2016年1月和2017年1—2月云南省曲靖市禽流感外环境监测结果分析

朱向晖，陈晓丽，余正权，王秀英，王建红云南省曲靖市疾病预防控制中心急性传染病防制科，云南曲靖 655000

2016年1月和2017年1—2月云南省曲靖市禽流感外环境监测结果分析

朱向晖，陈晓丽，余正权，王秀英，王建红
云南省曲靖市疾病预防控制中心急性传染病防制科，云南曲靖 655000

目的了解曲靖市外环境中H5、H7、H9亚型禽流感病毒的分布状况，为曲靖市防控人感染高致病性禽流感提供依据。方法收集2016年1月和2017年1—2月曲靖市采集的外环境禽流感标本，采用RT-PCR方法检测禽流感病毒核酸，阳性者进一步检测H5、H7、H9亚型。监测数据采用Excel和统计学软件进行统计分析。结果2016年1月和2017年1-2月年共采集126份禽流感外环境标本，检出A型流感病毒核酸阳性标本34份，阳性检出率26.98%。H9亚型检出率最高为15.87%；不同采样场所，活禽交易市场阳性率最高为68.75%；不同采样部位，清洗禽类污水和案板拭子阳性率较高，分别为57.14%、50.00%。结论曲靖市活禽交易市场有禽流感H5、H7、H9亚型存在，感染人的风险较高，加强活禽市场监管力度及宣传教育是防控人感染高致病性禽流感的针对性措施。

禽流感；外环境；监测结果

人感染高致病性禽流感是由人类感染禽流感病毒（avian influenza virus,AIV）所引起的人禽共患传染病[1]，目前，H5N1、H7N1、H7N2、H7N3、H7N7 和 H9N2 亚型禽流感病毒能感染人[2]。2005年中国大陆发现第1例人感染高致病性H5N1禽流感病例，2013年第1次发现人感染H7N9禽流感病例，均引发社会极大关注[3-4]。为了解曲靖市人禽流感的流行现状，评估曲靖市人禽流感的发生风险，以便采取有针对性的防控措施，曲靖市疾病预防控制中心根据云南省监测方案，开展了禽类动物环境中禽流感病毒的监测。现对2016年1月和2017年1—2月曲靖市主城区家禽养殖区和农贸市场等环境中的禽流感病毒H5、H7、H9亚型的流行分析如下。

表1 2016年1月和2017年1-2月年曲靖市外环境禽流感病毒核酸检测结果

表3 2016年1月和2017年1-2月年曲靖市不同种类标本禽流感病毒核酸检测结果

1 材料与方法

1.1 实验材料

标本收集按照《云南省高致病性禽流感环境监测方案》要求，2016年1月、2017年1—2月，共开展环境标本采集3次，每次42份标本，共126份标本。期间，选择家禽规模养殖户、家禽散养户、活禽交易市场，采集标本含：禽类粪便、笼具表面擦拭物、案板拭子、清洗禽类的污水、禽类饮水或食物等。

1.2 标本检测

标本检测从环境标本中提取病毒RNA后，以实时荧光量RT-PCR检测禽流感病毒核酸FluA，阳性者进一步检测 H5、H7、H9 亚型。

1.3 检测方法及仪器

主要检测试剂和仪器RNA提取试剂盒 (货号为74104)与 Quanti Tect Probe RT-PCR Kit(货号为 204443)均由QIAGEN公司生产。病毒核酸检测试剂盒由北京金豪制药股份有限公司生产。主要检测仪器设备为低温高速台式离心机、旋涡混合器、二级生物安全柜、Agilent Technologies MX3000P实时荧光定量PCR仪。实验所用各种引物、探针均由上海Invitrogen公司合成提供，所有试剂、耗材均在有效期内使用。

1.4 统计方法

数据分析有关数据录入Excel 2003进行整理，通过Excel 2003和SPSS 17.0统计学软件进行统计分析，主数资料用（%）表示，采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 外环境型禽流感病毒核酸检测结果

阳性标本检出情况：2016—2017年共3次采集并检测各类禽流感环境标本126份。检出病毒核酸阳性标本34份，阳性检出率26.98%。各次阳性检出率差别不大（χ2＝0.08，P＞0.05），H9 亚型禽流感病毒阳性检出率明显高于其他亚型，为 15.87%（χ2＝30.42，P＜0.05），见表 1。

2.2 不同监测场所禽流感病毒检出率

监测场所分布阳性率活禽交易市场为68.75%，家禽规模养殖户为2.38%，家禽散养户未检出，差异有统计学意义（χ2＝68.70，P＜0.01），表明禽流感病毒主要传播于活禽交易市场。见表2。

表2 2016年1月和2017年1-2月年曲靖市不同监测场所禽流感病毒检出情况

2.3 不同种类标本禽流感病毒核酸检测结果

标本来源分布从不同类型的标本中均检出禽流感病毒核酸，检出率从高至低分别为：清洗禽类污水57.14%、案板拭子50.00%、笼具表面擦拭物36.36%、禽类粪便21.74%、禽类饮水或食物12.50%，不同类型标本阳性检出率差异有统计学意义（χ2＝10.91，P＜0.05），见表3。

