高效液相色谱法测定茵栀黄口服液中黄芩苷的含量

刘芳

431000湖南省常德市食品药品检验所

高效液相色谱法测定茵栀黄口服液中黄芩苷的含量

刘芳

431000湖南省常德市食品药品检验所

目的：探讨茵栀黄口服液主要有效成分黄芩苷含量测定方法。方法：采用高效液相色谱(HPLC)法，以甲醇-水-磷酸为流动相，测对照品的精密度。结果：样品平均加样回收率99.1%，浓度13.8～14.3 μg/mL范围内有良好的线性关系。精密度、稳定性及回收率均良好。结论：HPLC法简便、快速、准确、重复性好、专属性强，可作为茵栀黄口服液中黄芩苷的含量测定方法，以控制该制剂的质量。

茵栀黄口服液；含量；高效液相色谱法；黄芩苷

茵栀黄口服液主要药物成分包括金银花、栀子、黄芩苷、茵陈等，具有清热、解毒、利湿、退黄等功效，主要用于治疗各类型肝炎，尤其是对甲型、乙型病毒性肝炎、慢性乙型肝炎等疗效独特[1，2]。茵栀黄口服液有效成分主要是黄芩苷[3]，测定茵栀黄口服液中黄芩苷含量是评估药效的重要指标。为加强本品的质量控制及监督效果，本研究采用HPLC法测定茵栀黄口服液中黄芩苷含量，操作简便、测量准确、重复率高。

资料与方法

仪器：Agilent 1100高效液相色谱仪。试剂：本试验所用甲醇为色谱纯，试验用水为二次蒸馏水，其余试剂均为分析纯。茵栀黄口服液由山东鲁南制药股份有限公司提供，黄芩苷对照品购于中国药品生物制品检定所。色谱条件选择：①色谱柱：Hypersil OSD-2C18柱(150 nm×4.6 nm，5 μm)；②流动相：甲醇:水:磷酸=47:53:0.2；③检测波长：280 nm；④分离度：R＞1.5，经过黄芩苷峰计算，理论塔板数应＞2 500。

对照品溶液的制备：精密称取黄芩苷对照品10 mg，置于50 mL量瓶中，加50%的甲醇适量，震荡加热溶解后于室温下冷却并以50%甲醇定容，得200 μg/mL黄芩苷对照品贮备液。精密量取该贮备液5 mL，置10 mL量瓶中，用甲醇定容，得100 μg/mL黄芩苷对照品溶液。

供试品溶液的制备：将茵栀黄口服液1 mL转移至100 mL量瓶中，加入50%的甲醇稀释，定容至刻度，制得上样溶液。取续滤液用0.45 μm的微孔膜过滤，滤液作为供试品溶液。精密量取茵栀黄口服液1 mL，置100 mL棕色量瓶中，加甲醇定容。吸取适量上样溶液注入小玻璃管中，将清洗干净的聚砜中空纤维弯成U型，置于小玻璃管中，于4×103r/min离心15 min，即得供试品溶液。

精密度试验：吸取同种浓度的对照品溶液(10 μL)，重复进样5次，依法测定，记录峰面积。测得其含量分别为414.18 μg/mL、414.22 μg/mL、 414.17 μg/mL、 414.23 μg/mL、414.20 μg/mL。其相对标准偏差RSD=0.83%(n=5)，证明该方法测定黄芩苷的精密度良好。

样品含量测定：制备方法与供试品溶液制备相同。制备完毕，对2个不同批号的样品进行依次测定，测得含量分别为382.74 μg/mL、382.20 μg/mL。见表1～2。

结 果

对于茵栀黄口服液采用以甲醇-水-磷(47:53:0.2)作为流动相，采用HPLC法测定黄芩苷成分具有良好的线性，精密度高、稳定性好、回收率高。

讨 论

茵栀黄口服液是采用茵陈、栀子、黄芩制备而成，具有清热利湿、凉血解毒、利胆退黄、泻火除烦和止血安胎功效[4，5]。其主要成分为黄芩苷，可治疗肺热咳嗽、湿热泻痢、热淋黄疸、目赤肿痛等症[6]。现代药理表明，黄芩苷具有良好的生物活性，具有抗病毒作用，能够增强机体免疫力，还能发挥解热镇静、降压、降脂、保肝利胆等作用[7-9]。

