不同剂量蛋白质饮食对Ⅱ期压疮愈合及血清白蛋白、血红蛋白影响的实验研究

张亚楠，李 贤,王 瑶,赵志红，高文娟，郑美洁，吴晓娇

·科研论著·

不同剂量蛋白质饮食对Ⅱ期压疮愈合及血清白蛋白、血红蛋白影响的实验研究

张亚楠，李 贤,王 瑶,赵志红，高文娟，郑美洁，吴晓娇

[目的]研究不同剂量的蛋白质饮食对大鼠Ⅱ期压疮模型创面愈合时间、血红蛋白和血清白蛋白的影响。[方法]将100只大鼠完全随机分为对照组(含4 g蛋白质的标准鼠粮)、实验1组(2 g蛋白质)、实验2组(3 g蛋白质)、实验3组(5 g蛋白质)，采用磁铁压迫持续缺血损伤复制大鼠Ⅱ期压疮模型，造模成功后每组每天分别给予4种蛋白含量的饮食干预，在造模后第1天、第3天、第7天、第14天测量大鼠的压疮面积、体重，并在每个时间段从每组随机抽取3只大鼠腹主动脉取血测量血红蛋白和血清白蛋白的含量。[结果]对照组压疮愈合时间最短，实验1组愈合时间最长，4组都在压疮发生后的前一个星期愈合最快，实验1组、实验2组血红蛋白和血清白蛋白持续下降。 [结论]蛋白质対压疮愈合时间有影响，基础饮食最利于Ⅱ期压疮创面愈合，且不会引起体内蛋白质含量的变化。

压疮;不同剂量;蛋白质;饮食干预；愈合时间；血红蛋白；白蛋白；实验研究

压疮是长期卧床病人严重并发症之一，据文献统计，美国院外压疮发生率为5.0%，院内压疮发生率为1.4%[1-5]。Eberlein-Gonska等[6]研究显示：德国院外压疮发生率为1.21%，院内发生率为0.78%。蒋琪霞等[7]研究发现我国院内压疮发生率为0.628%,压疮的发生不仅增加病人的痛苦和经济负担，延长住院时间，严重者会发生感染甚至死亡,故寻求快速有效的压疮治疗方法是临床医务人员亟待解决的问题。长期以来压疮的治疗以创面治疗为重点，蛋白质治疗未得到足够的重视，强化蛋白质支持可以加速压疮创面的愈合，对减少创面大小有直接作用。营养支持是一项经济有效的预防措施，但由于基础研究和临床研究较少，国际上至今尚未制定基于循证医学证据的压疮营养支持治疗指南[8]。本研究从蛋白质支持治疗出发探讨不同剂量蛋白质饮食对大鼠压疮愈合时间、愈合率、血清白蛋白(HB)、血红蛋白(Alb)的影响，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 实验动物 自河北医科大学实验动物中心购买雄性健康SD大鼠100只，体重(280±20)g，动物合格证编号:1607209。

1.2 实验器材 圆片形铁片(直径15.0 mm,厚0.3 mm,重0.6 g，高压灭菌消毒)， 圆形磁铁(直径15.0 mm,厚2.5 mm,重2.6 g，磁通量高达1 500高斯)购自河北超强磁业技术有限公司。扭力天平(精确到0.001，型号TN-100F，购自上海皓庄仪器有限公司)、台式离心机(型号：400C，购自北京白洋医疗器械有限公司)、血红蛋白试剂盒和血清白蛋白试剂盒(购自南京生物工程研究所)、吸头(10 μL～200 μL)、EP管(0.6 mL)、硫酸纸、卡纸等。

1.3 饮食配制 4组蛋白质水平饮食的设定是参考1992年国家卫生部颁布的医学实验动物标准中规定的每100 g大鼠鼠粮中含蛋白质18%～25%[9]。计算得出100 g鼠粮中含蛋白质18 g～25 g。见表1。

表1 不同食物中蛋白质水平的饲料配方(每100 g中蛋白质含量) g

1.4 实验方法

1.4.1 动物分组 将大鼠适应性饲养(饲养温度控制在20 ℃～25 ℃,饲养湿度40%～60%)采用标准饲料进行喂养(饲料购买于河北医科大学实验动物中心)1周后,根据体重大小编号按随机数字表将100只大鼠随机分为4组：对照组(含4 g蛋白质的标准鼠粮)、实验1组(2 g蛋白质)、实验2组(3 g蛋白质)、实验3组(5 g蛋白质)，每组25只，4组体重差异无统计学意义(P>0.05)。排除标准：受压处失去全层皮肤组织而且损伤深达肌肉组织或露出铁片。整个造模过程除去死亡和排除不符合标准，最终实验1组、实验2组、对照组各22只，实验 3组23只。

