渣，洗液滤人同一量瓶中，加流动相至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.3 对照品溶液的制备

精密称取对乙酰氨基酚对照品约5mg，用流动相溶解并稀释成每1ml中含30μg的溶液，作为对照溶液。

2.4 阴性溶液的制备

依照处方取咖啡因、马来酸氯苯那敏、人工牛黄、淀粉、糊精、糖粉，按样品制备工艺制成阴性对照样品，照供试品溶液的制备方法制成阴性液，依上述方法测定，结果在对乙酰氨基酚出峰处阴性液无色谱峰，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。

2.5 准曲线的制备

制备浓度为10、15、20、25、30、35、40、45、50、60μg·mL-1的对照品溶液，分别精密吸取10μL注入HPLC，记录色谱图。以峰面积积分值A（μg）为横坐标，进样量为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。试验表明，对乙酰氨基酚对照品在10～60μg·mL-1范围内线性关系良好。

2.6 精密度试验

依照2.3项下制备对照品溶液，精密吸取对乙酰氨基酚对照品溶液10μL重复进样6次，测定峰面积积分值，对照品峰面积积分值的RSD为0.89%。结果表明，本实验精密度良好。

2.7 重现性试验

称取同一批的氨咖黄敏胶囊样品6份，按测定方法项下的方法制备供试品溶液，测定含量，并计算样品的RSD值，结果RSD为0.83%，结果表明此方法的重现性良好。

2.8 稳定性试验

依照2.2项下供试品制备方法制备供试品溶液，分别在0，2，4小时精密吸取供试品溶液注入液相色谱仪，进样测定，供试品对乙酰氨基酚峰面积积分值的RSD为0.85%。结果表明对乙酰氨基酚至少在4小时内稳定。

2.9 回收率试验

采用加样回收试验，取已知含量的同一批供试品各6份，精密称定，分精密添加一定量的对乙酰氨基酚对照品，按供试品制备所述方法制备供试品溶液，测定含量（同时测定样品含量），计算回收率。6次测定的平均回收率为99.3%，RSD为0.66%。

2.10 样品含量测定

依照上述含量测定方法，测定氨咖黄敏胶囊三批样品中对乙酰氨基酚的含量，含量为标示量的100.1%、100.3%、99.1%。

3讨论

分别考察乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氢钾（磷酸调节至pH3.0）（5：10：85），乙腈-0.05mol.L-1磷酸二氢钾溶液（用磷酸调节pH值至3.0）（30∶70），乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氢钾（磷酸调节至pH3.0）（10：10：80），乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氢钾（磷酸调节至pH4.0）（10：10：80），乙腈-0.05mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液（含三乙胺0.5%，磷酸调pH至3.0）（20：80）不同比例的流动相，结果以乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氢钾（磷酸调节至pH3.0）（5：10：85）为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用乙腈-甲醇-0.025moL磷酸二氫钾（磷酸调节至pH3.0）（5：10：85）为流动相。此方法简便、准确、重现性好，可用于氨咖黄敏胶囊中对乙酰氨基酚的含量测定。氨咖黄敏胶囊中对乙酰氨基酚的含量应为标示量的95-105%。

参考文献

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