茵栀黄口服液中主要有效成分为黄芩苷，采用HPLC法提取并测定黄芩苷含量，是茵栀黄口服液质量控制的指标。目前，常使用薄层扫描法、双波长分光光度法和HPLC法等方法测定药材中黄芩苷含量。但是，茵栀黄口服液属于复方制剂，成分复杂，测定其中黄芩苷含量时会受到较多物质成分的干扰，常规的测定方法精确性不足。因此，本研究运用HPLC法测定茵栀黄口服液中黄芩苷含量，能够排除其他成分的干扰，并且具有操作简便、测定结果精密度高的优点[10]。

表1 组分含量(名称：峰2)

表2 组分含量(名称：黄芩苷)

[1]赵长普,党中勤,李鲜.茵栀黄口服液治疗急性黄疸型肝炎的疗效观察[J].西部医学,2010,22(8):1497-1498.

[2]中华人民共和国药典(一部)[S].北京:化学工业出版社,2010.

[3]蒋范任,蔡洪鲲,夏用恢,等.高效液相色谱法同时测定芩连片中巴马汀、小檗碱、黄芩苷、连翘苷的含量[J].中南药学,2015,13(12):1296-1299.

[4]江玲兴,汪祖光,陈骄华.高效液相色谱法测定茵栀黄注射液中黄芩苷和栀子苷的含量[J].中国医院药学杂志,2013,33(10):829-830.

[5]郑海峰,王英妹,武铁军,等.黄芩苷体外对人肺腺癌A549细胞增殖的影响[J].中华实验外科杂志,2012,29(8):1491-1493.

[6]叶其旺.高效液相色谱法同时测定茵栀黄颗粒中4种成分[J].新中医,2015,47(9):206-208.

[7]朱芹,黄湘杰.HPLC法同时测定三黄散中黄芩苷和盐酸小檗碱的含量[J].中国药师,2014,17(8):1432-1434.

[8]黄志军.黄芩苷药理作用研究进展[J].天津药学,2012,24(3):61-64.

[9]王孟华,曲玮,梁敬钰.黄芩的研究进展[J].海峡药学,2016,25(9):7-11.

[10]刘阿静,齐广才,刘珍叶,等.HPLC测定利咽解毒颗粒中黄芩苷和大黄素含量[J].中国实验方剂学杂志,2016,19(4):146-149.

湖北三部门联手规范医保监管

近日，湖北省人社厅、民政厅、卫生计生委就加强和规范医保监管工作联合发出通知，要求该省各地从加强对医保资金、医疗服务行为监管入手，加强和规范医保监督管理工作，完善各项管理制度和措施，建立多部门对定点医疗机构的联动监管模式，切实解决弄虚作假、采取不正当手段套取医保资金等问题。

(据www.news.cn)

Determination of Baicalin in Yinzhihuang oral liquid by HPLC

Liu Fang
Changde Institute of Food and Drug Control,Hunan Province 431000

Objective:To explore the method for the determination of baicalin in Yinzhihuang oral liquid.Methods:Precision of the reference product was used by HPLC with methanol water phosphoric acid as mobile phase,to measure the precision of the reference.Results:The average recovery rate of samples was 99.1%,and there was a good linear relationship in the range of 13.8 to 14.3 g/mL.The precision,stability and recovery are good.Conclusion:This method is simple,rapidly,accurately,and it also has reproducible and specific,so it can be used as the determination method of baicalin content in Yinzhihuang oral liquid,in order to control the quality of the preparation.

Yinzhihuang oral liquid;Content;High performance liquid chromatography;Baicalin

10.3969/j.issn.1007-614x.2017.23.8