3 讨论

从2016年1月和2017年1—2月曲靖市禽流感外环境标本监测结果来看，近年来曲靖市涉禽环境禽流感病毒较活跃，H5、H7、H9亚型均检出，其中H9检出率较高。 总阳性率高于肇庆[5]、贵阳[6]、淮安[7]等地。

不同监测场所的检测结果表明：曲靖市活禽交易市场检出率明显高于家禽规模养殖户和家禽散养户。曲靖市的活禽销售来源除本地养殖外，还从广西、贵州等地大量购入活禽，市场上汇聚了来自不同地方的禽类，增加了禽流感发病的风险。

不同标本来源的检测结果表明：曲靖市禽流感外环境标本病毒检出率由高至低依次是:清洗禽类污水、案板拭子、笼具表面擦拭物、禽类粪便、禽类饮水或食物。

提示禽流感病毒既存在于禽体中，又可广泛分布于污水、案板及粪便等各种外环境中。清洗禽类污水、案板拭子的阳性率最高，提示活禽交易从业人员及购买人员是禽流感传播的高危人群。

经呼吸道传播是人感染禽流感病毒的主要传播途径[8]。城乡活禽市场禽类来源复杂,污染机会多,存在病毒循环的条件是禽流感病毒传播的一个重要渠道[9]。为此，建议曲靖市有关部门加强活禽市场监管力度，鼓励从业人员加强个人防护；在曲靖主城区实施活禽市场一日一清洗、一周一消毒、一月一休市的措施，休市期间禽类动物需全部撤出市场，对市场内的笼具、案板、环境进行清洗和消毒，同时做好活禽跨地区运输和检疫的工作。另外，应定期开展活禽市场、养殖业、农村散养禽类及外环境禽流感病毒监测，发现阳性结果及时处理。同时应加强对活禽市场从业人员的宣教，做好风险沟通。

[1]中华人民共和国卫生部.人禽流感诊疗方案[S].北京:中华人民共和国卫生部,2008.

[2]王陇德.人感染高致病性禽流感[M].北京:人民卫生出版社,2007.

[3]胡世雄,孙倩莱,刘富强,等.2009-2011年湖南省禽流感外环境监测结果分析[J],疾病监测,2014,29(3):207-209.

[4]宋蕊,成军.认识甲型H7N9禽流感[J].首都医科大学学报,2013,30(3):475-478.

[5]朱碧柳,黄国华,麦炜,等.2011-2013年肇庆市禽流感职业暴露人群及外环境病毒分布监测分析[J].现代预防医学,2015,42(8):1386-1388.

[6]曾乐,洪峰,陆朝国,等.贵阳市禽类相关外环境1013份标本中禽流感病毒检测结果分析[J].现代预防医学,2016,43(18):3311-3313.

[7]高强,苏琦,范刚,等.2011—2013年淮安市职业暴露人群血清学和环境禽流感监测分析[J].现代预防医学,2015,42(3):410-411.

[8]人禽流感专家组.中国高致病性禽流感A/H5N1病毒感染病例临床管理专家共识（草案）[J].中华结核和呼吸杂志,2009,32(5):329-334.

[9]陈燕萍,朱荣健,陈婷,等.2010—2012年南宁市职业暴露人群血清学和环境高致病性禽流感监测分析[J].职业与健康,2013,29(23):3066-3068.

Analysis on the Monitoring Results of Avian Influenza External Environment in Qujing,Yunnan from January 2016 and January to February 2017

ZHU Xiang-hui,CHEN Xiao-li,YU Zheng-quan,WANG Xiu-ying,WANG Jian-hong
Department of Prevention and Control of Acute Infectious Disease,Qujing Disease Prevention and Control Center,Qujing,Yunnan Province,655000 China

s]ObjectiveThis paper tries to understand the distribution of H5,H7 and H9 subtype avian influenza viruses in external environment in Qujing,Yunnan province,and provide evidence for the prevention and control of human infection with avian influenza virus.MethodsExternal environment samples in Qujing from January 2016 and January to February 2017 were collected and avian influenza virus nucleic acid was tested by RT-PCR;the positive samples were exposed to further H5,H7 and H9 subtype testing;the results were analyzed by Excel and software.ResultsA total of 126 external environment samples were collected from January 2016 and January to February 2017 and 34 were tested of influenza A virus nucleic acid positive,accounting for 26.98%.H9 subtype positive detection rate reached 15.87%;as for different collecting places,the highest positive detection rate occurs in live poultry markets,amounting to 68.75%;as for different collecting places,the highest positive rates occur in poultry washing water and slaughtering board,amounting to 57.14%and 50.00%respectively.ConclusionH5,H7 and H9 subtype avian influenza virus existed in the external environment in Qujing,such as those live poultry markets,and the risk of human infection was high.The targeted measures to prevent and control human infection with avian influenza virus should be strengthened;the management of live poultry markets and more publicity of health education should be increased.

Avian influenza virus;External environment;Monitoring result

R1

A

1672-5654（2017）08（b）-0008-03

2017-05-11）

10.16659/j.cnki.1672-5654.2017.23.008

朱向晖（1973-），男，云南曲靖人，本科，副主任医师，主要从事疾病监测与控制工作。