1.4.2 大鼠Ⅱ期压疮模型的复制 动物模型的制作参照Peirce Wassermann等埋置铁片加外用磁铁加压的造模方法[10-11]将健康SD大鼠适应性饲养1周后，4组大鼠实验前禁食、禁水8 h，大鼠经10%水合氯醛0.3 mL(100 g)腹腔注射麻醉后,在其背部正中线两侧臀部进行脱毛处理，备皮区域为4 cm×4 cm，用5%聚维酮碘消毒手术区域，在大鼠左臀部靠近头端切一2 cm的切口，用镊子钝性分离筋膜和组织，将无菌铁片置于肌肉下，用4-0的Dexon聚羟基乙酸线缝合切口，再用5%聚维酮碘消毒缝合处以防感染，大鼠带铁片适应性生活3 d后无感染反应，在体外放置圆形磁铁从而对肌肉和皮肤产生压力，造成局部组织缺血，每次加压2 h后将磁铁取下灌注0.5 h，如此循环，每天大鼠连续进行5个循环后将磁铁取下，第2天早上重复以上步骤。判断标准:创面出现暗红色，创面周围皮肤红肿，不伴有渗血渗液，实验大鼠有明显疼痛表现[12]。

1.4.3 干预方法 在Ⅱ期压疮形成之前4组大鼠都给予相同的标准鼠粮，即20 g鼠粮中含蛋白质4 g的饲料，Ⅱ期压疮形成后每天每只大鼠饮食量相同，都是20 g左右，但摄入蛋白质的量不同，即对照组给予含4 g蛋白质的标准鼠粮，实验1组给予含2 g蛋白质的鼠粮，实验2组3 g、实验3组5 g，自由饮水。

1.4.4 观测指标和方法 观察大鼠压疮形成后第1天、第3天、第7天、第14天4个时间点压疮面积和每只大鼠最后压疮愈合时间。①血红蛋白、血清白蛋白的测量方法，压疮形成后第1天、第3天、第7天、第14天每个时间点每组随机抽取3只大鼠腹主动脉采血测量血清白蛋白、血红蛋白含量，分别用文齐氏液和溴甲酚绿将其稀释后，再用分光光度计法测量含量。②大鼠创面的测量及计算方法：将透明尿酸纸放在大鼠创面上画出创面的大小，然后将画有创面面积的透明尿酸纸放到质地均匀的卡纸上，再将创面面积画到卡纸上后沿着面积大小剪下卡纸并称重量。从这张卡纸上不同部位剪下3个2 cm×2 cm的正方形称其重量，计算卡纸每平方厘米的重量。最后用创面卡纸的重量除以卡纸每平方厘米的重量计算出创面的面积。③创面愈合时间的计算方法：每组剩下的大鼠一直观察到创面完全愈合，并记录每组每只大鼠的创面愈合时间。④压疮面积愈合率的计算方法：原始压疮面积-剩余未愈合压疮面积)/原始压疮面积。

2 结果

2.1 不同剂量的蛋白质饮食对大鼠压疮愈合时间的影响(见表1)

d

2.2 不同剂量蛋白质饮食对4组大鼠压疮愈合率的影响(见表2)

%

2.3 不同剂量蛋白质饮食对大鼠血清白蛋白的影响(见表3)

g/L

2.4 不同剂量蛋白质饮食对4组大鼠血红蛋白的影响(见表4)

g/L

3 讨论

3.1 不同剂量的蛋白质饮食对大鼠压疮愈合时间的影响 本研究结果显示：对照组压疮愈合时间最短(16.36 d±1.57 d)，实验1组(给予2 g蛋白质)压疮愈合时间最长(21.63 d±1.12 d)，实验3组(5 g蛋白质)压疮愈合时间(17.58 d±1.31 d)长于对照组,说明压疮愈合过程中对蛋白质的需要并不是多多益善，而是有一最适蛋白量。此与国春花[13]对不同剂量蛋白质对下肢开放性骨折病人营养状况及临床结局的研究结果一致。超过最适蛋白量对压疮的愈合并不能起到最佳效果，但会因为营养过剩对机体代谢器官有着不良影响，这就提示临床在为压疮病人制定饮食干预时应具体情况、具体分析，不能盲目地认为压疮病人蛋白供给愈多越好，应根据病人的情况制定个体化蛋白质饮食干预，既能保证病人营养的需要，又可减少病人的花费，同时也缩短了压疮愈合时间，减轻病人痛苦。

3.2 不同剂量蛋白质饮食对大鼠压疮愈合面积的影响 本研究结果显示：压疮形成后第7天和第14天时组间压疮愈合率较高，说明营养干预对于压疮长期疗效明显。压疮是慢性创伤，蛋白质摄入不足是导致压疮发生和发展的一个重要因素，也是直接影响压疮愈合的一个关键因素，动物实验研究证实，仅供给50%的热量时，肉芽组织的生成与基质蛋白的合成明显降低，从而影响了胶原蛋白的合成。由于伤口分泌物损失，炎症修复过程和新生组织形成，使蛋白质的摄入尤为重要，因为蛋白质是伤口愈合所必须的，蛋白质供应不足会影响压疮愈合。4组大鼠自身比较，4种不同剂量的蛋白质饮食都可以使创面愈合，虽然4组蛋白质水平不同但4组大鼠都可以摄入足够的能量，因此没有导致压疮进一步发展，且4组疮面都是在前一个星期愈合速度最快，这可能是因为组织损伤的前一个星期内肉芽组织增长最快，对于蛋白质需要量最多，因此在肉芽快速增长的关键时期补充最适蛋白量对于压疮愈合起着至关重要的作用。这也提示临床为压疮病人制定饮食干预时，应在压疮形成前期肉芽组织生长最快时补充最适蛋白量对于压疮的愈合效果最好。

3.3 不同剂量蛋白质饮食对大鼠血红蛋白和血清白蛋白的影响 本研究结果显示：与实验前相比，实验后实验1组和实验2组大鼠的血红蛋白和血清白蛋白持续下降，说明大鼠的血红蛋白和血清白蛋白是动态变化的，即使给予一定的营养支持，如果蛋白质供应不足，大鼠仍会发生营养不良和低蛋白血症，延长压疮愈合时间。这与冯晓慧等[14-15]研究发现低蛋白血症是影响创伤病人预后的独立危险因素相一致。在饮食干预3d时血清白蛋白含量差异有统计学意义(P<0.05)，而在饮食干预第7天时血红蛋白含量差异有统计学意义(P<0.05)，说明在低蛋白饮食过程中血清白蛋白变化比血红蛋白变化灵敏度高，虽然临床上将血红蛋白和血清白蛋白作为监测压疮病人的营养指标，但是从本实验来看血清白蛋白的变化能更早地反映压疮病人的营养状态变化。所以，对于临床压疮病人应密切观察血红蛋白含量的变化并作为判断压疮预后的一个观测指标。

4 小结

压疮是临床护理中常见的并发症，压疮的管理重在预防、难在治疗,治疗压疮的关键之一是营养支持，临床对于压疮病人蛋白质的可耐受最高摄入量并没有明确实验依据，国内尚缺乏多中心的随机对照试验证实营养支持在压疮预防和治疗方面的疗效，也缺乏大样本以国人体质和营养摄入数据为基础的压疮病人营养评价指标[1]。对于压疮病人营养支持的认识虽然有所提高，但如何根据病人的营养状况结合病情制定合理个体化营养支持，尤其是蛋白质的用量如何调整，研究较少。鉴于此状况，本研究通过随机、对照基础研究为临床压疮病人的饮食指导提供可参考依据，为了能尽快制定出压疮病人个体化营养支持方案提供医学循证依据。由于限于研究时间和大鼠例数，本研究仅观察4个水平的蛋白质对于大鼠Ⅱ期压疮愈合的影响，其他水平的蛋白质对于Ⅱ期以上压疮愈合的影响还需要今后进行更深入的观察和研究。

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(本文编辑李亚琴)

Experimental study on different doses of protein diet on stage Ⅱ pressure ulcer healing，serum albumin and hemoglobin

Zhang Yanan，Li Xian，Wang Yao,etal

(Chengde Medical University，Hebei 067000 China)

Objective:To explore the effects of different doses of protein diet on wound healing time of stage Ⅱ pressure ulcer，hemoglobin and serum albumin in rats.Methods:A total of 100 rats were randomly divided into control group (standard rat food containing 4 g protein)，experimental group one (2 g protein)，experiment group two (3 g protein)，and experiment group three (5 g protein).The rats were treated with magnetic compression and continuous ischemic injury to copy the model of stage Ⅱ pressure ulcer.When the model finished，the rats were treated with four kinds of protein contents in each group every day.On the first day，the third day，the seventh day，and fourteenth day when the model finished，the pressure sores area and body weight of rats were measured，and the contents of hemoglobin and serum albumin at abdominal aorta were measured from 3 random rats’ from each group at each time.Results:The healing time was the shortest in control group and the longest in experimental group 1.The four groups had the fastest healing at the first week after the occurrence of pressure ulcer.The hemoglobin and serum albumin were continually decreasing in experimental group one and the experimental group two.Conclusions:The healing time was affected by protein.The basic diet was the most beneficial to the stage Ⅱ pressure ulcer healing and did not cause the change of the protein content in the body.

pressure ulcers;different doses;protein;diet intervention;healing time;hemoglobin;albumin;experimental study

河北省卫生卫计委医学科学研究重点课题,编号：20160463。

张亚楠，硕士研究生在读，单位：067000，承德医学院；李贤(通讯作者)、王瑶、赵志红、高文娟、郑美洁、吴晓娇单位：051000，河北省人民医院。

信息 张亚楠，李贤,王瑶,等.不同剂量蛋白质饮食对Ⅱ期压疮愈合及血清白蛋白、血红蛋白影响的实验研究[J].护理研究，2017，31(25)：3102-3105.

R472

A

10.3969/j.issn.1009-6493.2017.25.008

1009-6493(2017)25-3102-04

2016-11-28；

2017-08-18)